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甘蓝型油菜花青素易诱导突变体as的鉴定及对逆境胁迫的响应

摘要第5-6页
abstract第6-7页
第一章 绪论第13-23页
    1.1 油菜在国民经济中的地位与生产现状第13页
    1.2 影响油菜生产的主要因素第13-16页
        1.2.1 渍水胁迫对油菜农业生产的影响第14-15页
        1.2.2 菌核病对油菜农业生产的影响第15-16页
    1.3 植物花青素的研究进展第16-20页
        1.3.1 植物中的花青素自然突变体第16-17页
        1.3.2 植物花青素的积累与调控第17-20页
        1.3.3 植物花青素的生物学功能第20页
    1.4 研究目的与意义第20-21页
    1.5 研究内容和技术路线第21-23页
        1.5.1 主要研究内容第21-22页
        1.5.2 技术路线第22-23页
第二章 甘蓝型油菜花青素易诱导突变体as的蛋白质组学分析第23-40页
    2.1 实验材料和试剂第23-26页
        2.1.1 实验材料第23页
        2.1.2 主要试剂及配制第23-26页
        2.1.3 实验仪器设备第26页
    2.2 实验方法第26-32页
        2.2.1 野生型和突变体叶片花青素含量的测定第26-27页
        2.2.2 三氯乙酸/丙酮沉淀法提取叶片蛋白第27-28页
        2.2.3 考马斯亮蓝(Bradford)法测定蛋白浓度第28页
        2.2.4 第一向等电聚焦第28-30页
        2.2.5 第二向SDS-PAGE电泳第30-31页
        2.2.6 固定、染色以及脱色第31页
        2.2.7 图像扫描与分析第31-32页
        2.2.8 差异蛋白质谱鉴定第32页
    2.3 结果与分析第32-38页
        2.3.1 野生型和花青素易诱导突变体as的表型差异第32-34页
        2.3.2 野生型和花青素易诱导突变体as叶片蛋白差异表达谱第34-35页
        2.3.3 差异表达蛋白的鉴定及功能注释第35-37页
        2.3.4 差异蛋白互作分析第37-38页
    2.4 讨论第38-40页
第三章 渍水胁迫对花青素易诱导突变体as的影响第40-53页
    3.1 实验材料与试剂第40-41页
        3.1.1 实验材料第40页
        3.1.2 实验仪器第40页
        3.1.3 实验试剂及配制第40-41页
    3.2 实验方法第41-44页
        3.2.1 花青素易诱导突变体as发芽期渍水胁迫第41-42页
        3.2.2 花青素易诱导突变体as苗期渍水胁迫第42-44页
            3.2.2.1 标准曲线的绘制第42-43页
            3.2.2.2 生理指标的测定第43-44页
    3.3 实验结果与分析第44-51页
        3.3.1 渍水胁迫对发芽期花青素易诱导突变体as的影响第44-46页
        3.3.2 渍水胁迫对苗期花青素易诱导突变体as的影响第46页
        3.3.3 野生型和突变体苗期渍水胁迫生理指标差异第46-51页
            3.3.3.1 渍水胁迫对油菜幼苗叶片叶绿素含量的影响第46-48页
            3.3.3.2 渍水胁迫对油菜幼苗叶片花青素含量的影响第48-49页
            3.3.3.3 渍水胁迫对油菜幼苗叶片丙二醛含量的影响第49-50页
            3.3.3.4 渍水胁迫对油菜幼苗叶片可溶性糖含量的影响第50-51页
            3.3.3.5 渍水胁迫对油菜幼苗叶片可溶性蛋白含量的影响第51页
    3.4 讨论第51-53页
第四章 花青素易诱导突变体as发芽期渍水转录组学分析第53-75页
    4.1 实验材料第53页
    4.2 实验方法第53-58页
        4.2.1 TotalRNA的提取第53页
        4.2.2 TotalRNA纯度检测第53页
        4.2.3 转录组测序和数据分析第53-54页
        4.2.4 实时荧光定量PCR第54-58页
            4.2.4.1 cDNA的制备第54-55页
            4.2.4.2 实时荧光定量PCR检测第55-58页
    4.3 结果与分析第58-73页
        4.3.1 TotalRNA的提取与质量检测第58-60页
        4.3.2 野生型和突变体发芽期渍水胁迫后的转录组分析第60-64页
            4.3.2.1 统计测序数据的产量第60-61页
            4.3.2.2 参考序列比对第61-62页
            4.3.2.3 随机性分析第62-63页
            4.3.2.4 饱和度分析第63页
            4.3.2.5 样本相关性分析第63-64页
        4.3.3 差异表达分析第64-73页
            4.3.3.1 差异表达基因筛选第64-66页
            4.3.3.2 差异表达基因的聚类分析第66-67页
            4.3.3.3 差异表达基因的GO功能显著性富集分析第67-69页
            4.3.3.4 差异表达基因的KEGG功能显著性富集分析第69-71页
            4.3.3.5 差异表达基因的实时荧光定量PCR第71-73页
        4.3.4 新转录本预测第73页
    4.4 讨论第73-75页
第五章 花青素易诱导突变体as的菌核病抗性分析第75-81页
    5.1 材料与试剂第75页
        5.1.1 材料第75页
        5.1.2 试剂第75页
    5.2 方法第75-77页
        5.2.1 配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基第75-76页
        5.2.2 核盘菌的活化第76页
        5.2.3 油菜叶片接种核盘菌第76页
        5.2.4 台盼蓝染色第76-77页
    5.3 结果与分析第77-80页
        5.3.1 野生型与花青素易诱导突变体as在核盘菌侵染后的表型差异第77-79页
        5.3.2 野生型与花青素易诱导突变体as叶片菌斑面积统计第79页
        5.3.3 野生型和花青素易诱导突变体as叶片上核盘菌菌丝生长差异第79-80页
    5.4 讨论第80-81页
第六章 总结与展望第81-83页
    6.1 工作总结第81页
    6.2 展望第81-83页
参考文献第83-90页
致谢第90-91页
在学期间发表论文第91页
参加课题第91页

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