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猪IL-12与TGEV S1核酸疫苗联合免疫保护效果研究

摘要第9-11页
英文摘要第11-12页
1 前言第14-42页
    1.1 猪传染性胃肠炎病毒概述第14-20页
        1.1.1 猪传染性胃肠炎病毒的致病机制第14页
        1.1.2 猪传染性胃肠炎病毒的流行特点第14-15页
        1.1.3 猪传染性胃肠炎病毒的形态特征第15-16页
        1.1.4 猪传染性胃肠炎病毒的分类第16页
        1.1.5 猪传染性胃肠炎病毒的理化性质第16-17页
        1.1.6 猪传染性胃肠炎病毒的培养特性第17-18页
        1.1.7 猪传染性胃肠炎病毒的抗原特性第18-20页
        1.1.8 猪传染性胃肠炎病毒引起的机体免疫应答第20页
    1.2 猪传染性胃肠炎病毒的分子特征第20-29页
        1.2.1 猪传染性胃肠炎病毒的基因组结构第20-21页
        1.2.2 猪传染性胃肠炎病毒结构蛋白基因第21-23页
        1.2.3 猪传染性胃肠炎病毒的非结构蛋白基因第23-28页
        1.2.4 猪传染性胃肠炎病毒蛋白的表达和生物学功能第28-29页
    1.3 猪传染性胃肠炎疫苗第29-33页
        1.3.1 常规疫苗第29-30页
        1.3.2 基因工程疫苗第30-33页
    1.4 白细胞介素12研究进展第33-41页
        1.4.1 白细胞介素12的分子结构和信号传导途径第33-37页
        1.4.2 白细胞介素12的生物学活性第37-39页
        1.4.3 白细胞介素12在疾病感染中的治疗作用第39-41页
    1.5 研究目的及意义第41-42页
2 材料与方法第42-53页
    2.1 实验材料第42-43页
        2.1.1 实验动物第42页
        2.1.2 分子生物学试剂第42页
        2.1.3 生化试剂第42页
        2.1.4 试剂的配制和贮存第42-43页
        2.1.5 主要实验仪器设备第43页
        2.1.6 细胞株、毒株、载体及质粒第43页
    2.2 试验方法第43-53页
        2.2.1 猪传染性胃肠炎病毒分布情况调查和S基因的生物信息学分析第43-46页
        2.2.2 重组真核表达质粒pVAX1-pIL-12-(p40)-(p35)和pVAX1-TGEV-S1的制备第46-48页
        2.2.3 重组真核表达质粒pVAX1-pIL-12-(p40)-(p35)和pVAX1-TGEV-S1在BHK细胞中的体外瞬时表达第48页
        2.2.4 重组真核表达质粒pVAX1-pIL-12-(p40)-(p35)和pVAX1-TGEV-S1的仔猪免疫保护实验第48-53页
3 结果第53-100页
    3.1 猪传染性胃肠炎病毒感染分布情况的调查和S基因的生物信息学分析第53-57页
        3.1.1 TGEV感染的RT-PCR调查第53页
        3.1.2 TGEVS基因的生物信息学分析第53-57页
    3.2 pVAX1-TGEVS1和pVAX1-pIL-12(p40)-linker-pIL-12(p35)真核表达质粒的体外瞬时转染第57-58页
        3.2.1 内毒素检测第57页
        3.2.2 pVAX1-TGEVS1真核表达质粒的体外瞬时转染第57-58页
        3.2.3 pVAX1-pIL-12(p40)-linker-pIL-12(p35)真核表达质粒的体外瞬时转染第58页
    3.3 免疫仔猪TGEV攻毒后外周血中T淋巴细胞的增殖变化第58-59页
    3.4 免疫仔猪TGEV攻毒后外周血中不同亚型T淋巴细胞的动态变化第59-61页
        3.4.1 仔猪外周血中CD4+T淋巴细胞的动态变化第59-61页
        3.4.2 仔猪外周血中CD8+T淋巴细胞的动态变化第61页
    3.5 免疫仔猪TGEV攻毒后外周血中细胞毒性T淋巴细胞的含量第61-62页
    3.6 免疫仔猪TGEV攻毒后血清中抗TGEVS1IgG抗体含量的动态变化第62-63页
    3.7 免疫仔猪TGEV攻毒后血清中TGEV中和抗体的效价第63-64页
    3.8 免疫仔猪TGEV攻毒后血清中TGEV-IgA抗体的含量第64-65页
    3.9 免疫仔猪TGEV攻毒后血清中IL-4和IFN-γ含量的动态变化第65-67页
    3.10 免疫仔猪TGEV攻毒后肠道组织内的病毒分布第67-82页
    3.11 免疫仔猪TGEV攻毒后肠道组织内病理组织学变化第82-100页
4 讨论第100-107页
    4.1 TGEV感染分布情况的调查和S基因的生物信息学分析第100页
    4.2 TGEVS1核酸疫苗和免疫佐剂pIL-12的设计第100-101页
    4.3 重组真核表达质粒的体外瞬时转染第101页
    4.4 免疫仔猪TGEV攻毒后细胞免疫应答的动态变化第101-103页
    4.5 免疫仔猪TGEV攻毒后体液免疫应答的动态变化第103-105页
    4.6 免疫仔猪TGEV攻毒后血清中细胞因子IL-4和IFN-γ的水平第105页
    4.7 免疫仔猪TEGV攻毒后肠道组织中的病毒分布和病理变化第105-107页
5 结论第107-108页
致谢第108-109页
参考文献第109-129页
攻读博士学位期间发表的学术论文第129页

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