水稻异三聚体G蛋白β亚基(RGB1)功能研究
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 中英文对照词 | 第7-8页 |
| I 文献综述 | 第8-23页 |
| 1. 引言 | 第8-9页 |
| 2. 动物G蛋白介导的信号转导途径 | 第9-11页 |
| 2.1 动物G蛋白的亚基 | 第9页 |
| 2.2 动物G蛋白信号转导途径各组分 | 第9-10页 |
| 2.3 动物G蛋白信号转到调节蛋白(RGS) | 第10-11页 |
| 3. 植物G蛋白介导的信号转导途径 | 第11-16页 |
| 3.1 植物G蛋白的亚基 | 第12-13页 |
| 3.2 植物G蛋白信号转导途径各组分 | 第13-15页 |
| 3.3 植物G蛋白信号转到调节蛋白 | 第15-16页 |
| 3.3.1 AtRGS1蛋白的结构 | 第15页 |
| 3.3.2 AtRGS1蛋白参与感受ABA信号 | 第15-16页 |
| 3.3.3 AtRGS1蛋白参与感知糖信号 | 第16页 |
| 4. 植物G蛋白的生理功能研究 | 第16-21页 |
| 4.1 G蛋白在植物种子萌发中的作用 | 第16-17页 |
| 4.2 G蛋白在植物幼苗生长发育中的作用 | 第17-18页 |
| 4.3 G蛋白在植物根的发育中的作用 | 第18-19页 |
| 4.4 G蛋白在植物器官形成中的作用 | 第19-21页 |
| 4.5 G蛋白在环境胁迫响应中的作用 | 第21页 |
| 5. 水稻G蛋白β亚基(RGB1)研究进展 | 第21-22页 |
| 6. 本实验的研究目的及研究内容 | 第22-23页 |
| Ⅱ 材料与方法 | 第23-32页 |
| 1. 水稻RGB1干扰表达的转基因植纯系合体鉴定 | 第23-25页 |
| 1.1 实验材料 | 第23页 |
| 1.2 PCR检测 | 第23-24页 |
| 1.2.1 DNA提取及PCR检测 | 第23-24页 |
| 1.3 GUS组织化学活性检测 | 第24-25页 |
| 1.3.1 材料生长 | 第24页 |
| 1.3.2 GUS染色液配制 | 第24-25页 |
| 1.3.3 GUS组织化学染色 | 第25页 |
| 2. 基因表达分析 | 第25-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.2.1 材料生长及植物组织总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.2 反转录方法 | 第27页 |
| 2.2.3 定量PCR体系及程序 | 第27-28页 |
| 2.2.3.1 定量PCR体系 | 第27页 |
| 2.2.3.2 定量PCR程序 | 第27-28页 |
| 3. 蛋白表达鉴定 | 第28-30页 |
| 3.1 材料生长及蛋白提取 | 第28页 |
| 3.2 蛋白浓度测定 | 第28-29页 |
| 3.3 Western Blot分析 | 第29-30页 |
| 3.3.1 SDS-PAGE电泳 | 第29页 |
| 3.3.2 转膜 | 第29页 |
| 3.3.3 免疫印迹 | 第29-30页 |
| 3.3.4 化学发光反应 | 第30页 |
| 4. RGBl的定位 | 第30-32页 |
| 4.1 实验材料 | 第30页 |
| 4.2 实验方法 | 第30-32页 |
| 4.2.1 载体构建 | 第30页 |
| 4.2.2 水稻原生质体瞬时表达方法 | 第30-32页 |
| Ⅲ 实验结果 | 第32-44页 |
| 1. 水稻RGBl干扰表达的转基因植株纯合体鉴定 | 第32-33页 |
| 1.1 潮霉素片段PCR | 第32-33页 |
| 1.2 GUS组织化学活性检测 | 第33页 |
| 2. 转基因水稻RGB1表达分析 | 第33-34页 |
| 3. RGB1蛋白鉴定 | 第34页 |
| 4. RGB1的定位 | 第34-35页 |
| 5. 植株表型分析 | 第35-38页 |
| 5.1 RGB1幼苗表型分析 | 第35-36页 |
| 5.2 剑叶叶型分析 | 第36页 |
| 5.3 穗型及分蘖数分析 | 第36-37页 |
| 5.4 种子表型分析 | 第37-38页 |
| 6. ABA及干旱胁迫处理 | 第38-44页 |
| 6.1 ABA及干旱胁迫处理后RGB1的表达 | 第38-40页 |
| 6.2 干旱胁迫处理前后水稻表型的观察 | 第40-41页 |
| 6.3 离体叶片失水率、气孔导度及蒸腾速率的分析 | 第41页 |
| 6.4 旱胁迫后各基因型水稻内源ABA含量 | 第41-42页 |
| 6.5 ABA相关基因的表达 | 第42-44页 |
| Ⅳ 分析与讨论 | 第44-47页 |
| 1. 纯合体的鉴定 | 第44页 |
| 2. 纯合体表型分析 | 第44-45页 |
| 3. RGB1的细胞定位 | 第45页 |
| 4. ABA及干旱胁迫处理 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |