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灰盖鬼伞菌柄细胞壁伸长特性及细胞壁蛋白的功能研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第1章 绪论第13-34页
    1.1 真菌细胞壁的结构与功能第13-23页
        1.1.1 葡聚糖的结构及类型第15-18页
        1.1.2 几丁质的结构及类型第18-19页
        1.1.3 细胞壁蛋白的类型及研究方法第19-23页
    1.2 细胞壁伸长的研究第23-29页
        1.2.1 担子菌子实体菌柄细胞壁伸长的研究第23-26页
        1.2.2 植物细胞壁伸长的研究第26-29页
    1.3 真菌细胞壁水解酶功能的研究第29-30页
    1.4 灰盖鬼伞背景介绍第30-32页
    1.5 本论文的研究目的和主要研究内容第32-34页
第2章 灰盖鬼伞菌柄细胞壁伸长特性的研究第34-45页
    2.1 灰盖鬼伞菌柄伸长生长部位的确定第34-36页
        2.1.1 材料和方法第34页
            2.1.1.1 实验材料第34页
            2.1.1.2 培养基及培养条件第34页
            2.1.1.3 灰盖鬼伞菌柄伸长生长的测量第34页
        2.1.2 实验结果第34-35页
        2.1.3 讨论第35-36页
    2.2 灰盖鬼伞菌柄不同部位细胞壁伸长活性的检测第36-38页
        2.2.1 材料和方法第36页
            2.2.1.1 实验材料第36页
            2.2.1.2 菌柄不同部位伸长活性的检测第36页
        2.2.2 实验结果第36-37页
        2.2.3 讨论第37-38页
    2.3 pH对灰盖鬼伞顶端菌柄细胞壁伸长活性的影响第38-41页
        2.3.1 材料和方法第38-39页
            2.3.1.1 实验材料第38页
            2.3.1.2 不同pH直接对菌柄细胞壁伸长活性的影响第38-39页
            2.3.1.3 中性pH平衡后不同pH对菌柄细胞壁伸长活性的影响第39页
        2.3.2 实验结果第39页
        2.3.3 讨论第39-41页
    2.4 高温处理对灰盖鬼伞顶端菌柄细胞壁伸长活性的影响第41-42页
        2.4.1 材料和方法第41页
            2.4.1.1 实验材料第41页
            2.4.1.2 不同加热时间对菌柄细胞壁伸长活性的影响第41页
        2.4.2 实验结果第41-42页
        2.4.3 讨论第42页
    2.5 不同效应剂对菌柄细胞壁伸长活性的影响第42-44页
        2.5.1 材料和方法第42-43页
            2.5.1.1 实验材料第42页
            2.5.1.2 不同效应剂对菌柄细胞壁伸长活性的影响第42-43页
        2.5.2 实验结果第43-44页
        2.5.3 讨论第44页
    2.6 本章小结第44-45页
第3章 灰盖鬼伞菌柄细胞壁伸长机制的研究第45-74页
    3.1 热不敏感细胞壁伸长特性的研究第45-48页
        3.1.1 材料和方法第45-46页
            3.1.1.1 实验材料第45页
            3.1.1.2 pH对热不敏感细胞壁伸长的影响第45页
            3.1.1.3 菌柄不同部位热不敏感细胞壁伸长活性的检测第45-46页
        3.1.2 实验结果第46-47页
            3.1.2.1 热不敏感细胞壁伸长的pH依赖性第46页
            3.1.2.2 热不敏感细胞壁伸长的区域依赖性第46-47页
        3.1.3 讨论第47-48页
    3.2 蜗牛消化液中expansin-like蛋白的分离纯化和特性研究第48-55页
        3.2.1 材料和方法第48-50页
            3.2.1.1 实验材料第48页
            3.2.1.2 蜗牛消化液的提取第48页
            3.2.1.3 消化液中expansin-like蛋白的分离纯化第48-49页
            3.2.1.4 蛋白质浓度的确定和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第49-50页
            3.2.1.5 消化液中expansin-like蛋白的水解活性分析第50页
            3.2.1.6 消化液中expansin-lke蛋白的伸长活性分析第50页
        3.2.2 实验结果第50-55页
            3.2.2.1 蜗牛消化液中expansin-like蛋白的分离纯化第50-52页
            3.2.2.2 expansin-like蛋白的水解活性分析第52-53页
            3.2.2.3 expansin-like蛋白的伸长活性分析第53-55页
        3.2.3 讨论第55页
    3.3 蜗牛expansin-like蛋白重组热敏感细胞壁伸长作用的研究第55-60页
        3.3.1 材料和方法第55-56页
            3.3.1.1 实验材料第55-56页
            3.3.1.2 蜗牛expansin-like蛋白对热灭活菌柄不同部位细胞壁伸长活性的影响第56页
            3.3.1.3 pH对蜗牛expansin-like蛋白诱导热灭活菌柄细胞壁伸长活性的影响第56页
