| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一章 牛病毒性腹泻病毒PCR检测技术研究进展 | 第16-30页 |
| 1 文献报道的BVDVPCR方法 | 第19-22页 |
| 2 BVDV5'UTR的结构特征 | 第22-28页 |
| 3 小结与展望 | 第28-30页 |
| 第二章 基于恒温隔绝式荧光RT-PCR技术BVDV1型检测试剂盒的研制及应用 | 第30-45页 |
| 1 材料与方法 | 第31-36页 |
| 1.1 病毒(菌)株与临床样本 | 第31-32页 |
| 1.2 主要试剂 | 第32页 |
| 1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 1.4 引物、探针的设计与合成 | 第32-33页 |
| 1.5 核酸的提取 | 第33页 |
| 1.6 BVDV1型阳性标准品的制备 | 第33页 |
| 1.7 iiRT-PCR反应体系的优化 | 第33-34页 |
| 1.8 iiRT-PCR特异性评价 | 第34页 |
| 1.9 iiRT-PCR灵敏性测定 | 第34页 |
| 1.10 iiRT-PCR稳定性评价 | 第34页 |
| 1.11 BVDV1型iiRT-PCR检测试剂盒的研制 | 第34-35页 |
| 1.12 与现有BVDVPCR方法的比较 | 第35页 |
| 1.13 BVDV1型iiRT-PCR检测试剂盒的现场应用 | 第35-36页 |
| 1.14 BVDV1型iiRT-PCR检测试剂盒对商品化胎牛血清样本检测 | 第36页 |
| 1.15 BVDV1型iiRT-PCR检测试剂盒对商品化冻精样本检测 | 第36页 |
| 2 结果 | 第36-41页 |
| 2.1 iiRT-PCR优化的反应体系 | 第36页 |
| 2.2 iiRT-PCR特异性评价 | 第36-37页 |
| 2.3 iiRT-PCR灵敏性检测 | 第37页 |
| 2.4 iiRT-PCR稳定性评价 | 第37页 |
| 2.5 BVDV1型iiRT-PCR检测试剂盒的研制 | 第37-39页 |
| 2.6 与现有检测BVDV的方法的比较 | 第39-40页 |
| 2.7 BVDV1型iiRT-PCR检测试剂盒的现场检测结果 | 第40页 |
| 2.8 商品化胎牛血清样本检测结果 | 第40-41页 |
| 2.9 商品化牛冻精样本检测结果 | 第41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| 4 小结 | 第43-45页 |
| 第三章 川西北草原牦牛BVDV1型的病原流行病学调查 | 第45-53页 |
| 1 材料与方法 | 第46-47页 |
| 1.1 临床样本 | 第46页 |
| 1.2 主要试剂 | 第46页 |
| 1.3 主要仪器 | 第46页 |
| 1.4 核酸的提取 | 第46页 |
| 1.5 BVDV1 iiRT-PCR试剂盒基于荧光定量PCR仪的使用方法 | 第46页 |
| 1.6 川西北草原牦牛BVDV1型病原流行病学调查 | 第46-47页 |
| 2 结果 | 第47-50页 |
| 2.1 牦牛腹泻粪便样本病原流行病学调查结果 | 第47-49页 |
| 2.2 麦洼牦牛核心种群BVDV1型病原流行病学调查结果 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| 4 小结 | 第51-53页 |
| 结论及创新点 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-71页 |
| 附录一 | 第71-72页 |
| 附录二 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
