| 摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-10页 |
| 缩略语表 | 第14-16页 |
| 绪论 | 第16-20页 |
| 第一章 E3泛素连接酶CHIP在口腔鳞癌发生、发展中生物学作用的探讨-7 - | 第20-49页 |
| 引言 | 第20页 |
| 1.1 材料与方法 | 第20-39页 |
| 1.1.1 主要实验仪器 | 第20-22页 |
| 1.1.2 人口腔鳞癌细胞系的复苏、培养、扩增、与冻存 | 第22-25页 |
| 1.1.3 质粒扩增与转染 | 第25-27页 |
| 1.1.4 病毒包装及病毒感染、稳转细胞获取 | 第27-28页 |
| 1.1.5 蛋白免疫印迹实验(Western Blotting) | 第28-33页 |
| 1.1.6 细胞增殖实验(MTT法) | 第33页 |
| 1.1.7 细胞平板克隆形成实验 | 第33-34页 |
| 1.1.8 细胞迁移能力实验(Transwell法) | 第34-35页 |
| 1.1.9 细胞侵袭能力实验(Transwell法) | 第35页 |
| 1.1.10 流式细胞仪检测细胞凋亡实验(AnnexinⅤ/PI法) | 第35-36页 |
| 1.1.11 裸鼠皮下成瘤实验 | 第36-37页 |
| 1.1.12 HE染色以及免疫组织化学实验 | 第37-39页 |
| 1.1.13 统计学分析 | 第39页 |
| 1.2 实验结果 | 第39-47页 |
| 1.2.1 4种口腔鳞癌细胞系增殖能力检测 | 第39页 |
| 1.2.2 E3泛素连接酶CHIP蛋白表达水平的变化对口腔鳞癌细胞增殖能力影响的研究 | 第39-41页 |
| 1.2.3 E3泛素连接酶CHIP蛋白表达水平的变化对口腔鳞癌细胞平板克隆形成能力影响的研究 | 第41-42页 |
| 1.2.4 E3泛素连接酶CHIP蛋白表达水平的变化对口腔鳞癌细胞迁移能力影响的研究 | 第42-43页 |
| 1.2.5 E3泛素连接酶CHIP蛋白表达水平的变化对口腔鳞癌细胞侵袭能力影响的研究 | 第43-44页 |
| 1.2.6 E3泛素连接酶CHIP蛋白表达水平的变化对口腔鳞癌细胞凋亡水平影响的研究 | 第44-45页 |
| 1.2.7 E3泛素连接酶CHIP蛋白表达水平的变化对口腔鳞癌细胞裸鼠皮下成瘤能力的影响 | 第45-47页 |
| 1.3 小结 | 第47-49页 |
| 第二章 E3泛素连接酶CHIP蛋白在口腔鳞癌发生、发展过程中临床意义的探讨 | 第49-65页 |
| 引言 | 第49-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第50-54页 |
| 2.1.1 主要实验仪器 | 第50页 |
| 2.1.2 组织芯片免疫组化及打分 | 第50页 |
| 2.1.3 细胞复苏、培养、扩增及传代 | 第50-51页 |
| 2.1.4 荧光定量PCR实验 | 第51-53页 |
| 2.1.5 微球培养实验 | 第53-54页 |
| 2.1.6 蛋白免疫印迹实验 | 第54页 |
| 2.1.7 统计学分析 | 第54页 |
| 2.2 实验结果 | 第54-63页 |
| 2.2.1 口腔鳞癌中E3泛素连接酶CHIP蛋白表达水平与临床病理指标的相关性研究 | 第54-56页 |
| 2.2.2 口腔鳞癌中E3泛素连接酶CHIP蛋白表达水平与临床预后的关系 | 第56-57页 |
| 2.2.3 E3泛素连接酶CHIP蛋白表达水平与口腔鳞癌癌细胞干性行为相关 | 第57-58页 |
| 2.2.4 在口腔上皮永生化细胞,白斑细胞,以及口腔鳞癌细胞和癌周正常黏膜细胞中E3泛素连接酶CHIP蛋白表达水平的变化 | 第58-60页 |
| 2.2.5 E3泛素连接酶CHIP蛋白在癌症中通过靶向调控底物蛋白发挥相应的生物学效 | 第60-61页 |
| 2.2.6 E3泛素连接酶CHIP蛋白能够影响头颈鳞癌干性相关蛋白CD166的表达水平 | 第61-63页 |
| 2.3 小结 | 第63-65页 |