            3.3.1.4 不同浓度的蜗牛expansin-like蛋白对热灭活菌柄细胞壁伸长活性的影响第56页
        3.3.2 实验结果第56-59页
            3.3.2.1 蜗牛expansin-like蛋白对灰盖鬼伞菌柄不同部位细胞壁伸长活性的影响第56-57页
            3.3.2.2 蜗牛expansin-like蛋白在不同pH条件下对菌柄细胞壁伸长活性的影响第57-58页
            3.3.2.3 不同浓度的蜗牛expansin-like蛋白对热敏感细胞壁伸长活性的影响第58-59页
        3.3.3 讨论第59-60页
    3.4 灰盖鬼伞菌柄内源性expansin-like蛋白的提取和分离纯化第60-66页
        3.4.1 材料和方法第60-62页
            3.4.1.1 实验材料和培养方法第60-61页
            3.4.1.2 灰盖鬼伞子实体菌柄expansin-like蛋白的提取和分离纯化第61-62页
        3.4.2 实验结果第62-65页
        3.4.3 讨论第65-66页
    3.5 氢键破坏剂尿素对灰盖鬼伞菌柄细胞壁伸长活性的影响第66-73页
        3.5.1 材料和方法第66-67页
            3.5.1.1 实验材料第66页
            3.5.1.2 尿素对菌柄细胞壁伸长活性的影响第66页
            3.5.1.3 尿素模拟热不敏感细胞壁的伸长第66-67页
            3.5.1.4 尿素模拟热敏感细胞壁的伸长第67页
            3.5.1.5 尿素同时模拟热敏感和热不敏感细胞壁的伸长第67页
        3.5.2 实验结果第67-72页
            3.5.2.1 尿素对菌柄细胞壁伸长活性的影响第67-68页
            3.5.2.2 尿素模拟热不敏感细胞壁的伸长第68-69页
            3.5.2.3 尿素模拟热敏感细胞壁的伸长第69-71页
            3.5.2.4 尿素同时模拟热敏感和热不敏感细胞壁的伸长第71-72页
        3.5.3 讨论第72-73页
    3.6 本章小结第73-74页
第4章 灰盖鬼伞菌柄不同部位的蛋白质组学和转录组学研究第74-98页
    4.1 灰盖鬼伞菌柄不同部位的比较蛋白质组学研究第74-82页
        4.1.1 材料和方法第74-77页
            4.1.1.1 实验材料第74页
            4.1.1.2 细胞壁蛋白的提取与定量第74页
            4.1.1.3 等电聚焦、SDS-PAGE电泳及染色第74-76页
            4.1.1.4 蛋白质的质谱鉴定第76-77页
        4.1.2 实验结果第77-79页
            4.1.2.1 双向电泳的图谱分析第77-79页
            4.1.2.2 差异蛋白的质谱鉴定第79页
        4.1.3 讨论第79-82页
    4.2 灰盖鬼伞菌柄不同部位的比较转录组学研究第82-96页
        4.2.1 材料和方法第82-83页
            4.2.1.1 实验材料第82页
            4.2.1.2 RNA的提取,cDNA文库的构建及Illumina测序第82页
            4.2.1.3 序列组装及生物信息学分析第82-83页
        4.2.2 实验结果第83-96页
            4.2.2.1 Solexa测序的原始数据和序列拼接第83-85页
            4.2.2.2 转录组基因的注释第85页
            4.2.2.3 GO功能分类研究和KEGG代谢通路分析第85-89页
            4.2.2.4 简单重复序列(SSR)分析第89页
            4.2.2.5 顶端菌柄和基部菌柄表达差异基因的比较分析第89-96页
        4.2.3 讨论第96页
    4.3 本章小结第96-98页
第5章 灰盖鬼伞菌柄中糖苷酶的分离、鉴定和生理学功能的研究第98-122页
    5.1 材料和方法第98-108页
        5.1.1 实验材料和培养方法第98页
        5.1.2 糖苷酶的提取和分离纯化第98-99页
        5.1.3 蛋白质分析第99-101页
        5.1.4 胞外β-葡萄糖苷酶水解酶活性和转糖基酶活性的测定第101-103页
        5.1.5 温度、pH以及金属离子对胞外β-葡萄糖苷酶酶活的影响第103-104页
        5.1.6 胞外β-葡萄糖苷酶反应动力学参数的测定第104页
        5.1.7 灰盖鬼伞菌柄不同部位胞外β-葡萄糖苷酶mRNA和蛋白表达水平的差异分析第104-106页
        5.1.8 胞外β-葡萄糖苷酶对碱不溶性细胞壁多糖的水解作用第106-108页
    5.2 实验结果第108-119页
        5.2.1 胞外β-葡萄糖苷酶的纯化及特性第108-111页
        5.2.2 胞外β-葡萄糖苷酶的酶学性质分析第111-115页
        5.2.3 胞外β-葡萄糖苷酶的生理学功能分析第115-119页
    5.3 讨论第119-121页
    5.4 本章小结第121-122页
第6章 全文总结第122-124页
附录: 本论文所使用的仪器第124-125页
参考文献第125-138页
在读期间发表的学术论文及研究成果第138-139页
致谢第139-140页

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