| 中文摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 前言 | 第8-12页 |
| 材料和方法 | 第12-36页 |
| 1.材料 | 第12-14页 |
| 1.1 细胞及质粒 | 第12页 |
| 1.2 shRNA及siRNA | 第12-13页 |
| 1.3 试剂和抗体 | 第13-14页 |
| 1.4 耗材和仪器 | 第14页 |
| 2.方法 | 第14-36页 |
| 2.1 细胞培养 | 第14-16页 |
| 2.2 siRNA干扰 | 第16-17页 |
| 2.3 质粒构建 | 第17-19页 |
| 2.4 质粒瞬时转染 | 第19页 |
| 2.5 稳定细胞株的建立 | 第19-20页 |
| 2.6 免疫印迹 | 第20-25页 |
| 2.7 RT-PCR和qPCR | 第25-27页 |
| 2.8 免疫荧光 | 第27-28页 |
| 2.9 EPAS1启动子区甲基化检测 | 第28-31页 |
| 2.10 ChIP (Chromatin Immunoprecipitation,染色质免疫沉淀) | 第31-33页 |
| 2.11 细胞增殖实验 | 第33-34页 |
| 2.12 HUVEC微管形成实验 | 第34-35页 |
| 2.13 统计学分析 | 第35-36页 |
| 结果 | 第36-60页 |
| 1. HIF1α和HIF2α在缺氧过程中存在表达差异 | 第36-39页 |
| 2. HIF2α转录水平及转录活性受甲基化调控 | 第39-42页 |
| 3. MBD3调控MDA-MB-468乳腺癌细胞中EPAS1的转录 | 第42-45页 |
| 4. HIF1α和HIF2α不调控MBD3蛋白表达 | 第45-47页 |
| 5. MBD3调控MDA-MB-468乳腺癌细胞中EPAS1启动子的甲基化 | 第47-51页 |
| 6. 内源性MBD3调控MDA-MB-468乳腺癌细胞中EPAS1的转录 | 第51-53页 |
| 7. 内源性MBD3调控7860肾癌细胞中EPAS1的转录 | 第53-56页 |
| 8. 内源性MBD3调控EPAS1启动子区CpG甲基化 | 第56-58页 |
| 9. EPAS1和MBD3 mRNA在临床肿瘤组织标本中的表达 | 第58-60页 |
| 讨论 | 第60-63页 |
| 小结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-75页 |
| 文献综述 | 第75-109页 |
| 参考文献 | 第91-109页 |
| 缩略词 | 第109-111页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
