| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-18页 |
| 1 松花粉 | 第12页 |
| 2 多糖和硫酸酯化多糖以及其在抗肿瘤方面的研究现状 | 第12-15页 |
| 2.1 多糖及其研究现状 | 第12-14页 |
| 2.2 硫酸化多糖及其研究现状 | 第14-15页 |
| 3 基于核磁共振(NMR)技术的代谢组学 | 第15-17页 |
| 4 本课题的研究基础,研究目的及研究意义 | 第17-18页 |
| 第二章 松花粉粗多糖的分离纯化、硫酸酯化以及检测 | 第18-27页 |
| 1 材料与试剂 | 第18页 |
| 2 仪器与设备 | 第18-19页 |
| 3 实验步骤 | 第19-23页 |
| 3.1 制备云南松花粉多糖 | 第19页 |
| 3.2 破壁松花粉粗多糖含量的测定 | 第19-20页 |
| 3.3 常压制备色谱分析技术分离纯化松花粉粗多糖 | 第20-21页 |
| 3.4 对分离纯化的松花粉粗多糖进行纯度检测 | 第21页 |
| 3.5 制备磺化试剂 | 第21-22页 |
| 3.6 松花粉多糖的硫酸酯化、脱氨以及纯化 | 第22页 |
| 3.7 硫酸酯化多糖取代度的检测 | 第22-23页 |
| 3.8 红外光谱检测 | 第23页 |
| 4 实验结果 | 第23-25页 |
| 4.1 松花粉多糖含量为44.02% | 第23-24页 |
| 4.2 松花粉多糖的分离结果 | 第24页 |
| 4.3 松花粉多糖的纯度检测 | 第24-25页 |
| 5 松花粉多糖(PC)的硫酸酯化及红外光谱检测 | 第25-26页 |
| 5.1 硫酸酯化多糖(SPC)取代度为1.7 | 第25页 |
| 5.2 PC和 SPC红外光谱检测 | 第25-26页 |
| 6 讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 多糖酯化前后对H22细胞活性、细胞迁移以及细胞周期的影响 | 第27-42页 |
| 1 材料和试剂 | 第27-28页 |
| 2 仪器与设备 | 第28-29页 |
| 3 方法步骤 | 第29-35页 |
| 3.1 试剂配制 | 第29-30页 |
| 3.2 细胞培养 | 第30页 |
| 3.3 MTT实验 | 第30页 |
| 3.4 细胞划痕愈合实验 | 第30-31页 |
| 3.5 流式细胞仪(FCM)检测H22 细胞周期 | 第31页 |
| 3.6 荧光定量PCR检测细胞周期相关基因mRNA表达量 | 第31-35页 |
| 4 实验结果 | 第35-38页 |
| 4.1 MTT结果表明PC和 SPC均能抑制H22 细胞的增殖 | 第35页 |
| 4.2 PC和 SPC对 H22 细胞划痕愈合能力具有抑制作用 | 第35-36页 |
| 4.3 PC和 SPC引起H22 细胞周期阻滞 | 第36-38页 |
| 4.4 多糖酯化前后对H22 细胞周期有关基因表达量的影响 | 第38页 |
| 5 讨论 | 第38-42页 |
| 第四章 多糖酯化前后对H22荷瘤小鼠的影响 | 第42-61页 |
| 1 材料与试剂 | 第42-43页 |
| 1.1 实验动物及细胞系 | 第42页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第42-43页 |
| 2 实验过程 | 第43-45页 |
| 2.1 细胞培养与小鼠腹水传代 | 第43页 |
| 2.2 BALB/C小鼠H22 肝癌移植模型建立 | 第43页 |
| 2.3 预实验 | 第43-44页 |
| 2.4 正式实验 | 第44页 |
| 2.5 小鼠血清细胞因子的测定 | 第44页 |
| 2.6 小鼠血清核磁共振(~1H-NMR)预处理 | 第44页 |
| 2.7 ~1H-NMR实验条件及谱图分析 | 第44-45页 |
| 3 实验结果 | 第45-57页 |
| 3.1 多糖及硫酸酯化多糖对荷瘤小鼠瘤重的影响 | 第45-46页 |
| 3.2 血清中细胞因子的测定 | 第46-47页 |
| 3.3 血清核磁共振(1H-NMR)检测 | 第47-53页 |
| 3.4 核磁差异性代谢物分析 | 第53-55页 |
| 3.5 代谢通路分析 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-61页 |
| 结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
