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血红素生物合成途径在灰葡萄孢致病中的功能解析

中文摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第1章 文献综述第10-14页
    1.1 灰霉病和灰葡萄孢第10-11页
    1.2 血红素生物合成途径第11-13页
    1.3 本研究的目的和意义第13-14页
第2章 HBSP各突变体的获得和致病力验证第14-46页
    2.1 材料第14-20页
        2.1.1 菌株和载体第14-15页
        2.1.2 仪器和试剂第15页
        2.1.3 培养基第15-17页
        2.1.4 引物第17-20页
    2.2 方法第20-38页
        2.2.1 核酸的提取方法第20-23页
        2.2.2 分子生物学相关试验第23-27页
        2.2.3 灰葡萄孢总蛋白的提取与定量第27-28页
        2.2.4 western blot第28-31页
        2.2.5 感受态细胞的制备与转化第31-34页
        2.2.6 农杆菌介导的灰葡萄孢遗传转化第34-35页
        2.2.7 载体构建第35-37页
        2.2.8 灰葡萄孢离体接种实验第37-38页
    2.3 结果与分析第38-44页
        2.3.1 血红素合成途径相关突变体的获得及分子鉴定第38-42页
        2.3.2 血红素合成途径相关突变体中目标基因的mRNA丰度分析第42页
        2.3.3 血红素合成途径相关突变体中目标基因的蛋白产物丰度分析第42-43页
        2.3.4 各突变体致病力验证第43-44页
    2.4 讨论第44-46页
第3章 HBSP致病机理研究第46-59页
    3.1 材料第46-47页
        3.1.1 菌株第46页
        3.1.2 仪器和试剂第46-47页
    3.2 方法第47-49页
        3.2.1 台盼蓝染色第47页
        3.2.2 血红素相对含量的测定第47-48页
        3.2.3 侵染垫形成观察第48页
        3.2.4 过氧化氢敏感性观察第48-49页
    3.3 结果与分析第49-58页
        3.3.1 BcURD1功能缺陷突变体菌落生长减慢第49-50页
        3.3.2 BcURD1功能缺陷突变体侵染垫形成滞后第50页
        3.3.3 BcURD1功能缺陷突变体对光敏感第50-52页
        3.3.4 光照使BcURD1功能缺陷突变体致病力减弱第52-53页
        3.3.5 HBSP各突变体卟啉积累情况第53-54页
        3.3.6 BcURD1功能缺陷突变体对过氧化氢变敏感第54-56页
        3.3.7 HBSP各突变体体内的血红素含量下降第56-57页
        3.3.8 血红素能够增强灰葡萄孢的致病力第57-58页
    3.4 讨论第58-59页
第4章 HBSP的诱导调控第59-66页
    4.1 材料第59页
        4.1.1 菌株第59页
        4.1.2 仪器和试剂第59页
    4.2 方法第59-60页
        4.2.1 白菜表皮侵染第59-60页
        4.2.2 qRT-PCR(Zhang et al., 2007; Livak and Schmittgen, 2001)第60页
    4.3 结果与分析第60-64页
        4.3.1 △Bcurd1突变体在低氧条件下底物大量积累第60-62页
        4.3.2 病原菌侵染及低氧条件诱导血红素途径上调第62-64页
    4.4 讨论第64-66页
第5章 结论第66-67页
参考文献第67-73页
作者简介及科研成果第73-74页
致谢第74页

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