摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词 | 第8-11页 |
1 引言 | 第11-15页 |
1.1 癌症的现状 | 第11页 |
1.2 溶瘤病毒的研究进展 | 第11-13页 |
1.3 凝集素的研究现状 | 第13-14页 |
1.4 论文研究基础 | 第14页 |
1.5 本课题的研究目的和意义 | 第14-15页 |
2 实验材料和方法 | 第15-33页 |
2.1 实验材料 | 第15-18页 |
2.1.1 实验所用质粒、菌株及细胞株 | 第15页 |
2.1.2 主要生化试剂 | 第15-16页 |
2.1.3 主要配置试剂 | 第16页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第16页 |
2.1.5 引物和抗体 | 第16-18页 |
2.2 分子实验 | 第18-20页 |
2.2.1 分子实验常用实验方法 | 第18-19页 |
2.2.2 构建p CB-Flag-Hdd SBL质粒 | 第19-20页 |
2.3 细胞实验 | 第20-22页 |
2.4 病毒实验 | 第22-33页 |
2.4.0 溶瘤痘苗病毒的包装 | 第22页 |
2.4.1 溶瘤痘苗病毒的药物筛选及挑空斑获得目的病毒 | 第22-24页 |
2.4.2 溶瘤痘苗病毒的鉴定 | 第24-25页 |
2.4.3 溶瘤痘苗病毒大量扩增及蔗糖梯度离心纯化病毒 | 第25页 |
2.4.4 溶瘤痘苗病毒滴度测定 | 第25-26页 |
2.4.5 C6细胞裸鼠皮下移植模型 | 第26页 |
2.4.6 ELISA检测小鼠血清中大鼠的IL-2 水平 | 第26-27页 |
2.4.7 半定量PCR检测C6细胞水平相关炎症因子的m RNA表达量 | 第27-29页 |
2.4.8 双荧光素酶报告基因检测 | 第29-30页 |
2.4.9 转录组测序和分析 | 第30-31页 |
2.4.10 Western blot实验检测细胞内相关蛋白的表达水平 | 第31-32页 |
2.4.11 半定量PCR验证转录组分析的相关基因 | 第32页 |
2.4.12 测onco VV和onco VV-Hdd SBL在C6细胞中的病毒复制 | 第32-33页 |
2.5 统计学分析 | 第33页 |
3 实验结果 | 第33-52页 |
3.1 溶瘤痘苗病毒包装过程的鉴定结果 | 第33-34页 |
3.1.1 目的基因Flag-Hdd SBL的获得 | 第33-34页 |
3.1.2 重组质粒p CB-Flag-Hdd SBL的鉴定 | 第34页 |
3.2 溶瘤痘苗病毒的鉴定 | 第34-36页 |
3.2.1 onco VV-Hdd SBL溶瘤痘苗病毒目的基因的鉴定 | 第34-35页 |
3.2.2 onco VV-Hdd SBL溶瘤痘苗病毒野毒的鉴定 | 第35-36页 |
3.3 C6细胞裸鼠皮下移植模型 | 第36-37页 |
3.4 半定量PCR检测C6细胞水平相关炎症因子的m RNA表达量 | 第37-38页 |
3.5 双荧光素酶报告基因检测NF-k B和AP-1 炎症相关转录激活因子 | 第38-39页 |
3.6 ELISA检测小鼠血清中大鼠的IL-2 水平 | 第39-40页 |
3.7 转录组测序和分析 | 第40-49页 |
3.7.1 转录组差异表达基因 | 第40-42页 |
3.7.2 显著性差异表达基因维恩图 | 第42-43页 |
3.7.3 转录组数据GO分析 | 第43-49页 |
3.8 Western blot实验检测细胞内相关蛋白的表达水平 | 第49-50页 |
3.9 半定量PCR验证转录组分析的相关基因 | 第50-51页 |
3.10 onco VV和onco VV-Hdd SBL在C6细胞中的病毒复制情况 | 第51-52页 |
4 结论与讨论 | 第52-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
硕士学位期间的科研成果 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |