| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-18页 |
| ·α-淀粉酶简介 | 第9页 |
| ·特殊性质α-淀粉酶的研究开发 | 第9-11页 |
| ·酸性α-淀粉酶 | 第11-16页 |
| ·酸性α-淀粉酶特性 | 第11-12页 |
| ·酸性α-淀粉酶耐酸性的机制 | 第12页 |
| ·酸性α-淀粉酶的主要来源 | 第12-13页 |
| ·酸性α-淀粉酶的应用 | 第13-16页 |
| ·酸性α-淀粉酶研究现状 | 第16-18页 |
| 2 引言 | 第18-19页 |
| 3 材料与方法 | 第19-30页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·菌株与载体 | 第19页 |
| ·试剂与药品 | 第19页 |
| ·所用试剂的配制 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·有关试验单元的操作流程 | 第21-23页 |
| ·酸性α-淀粉酶基因的克隆 | 第21-22页 |
| ·酸性α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达、纯化 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-30页 |
| ·酸性α-淀粉酶生产菌的鉴定试验 | 第23-24页 |
| ·酸性α-淀粉酶活力测定 | 第24-25页 |
| ·酸性α-淀粉酶产生菌基因组DNA 的提取（CTAB 法） | 第25页 |
| ·酸性α-淀粉酶基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·重组载体的构建 | 第26页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌阳性转化子的获得 | 第27页 |
| ·目的基因在大肠杆菌中的表达检测 | 第27页 |
| ·表达产物的纯化 | 第27-28页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第28页 |
| ·重组酸性α-淀粉酶的酶学性质的分析 | 第28-30页 |
| 4 结果与分析 | 第30-47页 |
| ·酸性α-淀粉酶产生菌 B-5 菌株的菌种鉴定 | 第30-33页 |
| ·酸性α-淀粉酶基因的克隆 | 第33页 |
| ·PCR 扩增amy 基因 | 第33页 |
| ·amy 基因的序列分析 | 第33-40页 |
| ·测序结果 | 第33-34页 |
| ·amy 序列比对分析 | 第34-37页 |
| ·amy 生物信息学预测 | 第37-40页 |
| ·酸性α-淀粉酶基因的原核表达 | 第40-43页 |
| ·pET21a-amy 重组载体的构建 | 第40-41页 |
| ·pET21a-amy 表达产物检测结果 | 第41-42页 |
| ·pET21a-amy 表达产物的纯化结果 | 第42-43页 |
| ·重组α-淀粉酶的基本酶学性质 | 第43-45页 |
| ·最适反应温度 | 第43页 |
| ·温度稳定性 | 第43-44页 |
| ·最适反应pH | 第44页 |
| ·pH 稳定性 | 第44-45页 |
| ·底物特异性的测定 | 第45页 |
| ·动力学分析 | 第45-46页 |
| ·酶水解产物的分析 | 第46-47页 |
| 5 结论与讨论 | 第47-49页 |
| ·结论 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |