摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第1章 绪论 | 第13-34页 |
1.1 真菌细胞壁的结构与功能 | 第13-23页 |
1.1.1 葡聚糖的结构及类型 | 第15-18页 |
1.1.2 几丁质的结构及类型 | 第18-19页 |
1.1.3 细胞壁蛋白的类型及研究方法 | 第19-23页 |
1.2 细胞壁伸长的研究 | 第23-29页 |
1.2.1 担子菌子实体菌柄细胞壁伸长的研究 | 第23-26页 |
1.2.2 植物细胞壁伸长的研究 | 第26-29页 |
1.3 真菌细胞壁水解酶功能的研究 | 第29-30页 |
1.4 灰盖鬼伞背景介绍 | 第30-32页 |
1.5 本论文的研究目的和主要研究内容 | 第32-34页 |
第2章 灰盖鬼伞菌柄细胞壁伸长特性的研究 | 第34-45页 |
2.1 灰盖鬼伞菌柄伸长生长部位的确定 | 第34-36页 |
2.1.1 材料和方法 | 第34页 |
2.1.1.1 实验材料 | 第34页 |
2.1.1.2 培养基及培养条件 | 第34页 |
2.1.1.3 灰盖鬼伞菌柄伸长生长的测量 | 第34页 |
2.1.2 实验结果 | 第34-35页 |
2.1.3 讨论 | 第35-36页 |
2.2 灰盖鬼伞菌柄不同部位细胞壁伸长活性的检测 | 第36-38页 |
2.2.1 材料和方法 | 第36页 |
2.2.1.1 实验材料 | 第36页 |
2.2.1.2 菌柄不同部位伸长活性的检测 | 第36页 |
2.2.2 实验结果 | 第36-37页 |
2.2.3 讨论 | 第37-38页 |
2.3 pH对灰盖鬼伞顶端菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第38-41页 |
2.3.1 材料和方法 | 第38-39页 |
2.3.1.1 实验材料 | 第38页 |
2.3.1.2 不同pH直接对菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第38-39页 |
2.3.1.3 中性pH平衡后不同pH对菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第39页 |
2.3.2 实验结果 | 第39页 |
2.3.3 讨论 | 第39-41页 |
2.4 高温处理对灰盖鬼伞顶端菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第41-42页 |
2.4.1 材料和方法 | 第41页 |
2.4.1.1 实验材料 | 第41页 |
2.4.1.2 不同加热时间对菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第41页 |
2.4.2 实验结果 | 第41-42页 |
2.4.3 讨论 | 第42页 |
2.5 不同效应剂对菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第42-44页 |
2.5.1 材料和方法 | 第42-43页 |
2.5.1.1 实验材料 | 第42页 |
2.5.1.2 不同效应剂对菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第42-43页 |
2.5.2 实验结果 | 第43-44页 |
2.5.3 讨论 | 第44页 |
2.6 本章小结 | 第44-45页 |
第3章 灰盖鬼伞菌柄细胞壁伸长机制的研究 | 第45-74页 |
3.1 热不敏感细胞壁伸长特性的研究 | 第45-48页 |
3.1.1 材料和方法 | 第45-46页 |
3.1.1.1 实验材料 | 第45页 |
3.1.1.2 pH对热不敏感细胞壁伸长的影响 | 第45页 |
3.1.1.3 菌柄不同部位热不敏感细胞壁伸长活性的检测 | 第45-46页 |
3.1.2 实验结果 | 第46-47页 |
3.1.2.1 热不敏感细胞壁伸长的pH依赖性 | 第46页 |
3.1.2.2 热不敏感细胞壁伸长的区域依赖性 | 第46-47页 |
3.1.3 讨论 | 第47-48页 |
3.2 蜗牛消化液中expansin-like蛋白的分离纯化和特性研究 | 第48-55页 |
3.2.1 材料和方法 | 第48-50页 |
3.2.1.1 实验材料 | 第48页 |
3.2.1.2 蜗牛消化液的提取 | 第48页 |
3.2.1.3 消化液中expansin-like蛋白的分离纯化 | 第48-49页 |
3.2.1.4 蛋白质浓度的确定和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第49-50页 |
3.2.1.5 消化液中expansin-like蛋白的水解活性分析 | 第50页 |
3.2.1.6 消化液中expansin-lke蛋白的伸长活性分析 | 第50页 |
3.2.2 实验结果 | 第50-55页 |
3.2.2.1 蜗牛消化液中expansin-like蛋白的分离纯化 | 第50-52页 |
3.2.2.2 expansin-like蛋白的水解活性分析 | 第52-53页 |
3.2.2.3 expansin-like蛋白的伸长活性分析 | 第53-55页 |
3.2.3 讨论 | 第55页 |
3.3 蜗牛expansin-like蛋白重组热敏感细胞壁伸长作用的研究 | 第55-60页 |
3.3.1 材料和方法 | 第55-56页 |
3.3.1.1 实验材料 | 第55-56页 |
3.3.1.2 蜗牛expansin-like蛋白对热灭活菌柄不同部位细胞壁伸长活性的影响 | 第56页 |
