| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 缩略词表 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 目的基因研究背景 | 第11-16页 |
| 1.1.1 Wx基因的研究背景 | 第11-12页 |
| 1.1.2 fgr基因的研究背景 | 第12-13页 |
| 1.1.3 SD1基因的研究背景 | 第13页 |
| 1.1.4 抽穗期相关基因的研究背景 | 第13-15页 |
| 1.1.5 GS3基因的研究背景 | 第15-16页 |
| 1.2 CRISPR/Cas9基因编辑技术概述 | 第16-19页 |
| 1.2.1 CRISPR-Cas系统的结构 | 第16-17页 |
| 1.2.2 CRISPR-Cas系统的适应免疫机制 | 第17页 |
| 1.2.3 CRISPR-Cas系统的分类 | 第17-18页 |
| 1.2.4 CRISPR/Cas9系统在水稻中的应用 | 第18-19页 |
| 1.3 本研究的目的意义 | 第19-20页 |
| 第一章 利用CRISPR/Cas9技术改良贵州香禾糯的株高和抽穗期 | 第20-40页 |
| 2 材料与方法 | 第20-22页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 供实验用水稻 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 CRISPR敲除载体的构建 | 第20-21页 |
| 2.2.2 农杆菌介导的水稻的遗传转化 | 第21页 |
| 2.2.3 水稻米质的测定方法 | 第21-22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-40页 |
| 3.1 双靶点CRISPR/Cas9载体构建 | 第22-23页 |
| 3.1.1 U6/U3-sgRNA载体的构建 | 第22页 |
| 3.1.2 sgRNA载体与pCXUN载体的连接 | 第22-23页 |
| 3.2 CRISPR/Cas9转基因植株T_0代的获取和阳性鉴定结果 | 第23-25页 |
| 3.2.1 农杆菌介导的遗传转化 | 第24页 |
| 3.2.2 转基因阳性单株的筛选 | 第24-25页 |
| 3.3 CRISPR/Cas9转基因植株的突变类型 | 第25-28页 |
| 3.4 贵州香禾糯突变体突变基因型功能分析 | 第28-32页 |
| 3.4.1 sd1突变基因型功能分析 | 第28-29页 |
| 3.4.2 Hd1突变基因型功能分析 | 第29-30页 |
| 3.4.3 Ghd7.1突变基因型功能分析 | 第30-32页 |
| 3.5 转基因植株的表型鉴定 | 第32-40页 |
| 3.5.1 贵州香禾糯突变体株高和抽穗期的表型鉴定 | 第32-34页 |
| 3.5.2 贵州香禾糯突变体农艺性状表型考察 | 第34-36页 |
| 3.5.3 贵州香禾糯突变体品质性状表型考察 | 第36-40页 |
| 第二章 利用CRISPR/Cas9技术将水稻不育系华2613S改为香糯型 | 第40-49页 |
| 2 材料与方法 | 第40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-49页 |
| 3.1 双靶点CRISPR/Cas9载体构建 | 第40页 |
| 3.2 CRISPR/Cas9转基因植株T0代的获取和阳性鉴定结果 | 第40-41页 |
| 3.3 CRISPR/Cas9转基因植株的突变类型 | 第41-43页 |
| 3.4 华 2613S突变体突变基因型功能分析 | 第43-45页 |
| 3.4.1 wx突变基因型功能分析 | 第43-44页 |
| 3.4.2 fgr突变基因型功能分析 | 第44-45页 |
| 3.5 华 2613S突变体直链淀粉含量及香味性状的表型鉴定 | 第45-49页 |
| 第三章 利用CRISPR/Cas9技术改良香玉玻粒型 | 第49-56页 |
| 2 材料与方法 | 第49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-53页 |
| 3.1 单靶点CRISPR/Cas9载体构建 | 第49页 |
| 3.2 CRISPR/Cas9转基因植株T0代的获取和阳性鉴定结果 | 第49页 |
| 3.3 CRISPR/Cas9转基因植株的突变类型 | 第49-50页 |
| 3.4 香玉玻突变体GS3突变基因型功能分析 | 第50-51页 |
| 3.5 香玉玻突变体粒长性状考察结果 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| 4.1 sd1基因不同突变体与株高的关系 | 第53页 |
| 4.2 Hd1基因与Ghd7.1基因对抽穗期的影响 | 第53页 |
| 4.3 抽穗期与日照时间的探讨 | 第53-54页 |
| 4.4 贵州香禾糯突变体材料非目的性状变异 | 第54页 |
| 4.5 wx基因调控水稻籽粒的直链淀粉含量 | 第54页 |
| 4.6 突变体材料的筛选 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 附录 | 第66-74页 |
| 附录 1：本研究中所用引物 | 第66-67页 |
| 附录 2：部分实验的详细步骤 | 第67-74页 |
| Protocol 1: SSR技术路线 | 第67页 |
| Protocol 2: 载体构建和遗传转化中各核心实验步骤 | 第67-68页 |
| Protocol 3: 水稻粳稻遗传转化体系 | 第68-71页 |
| Protocol 4: 水稻籼稻遗传转化体系 | 第71-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
