| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 1 引言 | 第11-25页 |
| 1.1 巴西橡胶树的研究概况 | 第11-13页 |
| 1.1.1 巴西橡胶树种质资源概况 | 第11-12页 |
| 1.1.2 巴西橡胶树抗病性和抗寒性研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.3 分子标记技术在橡胶树研究中的进展 | 第13页 |
| 1.1.4 巴西橡胶树基因组测序进展 | 第13页 |
| 1.2 染色体显微分离和微克隆技术 | 第13-16页 |
| 1.2.1 染色体显微分离和微克隆技术定义 | 第13-14页 |
| 1.2.2 染色体显微分离方法 | 第14-15页 |
| 1.2.3 植物染色体体外扩增方法 | 第15-16页 |
| 1.3 染色体的鉴定 | 第16-18页 |
| 1.3.1 Dot-blot杂交鉴定 | 第16页 |
| 1.3.2 Southen blot杂交鉴定 | 第16-17页 |
| 1.3.3 FISH杂交鉴定 | 第17页 |
| 1.3.4 核型分析鉴定 | 第17-18页 |
| 1.4 染色体文库的构建与鉴定 | 第18-20页 |
| 1.4.1 染色体文库的构建方法 | 第18页 |
| 1.4.2 文库的鉴定 | 第18页 |
| 1.4.3 质粒文库在植物染色体文库构建中的应用进展 | 第18-20页 |
| 1.4.4 热带植物单染色体文库构建研究进展 | 第20页 |
| 1.4.5 橡胶树单染色体文库构建研究进展 | 第20页 |
| 1.5 序列分析及基因功能注释 | 第20-23页 |
| 1.5.1 序列比对 | 第21页 |
| 1.5.2 基因功能注释 | 第21-22页 |
| 1.5.3 基因本体论与Blast2GO | 第22-23页 |
| 1.6 本研究的目的意义及技术路线 | 第23-25页 |
| 1.6.1 研究的目的意义 | 第23-24页 |
| 1.6.2 本研究的技术路线 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-39页 |
| 2.1 试验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第25页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 试验的主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-39页 |
| 2.2.1 染色体标本的制备 | 第26-27页 |
| 2.2.2 染色体的显微分离 | 第27-28页 |
| 2.2.3 单染色体的体外扩增 | 第28-30页 |
| 2.2.4 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第30页 |
| 2.2.5 巴西橡胶树基因组DNA的提取与检测 | 第30-31页 |
| 2.2.6 Dot-blot验证 | 第31-34页 |
| 2.2.7 Southern blot验证 | 第34-35页 |
| 2.2.8 FISH验证 | 第35-37页 |
| 2.2.9 单染色体微克隆文库的构建 | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-74页 |
| 3.1 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体显微分离过程 | 第39页 |
| 3.2 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体DNA体外扩增及检测 | 第39-41页 |
| 3.3 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体扩增产物的鉴定 | 第41-50页 |
| 3.3.1 热研7-33-97基因组DNA检测及酶切检测 | 第41-42页 |
| 3.3.2 热研7-33-97单染色体扩增产物的Dot-blot杂交分析 | 第42-44页 |
| 3.3.3 热研7-33-97五条单染色体扩增产物的Southern blot杂交验证 | 第44-45页 |
| 3.3.4 热研7-33-97单染色体扩增产物的FISH杂交验证 | 第45-50页 |
| 3.4 巴西橡胶树热研7-33-97的第3、7、13、15及16号染色体文库的构建与初步分析 | 第50-74页 |
| 3.4.1 巴西橡胶树单染色体文库构建体系的优化 | 第50-51页 |
| 3.4.2 巴西橡胶树热研7-33-97的第3、7、13、15及16号染色体文库的构建 | 第51-52页 |
| 3.4.3 阳性克隆子插入片段大小检测 | 第52-53页 |
| 3.4.4 阳性克隆子测序后blast分析及序列注释 | 第53-65页 |
| 3.4.5 巴西橡胶树热研7-33-97五条染色体文库序列Blast2GO软件分析 | 第65-74页 |
| 4 讨论 | 第74-80页 |
| 4.1 巴西橡胶树染色体标本制备方法的选择 | 第74页 |
| 4.2 目标单染色体分离及有关污染的防控 | 第74-75页 |
| 4.3 巴西橡胶树单染色体体外扩增的方法及扩增产物的鉴定 | 第75-77页 |
| 4.3.1 单染色体体外扩增方法的选择 | 第75-76页 |
| 4.3.2 单染色体扩增产物的鉴定 | 第76-77页 |
| 4.4 巴西橡胶树单染色体文库的构建及文库质量鉴定 | 第77-78页 |
| 4.5 单染色体文库部分克隆子BLAST2GO分析 | 第78-80页 |
| 5 结论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-96页 |
| 附录Ⅰ | 第96-107页 |
| 附录Ⅱ | 第107-116页 |
| 附录Ⅲ | 第116-117页 |
| 附录Ⅳ | 第117-120页 |
| 本研究资金来源 | 第120页 |
| 硕士期间发表论文 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121页 |
