| 摘要 | 第6-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-11页 |
| 1.1 莲草直胸跳甲概述 | 第8-9页 |
| 1.2 转录组测序概述 | 第9页 |
| 1.3 羧酸酯酶研究进展 | 第9-11页 |
| 1.3.1 羧酸酯酶结构和组成 | 第9-10页 |
| 1.3.2 昆虫羧酸酯酶研究进展 | 第10页 |
| 1.3.3 羧酸酯酶应用前景 | 第10-11页 |
| 1.4 立题依据 | 第11页 |
| 2 材料与方法 | 第11-21页 |
| 2.1 试验材料及培养 | 第11-12页 |
| 2.1.1 虫源饲养 | 第11-12页 |
| 2.1.2 寄主植物 | 第12页 |
| 2.2 实验试剂及配制 | 第12-13页 |
| 2.3 主要仪器设备 | 第13-14页 |
| 2.4 莲草直胸跳甲成虫总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第14-15页 |
| 2.4.1 RNA提取 | 第14页 |
| 2.4.2 RNA提取纯度及浓度检测 | 第14页 |
| 2.4.3 RNA琼脂糖凝胶电泳检测 | 第14页 |
| 2.4.4 反转录合成cDNA | 第14-15页 |
| 2.5 转录组测序 | 第15-16页 |
| 2.5.1 转录组测序样品制备 | 第15页 |
| 2.5.2 搜索CarEs序列 | 第15-16页 |
| 2.5.3 聚类分析 | 第16页 |
| 2.6 莲草直胸跳甲成虫总RNA的提取 | 第16页 |
| 2.6.1 数字基因表达谱测序样品的制备 | 第16页 |
| 2.6.2 差异表达的CarEs基因的筛选 | 第16页 |
| 2.7 莲草直胸跳甲CarE基因全长cDNA验证 | 第16-19页 |
| 2.7.1 验证全长引物设计 | 第16-17页 |
| 2.7.2 基因扩增 | 第17页 |
| 2.7.3 PCR产物回收纯化 | 第17-18页 |
| 2.7.4 回收产物连接转化 | 第18-19页 |
| 2.7.5 核酸序列分析 | 第19页 |
| 2.8 实时定量PCR法验证差异表达基因 | 第19-20页 |
| 2.9 差异表达莲草直胸跳甲羧酸酯酶基因在不同龄期的表达 | 第20页 |
| 2.10 羧酸酯酶活性测定 | 第20-21页 |
| 3 结果与分析 | 第21-36页 |
| 3.1 莲草直胸跳甲转录组测序 | 第21-27页 |
| 3.1.1 莲草直胸跳甲转录组测序结果 | 第21-25页 |
| 3.1.2 莲草直胸跳甲CarE基因的系统发育进化分析 | 第25-27页 |
| 3.2 差异表达基因筛选 | 第27-28页 |
| 3.3 RNA提取结果 | 第28-29页 |
| 3.4 基因克隆结果 | 第29页 |
| 3.5 重测序序列验证 | 第29-32页 |
| 3.6 序列分析结果 | 第32-33页 |
| 3.6.1 蛋白序列 | 第32页 |
| 3.6.2 蛋白质一级结构 | 第32-33页 |
| 3.6.3 蛋白质二级结构 | 第33页 |
| 3.7 荧光定量PCR结果 | 第33-35页 |
| 3.7.1 莲草直胸跳甲取食不同植物后差异表达的CarE基因的验证 | 第33-34页 |
| 3.7.2 差异表达CarE基因不同龄期的表达特性 | 第34-35页 |
| 3.8 莲草直胸跳甲取食不同植物后羧酸酯酶活性 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-37页 |
| 4.1 高通量测序挖掘基因信息 | 第36页 |
| 4.2 重新测序 | 第36-37页 |
| 4.3 序列分析 | 第37页 |
| 4.4 差异表达基因表达 | 第37页 |
| 5 不足及有待研究的方向 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| Abstract | 第42-43页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