3.3.1.3 pH对蜗牛expansin-like蛋白诱导热灭活菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第56页 |
3.3.1.4 不同浓度的蜗牛expansin-like蛋白对热灭活菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第56页 |
3.3.2 实验结果 | 第56-59页 |
3.3.2.1 蜗牛expansin-like蛋白对灰盖鬼伞菌柄不同部位细胞壁伸长活性的影响 | 第56-57页 |
3.3.2.2 蜗牛expansin-like蛋白在不同pH条件下对菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第57-58页 |
3.3.2.3 不同浓度的蜗牛expansin-like蛋白对热敏感细胞壁伸长活性的影响 | 第58-59页 |
3.3.3 讨论 | 第59-60页 |
3.4 灰盖鬼伞菌柄内源性expansin-like蛋白的提取和分离纯化 | 第60-66页 |
3.4.1 材料和方法 | 第60-62页 |
3.4.1.1 实验材料和培养方法 | 第60-61页 |
3.4.1.2 灰盖鬼伞子实体菌柄expansin-like蛋白的提取和分离纯化 | 第61-62页 |
3.4.2 实验结果 | 第62-65页 |
3.4.3 讨论 | 第65-66页 |
3.5 氢键破坏剂尿素对灰盖鬼伞菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第66-73页 |
3.5.1 材料和方法 | 第66-67页 |
3.5.1.1 实验材料 | 第66页 |
3.5.1.2 尿素对菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第66页 |
3.5.1.3 尿素模拟热不敏感细胞壁的伸长 | 第66-67页 |
3.5.1.4 尿素模拟热敏感细胞壁的伸长 | 第67页 |
3.5.1.5 尿素同时模拟热敏感和热不敏感细胞壁的伸长 | 第67页 |
3.5.2 实验结果 | 第67-72页 |
3.5.2.1 尿素对菌柄细胞壁伸长活性的影响 | 第67-68页 |
3.5.2.2 尿素模拟热不敏感细胞壁的伸长 | 第68-69页 |
3.5.2.3 尿素模拟热敏感细胞壁的伸长 | 第69-71页 |
3.5.2.4 尿素同时模拟热敏感和热不敏感细胞壁的伸长 | 第71-72页 |
3.5.3 讨论 | 第72-73页 |
3.6 本章小结 | 第73-74页 |
第4章 灰盖鬼伞菌柄不同部位的蛋白质组学和转录组学研究 | 第74-98页 |
4.1 灰盖鬼伞菌柄不同部位的比较蛋白质组学研究 | 第74-82页 |
4.1.1 材料和方法 | 第74-77页 |
4.1.1.1 实验材料 | 第74页 |
4.1.1.2 细胞壁蛋白的提取与定量 | 第74页 |
4.1.1.3 等电聚焦、SDS-PAGE电泳及染色 | 第74-76页 |
4.1.1.4 蛋白质的质谱鉴定 | 第76-77页 |
4.1.2 实验结果 | 第77-79页 |
4.1.2.1 双向电泳的图谱分析 | 第77-79页 |
4.1.2.2 差异蛋白的质谱鉴定 | 第79页 |
4.1.3 讨论 | 第79-82页 |
4.2 灰盖鬼伞菌柄不同部位的比较转录组学研究 | 第82-96页 |
4.2.1 材料和方法 | 第82-83页 |
4.2.1.1 实验材料 | 第82页 |
4.2.1.2 RNA的提取,cDNA文库的构建及Illumina测序 | 第82页 |
4.2.1.3 序列组装及生物信息学分析 | 第82-83页 |
4.2.2 实验结果 | 第83-96页 |
4.2.2.1 Solexa测序的原始数据和序列拼接 | 第83-85页 |
4.2.2.2 转录组基因的注释 | 第85页 |
4.2.2.3 GO功能分类研究和KEGG代谢通路分析 | 第85-89页 |
4.2.2.4 简单重复序列(SSR)分析 | 第89页 |
4.2.2.5 顶端菌柄和基部菌柄表达差异基因的比较分析 | 第89-96页 |
4.2.3 讨论 | 第96页 |
4.3 本章小结 | 第96-98页 |
第5章 灰盖鬼伞菌柄中糖苷酶的分离、鉴定和生理学功能的研究 | 第98-122页 |
5.1 材料和方法 | 第98-108页 |
5.1.1 实验材料和培养方法 | 第98页 |
5.1.2 糖苷酶的提取和分离纯化 | 第98-99页 |
5.1.3 蛋白质分析 | 第99-101页 |
5.1.4 胞外β-葡萄糖苷酶水解酶活性和转糖基酶活性的测定 | 第101-103页 |
5.1.5 温度、pH以及金属离子对胞外β-葡萄糖苷酶酶活的影响 | 第103-104页 |
5.1.6 胞外β-葡萄糖苷酶反应动力学参数的测定 | 第104页 |
5.1.7 灰盖鬼伞菌柄不同部位胞外β-葡萄糖苷酶mRNA和蛋白表达水平的差异分析 | 第104-106页 |
5.1.8 胞外β-葡萄糖苷酶对碱不溶性细胞壁多糖的水解作用 | 第106-108页 |
5.2 实验结果 | 第108-119页 |
5.2.1 胞外β-葡萄糖苷酶的纯化及特性 | 第108-111页 |
5.2.2 胞外β-葡萄糖苷酶的酶学性质分析 | 第111-115页 |
5.2.3 胞外β-葡萄糖苷酶的生理学功能分析 | 第115-119页 |
5.3 讨论 | 第119-121页 |
5.4 本章小结 | 第121-122页 |
第6章 全文总结 | 第122-124页 |
附录: 本论文所使用的仪器 | 第124-125页 |
参考文献 | 第125-138页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第138-139页 |
致谢 | 第139-140页 |