摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1.前言 | 第12-23页 |
·植物的成花诱导 | 第12-16页 |
·光周期途径 | 第13页 |
·春化途径 | 第13-14页 |
·赤霉素途径 | 第14-15页 |
·自主途径 | 第15-16页 |
·植物启动子的研究 | 第16-21页 |
·植物启动子的结构 | 第17-19页 |
·植物启动子的分类 | 第19-20页 |
·植物启动子的研究方法和途径 | 第20-21页 |
·本研究的目的和内容 | 第21-23页 |
2.早实枳开花相关基因的表达分析 | 第23-37页 |
·材料 | 第23-24页 |
·实验材料 | 第23页 |
·主要试剂和仪器 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-28页 |
·早实枳的种植和处理 | 第24页 |
·RNA的提取和纯化 | 第24-26页 |
·第一链cDNA的合成 | 第26页 |
·合成第一条链质量检测 | 第26-27页 |
·定量PCR | 第27-28页 |
·结果和分析 | 第28-35页 |
·RNA提取和反转录 | 第28页 |
·Real time PCR结果和分析 | 第28-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
·RNA的提取 | 第35页 |
·定量PCR引物设计 | 第35页 |
·定量PCR结果的分析方法 | 第35-37页 |
3.早实枳PTFLC启动子的克隆 | 第37-58页 |
·前言 | 第37页 |
·材料 | 第37-40页 |
·实验材料 | 第37页 |
·主要试剂和仪器 | 第37-38页 |
·主要菌株和载体 | 第38-39页 |
·常用试剂和配制方法 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-51页 |
·基因组DNA提取 | 第40-41页 |
·基因组的酶切建库与纯化 | 第41页 |
·接头与DNA酶切片段的连接 | 第41-42页 |
·接头连接 | 第42页 |
·特征片段侧翼序列染色体步移的引物设计 | 第42-43页 |
·染色体步移PCR反应 | 第43-44页 |
·扩增产物的回收、克隆和测序 | 第44-47页 |
·PtFLC启动子表达载体的构建 | 第47-50页 |
·工程菌的制备 | 第50-51页 |
·结果和分析 | 第51-56页 |
·DNA提取和酶切效果 | 第51-53页 |
·染色体步移结果 | 第53-54页 |
·启动子序列及分析 | 第54-55页 |
·表达载体构建 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-58页 |
·关于染色体步移技术的条件优化 | 第56-58页 |
4.早实枳PTFLC启动子和不同剪切本的转化和功能分析 | 第58-68页 |
·材料 | 第58-59页 |
·实验材料 | 第58页 |
·主要试剂 | 第58页 |
·常用菌株 | 第58-59页 |
·方法 | 第59-61页 |
·拟南芥的种植和转化 | 第59页 |
·转基因拟南芥抗性筛选和鉴定 | 第59-60页 |
·PtFLC不同转录本转基因拟南芥表型观察 | 第60页 |
·PtFLC启动子转基因拟南芥GUS染色 | 第60-61页 |
·结果和分析 | 第61-64页 |
·转基因拟南芥PCR鉴定 | 第61-62页 |
·PtFLC启动子转基因植株GUS染色 | 第62页 |
·PtFLC不同转录本蛋白质预测和理化性质分析 | 第62页 |
·拟南芥开花天数统计 | 第62-64页 |
·讨论 | 第64-68页 |
·PtFLC不同转录本的功能 | 第64-66页 |
·对农杆菌介导的遗传转化的注意事项 | 第66-67页 |
·本实验可以开展的下一步工作 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
附录 | 第74-76页 |
致谢 | 第76页 |