中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
前言 | 第13-14页 |
第一篇 文献综述 | 第14-22页 |
第一章 鸡白痢沙门菌研究概况 | 第14-18页 |
1.1 鸡白痢沙门菌病的流行现状 | 第14-15页 |
1.2 鸡白痢沙门菌病发病机理及国内外耐药现状 | 第15-16页 |
1.3 鸡白痢沙门菌病的防控趋势 | 第16-18页 |
第二章 沙门菌特异性噬菌体及其裂解酶的研究进展 | 第18-22页 |
2.1 噬菌体作为抑菌剂防治沙门菌 | 第18-19页 |
2.2 噬菌体应用的流行及局限性 | 第19页 |
2.3 裂解酶治疗的应用与发展 | 第19-22页 |
第二篇 研究内容 | 第22-59页 |
第一章 裂解酶LYSP2的酵母真核表达系统的构建 | 第22-42页 |
1 材料 | 第23-24页 |
1.1 主要仪器 | 第23页 |
1.2 菌株及质粒 | 第23页 |
1.3 试剂 | 第23页 |
1.4 试剂配制 | 第23-24页 |
1.5 引物设计与合成 | 第24页 |
2 方法 | 第24-32页 |
2.1 鸡白痢沙门菌的培养 | 第24-25页 |
2.2 沙门菌噬菌体YSP2的培养 | 第25页 |
2.3 沙门菌噬菌体YSP2基因组的提取 | 第25页 |
2.4 裂解酶LySP2基因的PCR扩增 | 第25-26页 |
2.5 表达载体pPICZ-LySP2的构建与鉴定 | 第26-28页 |
2.6 重组毕赤酵母菌株X33-pPICZ-LySP2的构建 | 第28-30页 |
2.7 重组毕赤酵母菌X33-pPICZ-LySP2的诱导发酵及条件优化 | 第30-31页 |
2.8 发酵上清液总蛋白浓度测定 | 第31页 |
2.9 发酵产物的电泳检测 | 第31-32页 |
3 结果 | 第32-39页 |
3.1 噬菌体YSP2全基因组提取结果 | 第32页 |
3.2 重组质粒pPICZαA-LySP2的鉴定结果 | 第32-33页 |
3.3 重组质粒pPICZα-LySP2序列测定结果 | 第33页 |
3.4 重组酵母菌株X33-pPICZ-LySP2的构建结果 | 第33-35页 |
3.5 重组酵母菌株X33-pPICZ-LySP2的发酵产酶结果 | 第35页 |
3.6 重组毕赤酵母菌X33-pPICZ-LySP2产酶条件的优化结果 | 第35-36页 |
3.7 重组菌株X33-pPICZ-LySP2的诱导产物SDS-PAGE分析结果 | 第36-37页 |
3.8 发酵产物的活性鉴定 | 第37-38页 |
3.9 发酵上清蛋白总浓度测定 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
4.1 噬菌体YSP2及其裂解酶LySP2 | 第39-40页 |
4.2 裂解酶LySP2的表达及活性 | 第40-41页 |
5 小结 | 第41-42页 |
第二章 重组裂解酶体外抑菌活性及雏鸡模型的治疗效果 | 第42-59页 |
1 材料 | 第42-43页 |
1.1 重组裂解酶、实验动物及菌株 | 第42-43页 |
1.2 主要仪器 | 第43页 |
2 方法 | 第43-47页 |
2.1 平板打孔法检测抑菌活性 | 第43页 |
2.2 重组酵母发酵产物最小抑菌浓度(MIC)测定 | 第43-44页 |
2.3 重组裂解酶的pH值稳定性测试 | 第44页 |
2.4 重组裂解酶的热稳定性测试 | 第44页 |
2.5 重组裂解酶制剂的安全性测试 | 第44页 |
2.6 鸡白痢沙门菌雏鸡感染模型的建立 | 第44-45页 |
2.7 重组裂解酶在清除鸡白痢感染雏鸡模型中的疗效 | 第45-47页 |
2.8 数据统计分析 | 第47页 |
3 结果 | 第47-55页 |
3.1 重组裂解酶抑菌活性鉴定结果 | 第47-48页 |
3.2 重组裂解酶MIC测定结果 | 第48-49页 |
3.3 重组裂解酶的热稳定性测试结果 | 第49页 |
3.4 重组裂解酶的pH值稳定性测试结果 | 第49页 |
3.5 重组裂解酶安全性检测结果 | 第49-50页 |
3.6 重组裂解酶在鸡白痢感染雏鸡模型中的疗效 | 第50-55页 |
4 讨论 | 第55-58页 |
4.1 裂解酶活性 | 第55-56页 |
4.2 裂解酶稳定性 | 第56-57页 |
4.3 裂解酶的体内活性 | 第57-58页 |
5 小结 | 第58-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
导师简介 | 第68-69页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |