摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第13-23页 |
1.1 油菜在国民经济中的地位与生产现状 | 第13页 |
1.2 影响油菜生产的主要因素 | 第13-16页 |
1.2.1 渍水胁迫对油菜农业生产的影响 | 第14-15页 |
1.2.2 菌核病对油菜农业生产的影响 | 第15-16页 |
1.3 植物花青素的研究进展 | 第16-20页 |
1.3.1 植物中的花青素自然突变体 | 第16-17页 |
1.3.2 植物花青素的积累与调控 | 第17-20页 |
1.3.3 植物花青素的生物学功能 | 第20页 |
1.4 研究目的与意义 | 第20-21页 |
1.5 研究内容和技术路线 | 第21-23页 |
1.5.1 主要研究内容 | 第21-22页 |
1.5.2 技术路线 | 第22-23页 |
第二章 甘蓝型油菜花青素易诱导突变体as的蛋白质组学分析 | 第23-40页 |
2.1 实验材料和试剂 | 第23-26页 |
2.1.1 实验材料 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂及配制 | 第23-26页 |
2.1.3 实验仪器设备 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-32页 |
2.2.1 野生型和突变体叶片花青素含量的测定 | 第26-27页 |
2.2.2 三氯乙酸/丙酮沉淀法提取叶片蛋白 | 第27-28页 |
2.2.3 考马斯亮蓝(Bradford)法测定蛋白浓度 | 第28页 |
2.2.4 第一向等电聚焦 | 第28-30页 |
2.2.5 第二向SDS-PAGE电泳 | 第30-31页 |
2.2.6 固定、染色以及脱色 | 第31页 |
2.2.7 图像扫描与分析 | 第31-32页 |
2.2.8 差异蛋白质谱鉴定 | 第32页 |
2.3 结果与分析 | 第32-38页 |
2.3.1 野生型和花青素易诱导突变体as的表型差异 | 第32-34页 |
2.3.2 野生型和花青素易诱导突变体as叶片蛋白差异表达谱 | 第34-35页 |
2.3.3 差异表达蛋白的鉴定及功能注释 | 第35-37页 |
2.3.4 差异蛋白互作分析 | 第37-38页 |
2.4 讨论 | 第38-40页 |
第三章 渍水胁迫对花青素易诱导突变体as的影响 | 第40-53页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第40-41页 |
3.1.1 实验材料 | 第40页 |
3.1.2 实验仪器 | 第40页 |
3.1.3 实验试剂及配制 | 第40-41页 |
3.2 实验方法 | 第41-44页 |
3.2.1 花青素易诱导突变体as发芽期渍水胁迫 | 第41-42页 |
3.2.2 花青素易诱导突变体as苗期渍水胁迫 | 第42-44页 |
3.2.2.1 标准曲线的绘制 | 第42-43页 |
3.2.2.2 生理指标的测定 | 第43-44页 |
3.3 实验结果与分析 | 第44-51页 |
3.3.1 渍水胁迫对发芽期花青素易诱导突变体as的影响 | 第44-46页 |
3.3.2 渍水胁迫对苗期花青素易诱导突变体as的影响 | 第46页 |
3.3.3 野生型和突变体苗期渍水胁迫生理指标差异 | 第46-51页 |
3.3.3.1 渍水胁迫对油菜幼苗叶片叶绿素含量的影响 | 第46-48页 |
3.3.3.2 渍水胁迫对油菜幼苗叶片花青素含量的影响 | 第48-49页 |
3.3.3.3 渍水胁迫对油菜幼苗叶片丙二醛含量的影响 | 第49-50页 |
3.3.3.4 渍水胁迫对油菜幼苗叶片可溶性糖含量的影响 | 第50-51页 |
3.3.3.5 渍水胁迫对油菜幼苗叶片可溶性蛋白含量的影响 | 第51页 |
3.4 讨论 | 第51-53页 |
第四章 花青素易诱导突变体as发芽期渍水转录组学分析 | 第53-75页 |
4.1 实验材料 | 第53页 |
4.2 实验方法 | 第53-58页 |
4.2.1 TotalRNA的提取 | 第53页 |
4.2.2 TotalRNA纯度检测 | 第53页 |
4.2.3 转录组测序和数据分析 | 第53-54页 |
4.2.4 实时荧光定量PCR | 第54-58页 |
4.2.4.1 cDNA的制备 | 第54-55页 |
4.2.4.2 实时荧光定量PCR检测 | 第55-58页 |
4.3 结果与分析 | 第58-73页 |
4.3.1 TotalRNA的提取与质量检测 | 第58-60页 |
4.3.2 野生型和突变体发芽期渍水胁迫后的转录组分析 | 第60-64页 |
4.3.2.1 统计测序数据的产量 | 第60-61页 |
4.3.2.2 参考序列比对 | 第61-62页 |
4.3.2.3 随机性分析 | 第62-63页 |
4.3.2.4 饱和度分析 | 第63页 |
4.3.2.5 样本相关性分析 | 第63-64页 |
4.3.3 差异表达分析 | 第64-73页 |
4.3.3.1 差异表达基因筛选 | 第64-66页 |
4.3.3.2 差异表达基因的聚类分析 | 第66-67页 |
4.3.3.3 差异表达基因的GO功能显著性富集分析 | 第67-69页 |
4.3.3.4 差异表达基因的KEGG功能显著性富集分析 | 第69-71页 |
4.3.3.5 差异表达基因的实时荧光定量PCR | 第71-73页 |
4.3.4 新转录本预测 | 第73页 |
4.4 讨论 | 第73-75页 |
第五章 花青素易诱导突变体as的菌核病抗性分析 | 第75-81页 |
5.1 材料与试剂 | 第75页 |
5.1.1 材料 | 第75页 |
5.1.2 试剂 | 第75页 |
5.2 方法 | 第75-77页 |
5.2.1 配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基 | 第75-76页 |
5.2.2 核盘菌的活化 | 第76页 |
5.2.3 油菜叶片接种核盘菌 | 第76页 |
5.2.4 台盼蓝染色 | 第76-77页 |
5.3 结果与分析 | 第77-80页 |
5.3.1 野生型与花青素易诱导突变体as在核盘菌侵染后的表型差异 | 第77-79页 |
5.3.2 野生型与花青素易诱导突变体as叶片菌斑面积统计 | 第79页 |
5.3.3 野生型和花青素易诱导突变体as叶片上核盘菌菌丝生长差异 | 第79-80页 |
5.4 讨论 | 第80-81页 |
第六章 总结与展望 | 第81-83页 |
6.1 工作总结 | 第81页 |
6.2 展望 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
在学期间发表论文 | 第91页 |
参加课题 | 第91页 |