| 第三章 E3泛素连接酶CHIP蛋白降低CD166蛋白的稳定性调控口腔鳞癌干性行为 | 第65-76页 |
| 引言 | 第65页 |
| 3.1 材料与方法 | 第65-67页 |
| 3.1.1 主要实验仪器。 | 第65-66页 |
| 3.1.2 细胞复苏、培养、扩增、与冻存 | 第66-67页 |
| 3.1.3 蛋白免疫印迹实验 | 第67页 |
| 3.1.4 细胞微球培养实验 | 第67页 |
| 3.1.5 细胞平板克隆形成实验 | 第67页 |
| 3.1.6 免疫组织化学染色 | 第67页 |
| 3.1.7 统计分析 | 第67页 |
| 3.2 实验结果 | 第67-74页 |
| 3.2.1 E3泛素连接酶CHIP蛋白能够降低口腔鳞癌细胞内源性与外源性CD166蛋白的表达水平 | 第67-68页 |
| 3.2.2 E3泛素连接酶CHIP蛋白能够降低内源性CD166蛋白的稳定性 | 第68-69页 |
| 3.2.3 减低内源性E3泛素连接酶CHIP蛋白的表达能够提高口腔鳞癌细胞CD166蛋白的表达水平 | 第69-70页 |
| 3.2.4 E3泛素连接酶CHIP蛋白影响CD166蛋白表达水平并能调控口腔鳞癌细胞干性行为 | 第70-73页 |
| 3.2.5 CHIP-CD166表达水平在4-NQO诱导小鼠舌癌模型中的变化 | 第73-74页 |
| 3.3 小结 | 第74-76页 |
| 第四章 E3泛素连接酶CHIP通过泛素-蛋白酶体通路调控CD166蛋白的稳定性 | 第76-88页 |
| 引言 | 第76页 |
| 4.1 材料与方法 | 第76-79页 |
| 4.1.1 主要实验仪器。 | 第76页 |
| 4.1.2 免疫共沉淀实验 | 第76-77页 |
| 4.1.3 免疫荧光共聚焦实验 | 第77-78页 |
| 4.1.4 裸鼠皮下成瘤、腹腔给药实验 | 第78-79页 |
| 4.1.5 免疫组织化学实验 | 第79页 |
| 4.1.6 统计分析 | 第79页 |
| 4.2 实验结果 | 第79-86页 |
| 4.2.1 E3泛素连接酶CHIP野生型、而非功能突变体降低口腔鳞癌细胞内源性CD166蛋白表达水平 | 第79-80页 |
| 4.2.2 在口腔鳞癌细胞中E3泛素连接酶CHIP与 CD166蛋白存在直接相互作用 | 第80-81页 |
| 4.2.3 蛋白酶体抑制剂能够阻断E3泛素连接酶CHIP对 CD166蛋白的降解 | 第81页 |
| 4.2.4 E3泛素连接酶CHIP能够引起CD166蛋白的泛素化降解 | 第81-83页 |
| 4.2.5 E3泛素连接酶CHIP对CD166蛋白表达水平的调控依赖于HSP90/HSP70 | 第83-84页 |
| 4.2.6 HSP90 抑制剂17-DMAG抑制口腔鳞癌细胞裸鼠成瘤 | 第84-86页 |
| 4.3 小结 | 第86-88页 |
| 第五章 癌症组织中CD166蛋白表达水平的变化及其临床意义的系统评价 | 第88-115页 |
| 引言 | 第88-89页 |
| 5.1 材料与方法 | 第89-91页 |
| 5.1.1 检索策略 | 第89页 |
| 5.1.2 纳入标准、排除标准 | 第89-90页 |
| 5.1.3 数据提取 | 第90页 |
| 5.1.4 数据分析 | 第90-91页 |
| 5.2 结果 | 第91-111页 |
| 5.2.1 检索结果 | 第91-92页 |
| 5.2.2 纳入研究特征 | 第92-103页 |
| 5.2.3 CD166表达水平与癌症风险的系统评价 | 第103-104页 |
| 5.2.4 CD166表达水平与癌症临床病理状态的系统评价 | 第104-106页 |
| 5.2.5 CD166表达水平与癌症临床结局及治疗预测的系统评价 | 第106-108页 |
| 5.2.6 敏感性分析 | 第108-111页 |
| 5.2.7 发表性偏倚 | 第111页 |
| 5.3 小结 | 第111-115页 |
| 讨论 | 第115-118页 |
| 结论 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 科研成果目录 | 第129-131页 |
