| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-16页 |
| 1.1 枯萎病的发病规律 | 第11页 |
| 1.2 枯萎病的致病机理 | 第11-12页 |
| 1.3 植物的抗病机制 | 第12-13页 |
| 1.4 植物抗病相关WRKY转录因子 | 第13-15页 |
| 1.5 选题的目的意义 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第16页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第16页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第16页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第16页 |
| 2.1.5 引物合成及DNA测序 | 第16页 |
| 2.1.6 培养基和缓冲液 | 第16-17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-28页 |
| 2.2.1 陆地棉GhWRKY75基因的电子克隆和引物设计 | 第17页 |
| 2.2.2 病原菌的活化与菌液制备 | 第17页 |
| 2.2.3 植物材料的种植与处理 | 第17-18页 |
| 2.2.4 棉花DNA的提取 | 第18页 |
| 2.2.5 棉花RNA的提取 | 第18-19页 |
| 2.2.6 cDNA第一链的合成 | 第19页 |
| 2.2.7 目的基因的PCR扩增 | 第19-20页 |
| 2.2.8 回收目的片段与载体连接 | 第20页 |
| 2.2.9 克隆载体连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第20-21页 |
| 2.2.10 提取质粒、双酶切验证及测序分析 | 第21-22页 |
| 2.2.11 预测基因启动子功能 | 第22页 |
| 2.2.12 棉花GhWRKY75基因的生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.2.13 实时荧光定量PCR引物的设计 | 第22页 |
| 2.2.14 实时荧光定量PCR | 第22-23页 |
| 2.2.15 GhWRKY75基因过表达载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.16 制备农杆菌GV3101感受态 | 第25页 |
| 2.2.17 GhWRKY75重组质粒电击转化农杆菌感受态 | 第25页 |
| 2.2.18 利用农杆菌介导法遗传转化拟南芥 | 第25-26页 |
| 2.2.19 转基因阳性植株的鉴定 | 第26-28页 |
| 第三章 结果与分析 | 第28-40页 |
| 3.1 棉花GhWRKY75基因的克隆及序列分析 | 第28-29页 |
| 3.2 棉花GhWRKY75启动子顺式作用元件的预测 | 第29-30页 |
| 3.3 棉花GhWRKY75基因的生物信息学分析 | 第30-34页 |
| 3.3.1 棉花GhWRKY75基因同源进化树分析和多重序列比对 | 第30-32页 |
| 3.3.2 GhWRKY75基因编码蛋白分析和蛋白结构预测 | 第32-34页 |
| 3.4 棉花GhWRKY75基因在枯萎病菌和激素诱导下的表达模式分析 | 第34-37页 |
| 3.4.1 棉花GhWRKY75基因在病原菌诱导下的表达分析 | 第34-35页 |
| 3.4.2 棉花GhWRKY75基因在激素诱导下的表达分析 | 第35-37页 |
| 3.5 GhWRKY75基因的过表达载体构建 | 第37-38页 |
| 3.6 拟南芥的遗传转化及阳性植株筛选 | 第38-40页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第40-43页 |
| 4.1 棉花GhWRKY75基因的克隆及序列分析 | 第40页 |
| 4.2 棉花GhWRKY75基因的生物信息学分析 | 第40-41页 |
| 4.3 棉花GhWRKY75基因在抗病与感病品种中的表达分析 | 第41-42页 |
| 4.4 GhWRKY75基因的表达载体构建和拟南芥的转化 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 附录 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49-51页 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第51页 |
