| 摘要 | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-17页 |
| 1.1 植物叶酸功能 | 第8-9页 |
| 1.2 植物体内叶酸合成途径及分布特征 | 第9-12页 |
| 1.3 植物叶酸提取及检测 | 第12-13页 |
| 1.4 植物叶酸生物强化 | 第13-14页 |
| 1.5 谷子叶酸研究进展 | 第14-15页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第15页 |
| 1.7 本研究的创新及技术路线 | 第15-17页 |
| 第二章 小米品种叶酸含量的测定 | 第17-26页 |
| 2.1 材料与主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第17页 |
| 2.1.2 仪器与试剂 | 第17-18页 |
| 2.2 叶酸提取方法 | 第18页 |
| 2.3 HPLC法测定叶酸 | 第18-19页 |
| 2.4 结果与分析 | 第19-24页 |
| 2.4.1 叶酸标准曲线方程及色谱图分析 | 第19-21页 |
| 2.4.2 叶酸加标回收率的测定 | 第21页 |
| 2.4.3 精密度、稳定性及重复性检测 | 第21-22页 |
| 2.4.4 谷子品种间叶酸含量差异分析 | 第22-24页 |
| 2.5 讨论与小结 | 第24-26页 |
| 第三章 谷子SIFPGS基因的克隆、序列特征及表达分析 | 第26-43页 |
| 3.1 材料与方法 | 第26-27页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第26页 |
| 3.1.2 试剂及菌种 | 第26页 |
| 3.1.3 引物序列 | 第26-27页 |
| 3.2 SIFPGS基因家族成员的分子克隆及测序 | 第27-31页 |
| 3.2.1 谷子总RNA的提取 | 第27页 |
| 3.2.2 反转录 | 第27-28页 |
| 3.2.3 PCR扩增及电泳检测 | 第28页 |
| 3.2.4 PCR产物纯化 | 第28-29页 |
| 3.2.5 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第29页 |
| 3.2.6 克隆T载体的构建及转化 | 第29页 |
| 3.2.7 阳性重组子的检测及测序 | 第29-30页 |
| 3.2.8 大肠杆菌质粒的提取 | 第30-31页 |
| 3.3 谷子全生育期叶酸含量测定及SIFPGS基因家族成员的表达分析 | 第31-32页 |
| 3.3.1 谷子全生育期关键组织叶酸提取及测定 | 第31页 |
| 3.3.2 SIFPGS基因家族成员的荧光定量PCR | 第31-32页 |
| 3.4 结果与分析 | 第32-41页 |
| 3.4.1 谷子RNA提取检测 | 第32-33页 |
| 3.4.2 谷子SIFPGS基因cDNA扩增产物的电泳检测 | 第33页 |
| 3.4.3 谷子SIFPGS基因家族成员的序列特征 | 第33-36页 |
| 3.4.4 谷子SiFPGS蛋白序列及进化树分析 | 第36-38页 |
| 3.4.5 谷子SIFPGS基因启动子序列元件分析 | 第38页 |
| 3.4.6 谷子SIFPGS基因家族成员组织特异性表达模式 | 第38-41页 |
| 3.5 讨论与小结 | 第41-43页 |
| 第四章 谷子SIFPGS基因过表达载体构建及遗传转化 | 第43-51页 |
| 4.1 材料与方法 | 第43-44页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第43页 |
| 4.1.2 载体及菌株 | 第43页 |
| 4.1.3 主要试剂及相关培养基 | 第43页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第43-44页 |
| 4.2 试验方法 | 第44-48页 |
| 4.2.1 基因目的片段及载体pBI121的富集纯化 | 第44-45页 |
| 4.2.2 目的片段及载体pBI121质粒的双酶切及连接 | 第45-46页 |
| 4.2.3 过表达载体pBI121-35S:SIFPGS的转化及验证 | 第46-47页 |
| 4.2.4 花侵染遗传转化拟南芥 | 第47页 |
| 4.2.5 T_1代转基因拟南芥株系的筛选及分子验证 | 第47-48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-49页 |
| 4.3.1 过表达载体pBI121-35S:SIFPGS重组质粒的分子验证 | 第48页 |
| 4.3.2 遗传转化拟南芥分析 | 第48-49页 |
| 4.3.3 T_1代拟南芥株系的分子验证 | 第49页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| Abstract | 第55-56页 |
| 缩略词 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
