中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 文献综述 | 第10-14页 |
1.1 灰霉病和灰葡萄孢 | 第10-11页 |
1.2 血红素生物合成途径 | 第11-13页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第13-14页 |
第2章 HBSP各突变体的获得和致病力验证 | 第14-46页 |
2.1 材料 | 第14-20页 |
2.1.1 菌株和载体 | 第14-15页 |
2.1.2 仪器和试剂 | 第15页 |
2.1.3 培养基 | 第15-17页 |
2.1.4 引物 | 第17-20页 |
2.2 方法 | 第20-38页 |
2.2.1 核酸的提取方法 | 第20-23页 |
2.2.2 分子生物学相关试验 | 第23-27页 |
2.2.3 灰葡萄孢总蛋白的提取与定量 | 第27-28页 |
2.2.4 western blot | 第28-31页 |
2.2.5 感受态细胞的制备与转化 | 第31-34页 |
2.2.6 农杆菌介导的灰葡萄孢遗传转化 | 第34-35页 |
2.2.7 载体构建 | 第35-37页 |
2.2.8 灰葡萄孢离体接种实验 | 第37-38页 |
2.3 结果与分析 | 第38-44页 |
2.3.1 血红素合成途径相关突变体的获得及分子鉴定 | 第38-42页 |
2.3.2 血红素合成途径相关突变体中目标基因的mRNA丰度分析 | 第42页 |
2.3.3 血红素合成途径相关突变体中目标基因的蛋白产物丰度分析 | 第42-43页 |
2.3.4 各突变体致病力验证 | 第43-44页 |
2.4 讨论 | 第44-46页 |
第3章 HBSP致病机理研究 | 第46-59页 |
3.1 材料 | 第46-47页 |
3.1.1 菌株 | 第46页 |
3.1.2 仪器和试剂 | 第46-47页 |
3.2 方法 | 第47-49页 |
3.2.1 台盼蓝染色 | 第47页 |
3.2.2 血红素相对含量的测定 | 第47-48页 |
3.2.3 侵染垫形成观察 | 第48页 |
3.2.4 过氧化氢敏感性观察 | 第48-49页 |
3.3 结果与分析 | 第49-58页 |
3.3.1 BcURD1功能缺陷突变体菌落生长减慢 | 第49-50页 |
3.3.2 BcURD1功能缺陷突变体侵染垫形成滞后 | 第50页 |
3.3.3 BcURD1功能缺陷突变体对光敏感 | 第50-52页 |
3.3.4 光照使BcURD1功能缺陷突变体致病力减弱 | 第52-53页 |
3.3.5 HBSP各突变体卟啉积累情况 | 第53-54页 |
3.3.6 BcURD1功能缺陷突变体对过氧化氢变敏感 | 第54-56页 |
3.3.7 HBSP各突变体体内的血红素含量下降 | 第56-57页 |
3.3.8 血红素能够增强灰葡萄孢的致病力 | 第57-58页 |
3.4 讨论 | 第58-59页 |
第4章 HBSP的诱导调控 | 第59-66页 |
4.1 材料 | 第59页 |
4.1.1 菌株 | 第59页 |
4.1.2 仪器和试剂 | 第59页 |
4.2 方法 | 第59-60页 |
4.2.1 白菜表皮侵染 | 第59-60页 |
4.2.2 qRT-PCR(Zhang et al., 2007; Livak and Schmittgen, 2001) | 第60页 |
4.3 结果与分析 | 第60-64页 |
4.3.1 △Bcurd1突变体在低氧条件下底物大量积累 | 第60-62页 |
4.3.2 病原菌侵染及低氧条件诱导血红素途径上调 | 第62-64页 |
4.4 讨论 | 第64-66页 |
第5章 结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
作者简介及科研成果 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |