| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 缩略语表 | 第15-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-40页 |
| 1.1 芽孢杆菌的天然产物研究进展 | 第17-19页 |
| 1.2 芽孢杆菌天然产物的生物合成 | 第19-27页 |
| 1.2.1 聚酮合酶(PKS)途径 | 第20-23页 |
| 1.2.2 聚肽化合物合成途径 | 第23-26页 |
| 1.2.3 聚酮-非核糖体多肽合酶(PKS-NRPS)合成途径 | 第26-27页 |
| 1.3 Red/ET重组工程与天然产物生物合成基因簇的遗传操作 | 第27-36页 |
| 1.3.1 RedET重组工程简介 | 第27-28页 |
| 1.3.2 RedET重组的原理 | 第28-30页 |
| 1.3.3 Red/ET重组工程的操作步骤 | 第30-31页 |
| 1.3.4 细菌基因簇的直接克隆与异源表达 | 第31-32页 |
| 1.3.5 基因簇的修饰 | 第32-35页 |
| 1.3.6 基因簇异源表达宿主 | 第35-36页 |
| 1.4 海洋微生物次级代谢产物 | 第36-37页 |
| 1.5 立题依据和意义 | 第37-38页 |
| 1.6 本研究技术路线 | 第38-40页 |
| 第二章 解淀粉芽孢杆菌FZB42合成基因簇的克隆与异源表达 | 第40-84页 |
| 2.1 实验材料 | 第41-51页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第41-45页 |
| 2.1.2 培养基和抗生素 | 第45-46页 |
| 2.1.3 寡核苷酸合成和DNA测序 | 第46-50页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第50-51页 |
| 2.1.5 主要实验仪器 | 第51页 |
| 2.1.6 数据分析软件 | 第51页 |
| 2.2 实验方法 | 第51-60页 |
| 2.2.1 分子生物学实验方法 | 第51-59页 |
| 2.2.2 重组子的发酵及检测 | 第59-60页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第60-79页 |
| 2.3.1 四个基因簇的直接克隆 | 第60-64页 |
| 2.3.2 带有完整基因簇质粒的修饰 | 第64-68页 |
| 2.3.3 四个基因簇的异源表达 | 第68-75页 |
| 2.3.4 异源表达条件的优化 | 第75-77页 |
| 2.3.5 Pzn定点突变实验结果 | 第77-79页 |
| 2.4 讨论 | 第79-84页 |
| 2.4.1 Red/ET重组技术 | 第79-81页 |
| 2.4.2 基因簇的异源表达 | 第81-84页 |
| 第三章 海洋拮抗细菌的富集与分离 | 第84-94页 |
| 3.1 实验材料 | 第84-85页 |
| 3.1.1 实验样品 | 第84页 |
| 3.1.2 培养基 | 第84-85页 |
| 3.1.3 实验耗材和仪器 | 第85页 |
| 3.1.4 供试病原菌 | 第85页 |
| 3.2 实验方法 | 第85-87页 |
| 3.2.1 样品处理 | 第85-86页 |
| 3.2.2 细菌的分离、纯化和保藏 | 第86页 |
| 3.2.3 细菌的16S rDNA测序 | 第86页 |
| 3.2.4 细菌的抗菌活性测定 | 第86页 |
| 3.2.5 拮抗细菌发酵条件初探 | 第86-87页 |
| 3.2.6 发酵液抗菌活性检测 | 第87页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第87-92页 |
| 3.3.1 基于16S rDNA的菌株鉴定 | 第87-88页 |
| 3.3.2 分离到的细菌的抑菌活性 | 第88-89页 |
| 3.3.3 拮抗细菌的发酵条件初探 | 第89-91页 |
| 3.3.4 拮抗细菌SHZI1401~T的发酵粗提物质谱分析 | 第91-92页 |
| 3.4 讨论 | 第92-94页 |
| 全文总结与展望 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
| 攻读学位期间参与的学术会议 | 第108页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第108-109页 |
| 附件 | 第109页 |
