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巴西橡胶树热研7-33-97五条染色体文库的构建及序列分析

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
1 引言第11-25页
    1.1 巴西橡胶树的研究概况第11-13页
        1.1.1 巴西橡胶树种质资源概况第11-12页
        1.1.2 巴西橡胶树抗病性和抗寒性研究进展第12-13页
        1.1.3 分子标记技术在橡胶树研究中的进展第13页
        1.1.4 巴西橡胶树基因组测序进展第13页
    1.2 染色体显微分离和微克隆技术第13-16页
        1.2.1 染色体显微分离和微克隆技术定义第13-14页
        1.2.2 染色体显微分离方法第14-15页
        1.2.3 植物染色体体外扩增方法第15-16页
    1.3 染色体的鉴定第16-18页
        1.3.1 Dot-blot杂交鉴定第16页
        1.3.2 Southen blot杂交鉴定第16-17页
        1.3.3 FISH杂交鉴定第17页
        1.3.4 核型分析鉴定第17-18页
    1.4 染色体文库的构建与鉴定第18-20页
        1.4.1 染色体文库的构建方法第18页
        1.4.2 文库的鉴定第18页
        1.4.3 质粒文库在植物染色体文库构建中的应用进展第18-20页
        1.4.4 热带植物单染色体文库构建研究进展第20页
        1.4.5 橡胶树单染色体文库构建研究进展第20页
    1.5 序列分析及基因功能注释第20-23页
        1.5.1 序列比对第21页
        1.5.2 基因功能注释第21-22页
        1.5.3 基因本体论与Blast2GO第22-23页
    1.6 本研究的目的意义及技术路线第23-25页
        1.6.1 研究的目的意义第23-24页
        1.6.2 本研究的技术路线第24-25页
2 材料与方法第25-39页
    2.1 试验材料第25-26页
        2.1.1 试验材料第25页
        2.1.2 试验试剂第25页
        2.1.3 试验的主要仪器第25-26页
    2.2 试验方法第26-39页
        2.2.1 染色体标本的制备第26-27页
        2.2.2 染色体的显微分离第27-28页
        2.2.3 单染色体的体外扩增第28-30页
        2.2.4 琼脂糖凝胶电泳检测第30页
        2.2.5 巴西橡胶树基因组DNA的提取与检测第30-31页
        2.2.6 Dot-blot验证第31-34页
        2.2.7 Southern blot验证第34-35页
        2.2.8 FISH验证第35-37页
        2.2.9 单染色体微克隆文库的构建第37-39页
3 结果与分析第39-74页
    3.1 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体显微分离过程第39页
    3.2 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体DNA体外扩增及检测第39-41页
    3.3 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体扩增产物的鉴定第41-50页
        3.3.1 热研7-33-97基因组DNA检测及酶切检测第41-42页
        3.3.2 热研7-33-97单染色体扩增产物的Dot-blot杂交分析第42-44页
        3.3.3 热研7-33-97五条单染色体扩增产物的Southern blot杂交验证第44-45页
        3.3.4 热研7-33-97单染色体扩增产物的FISH杂交验证第45-50页
    3.4 巴西橡胶树热研7-33-97的第3、7、13、15及16号染色体文库的构建与初步分析第50-74页
        3.4.1 巴西橡胶树单染色体文库构建体系的优化第50-51页
        3.4.2 巴西橡胶树热研7-33-97的第3、7、13、15及16号染色体文库的构建第51-52页
        3.4.3 阳性克隆子插入片段大小检测第52-53页
        3.4.4 阳性克隆子测序后blast分析及序列注释第53-65页
        3.4.5 巴西橡胶树热研7-33-97五条染色体文库序列Blast2GO软件分析第65-74页
4 讨论第74-80页
    4.1 巴西橡胶树染色体标本制备方法的选择第74页
    4.2 目标单染色体分离及有关污染的防控第74-75页
    4.3 巴西橡胶树单染色体体外扩增的方法及扩增产物的鉴定第75-77页
        4.3.1 单染色体体外扩增方法的选择第75-76页
        4.3.2 单染色体扩增产物的鉴定第76-77页
    4.4 巴西橡胶树单染色体文库的构建及文库质量鉴定第77-78页
    4.5 单染色体文库部分克隆子BLAST2GO分析第78-80页
5 结论第80-82页
参考文献第82-96页
附录Ⅰ第96-107页
附录Ⅱ第107-116页
附录Ⅲ第116-117页
附录Ⅳ第117-120页
本研究资金来源第120页
硕士期间发表论文第120-121页
致谢第121页

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