| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-28页 |
| 1.1 表达系统 | 第10-12页 |
| 1.1.1 原核表达系统 | 第10页 |
| 1.1.2 真核表达系统 | 第10-12页 |
| 1.2 启动子 | 第12-15页 |
| 1.2.1 原核生物启动子 | 第12-13页 |
| 1.2.2 真核生物启动子 | 第13-14页 |
| 1.2.3 启动子的分类 | 第14-15页 |
| 1.3 报告基因 | 第15-18页 |
| 1.3.1 β-葡萄糖醛酸酶基因 | 第16-17页 |
| 1.3.2 β-半乳糖苷酶基因 | 第17页 |
| 1.3.3 SH BLE基因 | 第17-18页 |
| 1.4 碳源代谢 | 第18-21页 |
| 1.4.1 葡萄糖代谢 | 第18-19页 |
| 1.4.2 甘油代谢 | 第19页 |
| 1.4.3 木糖代谢 | 第19-21页 |
| 1.5 碳源代谢 | 第21-23页 |
| 1.5.1 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 | 第21-22页 |
| 1.5.2 磷酸甘油酸激酶 | 第22-23页 |
| 1.5.3 乙醇脱氢酶 | 第23页 |
| 1.6 酵母的表达策略 | 第23-25页 |
| 1.6.1 酵母质粒载体 | 第24-25页 |
| 1.6.2 同源重组和随机整合 | 第25页 |
| 1.7 马克思克鲁维酵母的特性 | 第25-28页 |
| 第2章 材料与方法 | 第28-42页 |
| 2.1 实验质粒与菌株 | 第28页 |
| 2.2 实验试剂与仪器 | 第28-29页 |
| 2.2.1 工具酶和试剂 | 第28页 |
| 2.2.2 基因组提取试剂 | 第28页 |
| 2.2.3 酵母转化试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.4 测定酶活试剂 | 第29页 |
| 2.2.5 培养基 | 第29页 |
| 2.2.6 实验仪器 | 第29页 |
| 2.3 实验流程 | 第29-42页 |
| 2.3.1 构建同源重组型酵母表达载体 | 第30-34页 |
| 2.3.2 将表达框定点整合到K marxianus YHJ010染色体的LEU2位点 | 第34-35页 |
| 2.3.3 启动子活性随细胞生长周期的变化 | 第35页 |
| 2.3.4 通过博来霉素抗性实验分析启动子在不同环境下的特性 | 第35-37页 |
| 2.3.5 通过酶活力变化分析启动子在不同温度条件下的特性 | 第37-39页 |
| 2.3.6 不同碳源对启动子活性的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.7 氧气条件对启动子调控基因转录能力的影响 | 第40-42页 |
| 第3章 结果和讨论 | 第42-56页 |
| 3.1 构建同源重组型酵母表达载体 | 第42-45页 |
| 3.2 将表达框定点整合在K marxianus YHJ010染色体的LEU2位点 | 第45-48页 |
| 3.3 酶活分析在细胞生长过程中启动子活性的变化 | 第48-49页 |
| 3.4 博来霉素抗性实验分析启动子在不同环境下的特性 | 第49-51页 |
| 3.4.1 选择合适浓度的博来霉素YPD固体培养基 | 第49-50页 |
| 3.4.2 温度对启动子活性的影响 | 第50-51页 |
| 3.5 通过GUSA和K1LACZ表达活性变化分析温度对启动子活性的影响 | 第51-53页 |
| 3.5.1 酶活分析 | 第51-52页 |
| 3.5.2 基因转录水平分析 | 第52-53页 |
| 3.6 不同碳源对启动子活性的影响 | 第53-55页 |
| 3.6.1 酶活分析 | 第53-54页 |
| 3.6.2 基因转录水平分析 | 第54-55页 |
| 3.7 氧气条件对启动子活性的影响 | 第55-56页 |
| 小结 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 附录 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第78页 |
