| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第8-11页 |
| 1 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 肝癌的研究现状 | 第11-12页 |
| 1.2 肿瘤的基因治疗 | 第12-13页 |
| 1.3 凝集素的研究现状 | 第13页 |
| 1.4 海洋凝集素的研究 | 第13-14页 |
| 1.5 中华鲎凝集素的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.6 课题研究基础 | 第15页 |
| 1.7 研究内容 | 第15-16页 |
| 1.8 研究意义与创新点 | 第16-17页 |
| 1.8.1 意义 | 第16页 |
| 1.8.2 创新点 | 第16-17页 |
| 2 实验材料与方法 | 第17-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-22页 |
| 2.1.1 实验主要质粒、菌株及细胞株 | 第17-18页 |
| 2.1.2 主要生化试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要实验溶液配制 | 第19-21页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-41页 |
| 2.2.1 分子实验 | 第22-27页 |
| 2.2.1.1 引物合成 | 第22页 |
| 2.2.1.2 分子实验常用实验方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1.3 pEGFP-TTL-C1载体的构建 | 第25-26页 |
| 2.2.1.4 pCB-Flag-TTL载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.2 细胞实验 | 第27-30页 |
| 2.2.2.1 细胞复苏 | 第27-28页 |
| 2.2.2.2 细胞传代 | 第28页 |
| 2.2.2.3 细胞冻存 | 第28-29页 |
| 2.2.2.4 细胞计数 | 第29页 |
| 2.2.2.5 细胞转染 | 第29-30页 |
| 2.2.3 病毒实验 | 第30-35页 |
| 2.2.3.1 溶瘤痘苗病毒的包装 | 第30-35页 |
| 2.2.4 验证溶瘤痘苗病毒对肝癌细胞的杀伤效果 | 第35-41页 |
| 2.2.4.1 细胞毒性实验检测oncoVV-TTL对几种肿瘤细胞的杀伤作用 | 第35页 |
| 2.2.4.2 TCID_(50)法检测oncoVV-TTL在肝癌细胞中的复制 | 第35-36页 |
| 2.2.4.3 Western bolt检测oncoVV-TTL杀伤肿瘤细胞的作用机制 | 第36-37页 |
| 2.2.4.4 双荧光素酶法检测oncoVV-TTL对报告基因转录活性的影响 | 第37-38页 |
| 2.2.4.5 结晶紫染色实验验证细胞的毒理效果 | 第38页 |
| 2.2.4.6 动物实验部分：体内实验检测病毒对肝癌细胞的杀伤效果 | 第38-40页 |
| 2.2.4.6.1 MHCC97-H细胞裸鼠移植模型的构建以及腹腔注射病毒 | 第38-39页 |
| 2.2.4.6.2 绘制肿瘤生长抑制曲线 | 第39页 |
| 2.2.4.6.3 HE染色 | 第39-40页 |
| 2.2.4.6.4 裸鼠活体成像实验 | 第40页 |
| 2.2.4.7 统计学分析 | 第40-41页 |
| 3 实验结果 | 第41-55页 |
| 3.1 溶瘤痘苗病毒oncoVV-TTL包装过程的鉴定结果 | 第41-44页 |
| 3.1.1 重组质粒pEGFP-Flag-TTL-C1的鉴定 | 第41-42页 |
| 3.1.2 重组质粒pCB-Flag-TTL的鉴定 | 第42-43页 |
| 3.1.3 溶瘤痘苗病毒oncoVV-TTL包装的鉴定 | 第43-44页 |
| 3.2 细胞毒性实验验证oncoVV-TTL对肿瘤细胞的杀伤作用 | 第44-46页 |
| 3.3 TTL基因增强溶瘤痘苗病毒在肝癌细胞中的复制能力 | 第46-48页 |
| 3.4 oncoVV-TTL对肝癌细胞中抗病毒因子的调控 | 第48-51页 |
| 3.5 MEK抑制剂降低oncoVV-TTL的复制能力 | 第51-52页 |
| 3.6 在小鼠体内验证oncoVV-TTL的作用效果 | 第52-55页 |
| 4.结论与讨论 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 硕士期间学术成果 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
