| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 缩略词 | 第22-23页 |
| 黄芩总黄酮提取物对TGF-β_1诱导肺癌A549细胞上皮间质转化的影响 | 第23-91页 |
| 第一章 绪论 | 第24-38页 |
| 1.1 非小细胞肺癌与上皮间质转化 | 第24-30页 |
| 1.1.1 肺癌流行病学 | 第24页 |
| 1.1.2 上皮间质转化定义及分类 | 第24-25页 |
| 1.1.3 上皮间质转化分子调控机制 | 第25-26页 |
| 1.1.4 肺癌中上皮间质转化现象 | 第26-27页 |
| 1.1.5 上皮间质转化与肺癌转移 | 第27-28页 |
| 1.1.6 上皮间质转化与肺癌耐药 | 第28-29页 |
| 1.1.6.1 上皮间质转化与化疗药物耐药 | 第28页 |
| 1.1.6.2 上皮间质转化与分子靶向药物耐药 | 第28-29页 |
| 1.1.7 上皮间质转化与肺癌干细胞 | 第29-30页 |
| 1.2 上皮间质转化中潜在抗肿瘤作用靶点 | 第30-32页 |
| 1.3 天然化合物与肿瘤上皮间质转化 | 第32-34页 |
| 1.4 黄芩与肺癌 | 第34-35页 |
| 1.5 本课题研究的内容、目的意义及技术路线 | 第35-38页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第35-36页 |
| 1.5.2 研究的目的意义 | 第36-37页 |
| 1.5.3 技术路线 | 第37-38页 |
| 第二章 材料与方法 | 第38-60页 |
| 2.1 材料 | 第38-41页 |
| 2.1.1 供试样品 | 第38页 |
| 2.1.2 化学药品和试剂 | 第38-39页 |
| 2.1.3 主要仪器与耗材 | 第39-40页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第40-41页 |
| 2.2 黄芩总黄酮提取物样品制备 | 第41-44页 |
| 2.2.1 黄芩总黄酮提取物提取方案 | 第41-42页 |
| 2.2.2 黄芩总黄酮提取物提取技术路线图 | 第42页 |
| 2.2.3 黄芩总黄酮提取物鉴定 | 第42-43页 |
| 2.2.3.1 金属盐类试剂的络合反应 | 第42-43页 |
| 2.2.3.2 碱性试剂显色反应 | 第43页 |
| 2.2.4 黄芩总黄酮提取物工作液配制 | 第43-44页 |
| 2.2.4.1 配药过程 | 第43-44页 |
| 2.3 黄芩总黄酮提取物对TGF-β_1诱导A549发生EMT的影响 | 第44-58页 |
| 2.3.1 A549细胞培养 | 第44-45页 |
| 2.3.1.1 细胞株的冻存 | 第44页 |
| 2.3.1.2 冻存细胞株的复苏 | 第44-45页 |
| 2.3.1.3 细胞株的传代 | 第45页 |
| 2.3.2 摸索TGF-β_1诱导A549细胞发生EMT的时间 | 第45-46页 |
| 2.3.3 MTT法 | 第46-48页 |
| 2.3.3.1 MTT实验原理 | 第46页 |
| 2.3.3.2 MTT法检测不同浓度黄芩总黄酮提取物对肺癌A549细胞作用72h的细胞增殖抑制率 | 第46页 |
| 2.3.3.3 MTT法检测不同浓度黄芩总黄酮提取物对TGF-β_1诱导肺癌A549细胞作用48h的细胞增殖抑制率 | 第46-47页 |
| 2.3.3.4 MTT法检测不同浓度顺铂对肺癌A549细胞作用48h的细胞增殖抑制率 | 第47页 |
| 2.3.3.5 MTT法检测不同浓度顺铂对TGF-β_1诱导肺癌A549细胞作用48h的细胞增殖抑制率 | 第47-48页 |
| 2.3.3.6 MTT法检测50ug/ml黄芩总黄酮提取物联合不同浓度顺铂对TGF-β_1诱导肺癌A549细胞作用48h的细胞增殖抑制率 | 第48页 |
| 2.3.4 划痕实验 | 第48-49页 |
| 2.3.4.1 实验原理 | 第48页 |
| 2.3.4.2 细胞划痕实验研究不同浓度黄芩总黄酮提取物对肺癌A549细胞作用48h的细胞迁移抑制率 | 第48-49页 |
| 2.3.4.3 细胞划痕实验研究不同浓度黄芩总黄酮提取物对TGF-β_1诱导肺癌A549细胞作用48h的细胞迁移抑制率 | 第49页 |
| 2.3.5 Transwell小室实验 | 第49-52页 |
| 2.3.5.1 Transwell小室侵袭实验原理 | 第49-50页 |
| 2.3.5.2 预实验方案及优化条件 | 第50-51页 |
| 2.3.5.3 黄芩总黄酮提取物对肺癌A549细胞作用48h不同浓度的细胞侵袭抑制率 | 第51页 |
| 2.3.5.4 黄芩总黄酮提取物对TGF-β_1诱导A549细胞发生EMT作用48h不同浓度的细胞侵袭抑制率 | 第51-52页 |
| 2.3.6 RT-PCR | 第52-58页 |
| 2.3.6.1 实验原理 | 第52页 |
| 2.3.6.2 采用Primer Premier 5.0结合oligo6.0软件设计引物 | 第52-53页 |
| 2.3.6.3 细胞不同处理 | 第53-54页 |
| 2.3.6.4 细胞总RNA提取 | 第54页 |
| 2.3.6.5 细胞总RNA质量评价 | 第54页 |
| 2.3.6.6 配制1.3%RNA电泳琼脂糖凝胶 | 第54-55页 |
| 2.3.6.7 RNA电泳 | 第55页 |
| 2.3.6.8 1st strandcDNA合成反应 | 第55-56页 |
| 2.3.6.9 目标片段PCR扩增Tm摸索 | 第56-57页 |
| 2.3.6.10 目标片段PCR扩增 | 第57-58页 |
| 2.3.6.11 配制1.3% DNA电泳琼脂糖凝胶 | 第58页 |
| 2.3.6.12 DNA电泳 | 第58页 |
| 2.4 数据统计分析 | 第58-60页 |
| 2.4.1 IC_(50)值 | 第58-59页 |
| 2.4.1.1 IC_(50)计算方法 | 第58-59页 |
| 2.4.2 细胞增殖抑制率 | 第59页 |
| 2.4.3 细胞迁移抑制率 | 第59页 |
| 2.4.4 细胞侵袭抑制率 | 第59-60页 |
| 第三章 结果 | 第60-75页 |
| 3.1 黄芩总黄酮提取物提取及鉴别结果 | 第60页 |
| 3.2 TGF-β_1诱导A549细胞发生EMT的时间结果 | 第60-61页 |
| 3.3 MTT实验结果 | 第61-66页 |
| 3.3.1 不同浓度黄芩总黄酮提取物对TGF-β_1诱导组、未诱导组A549细胞作用72h的细胞增殖抑制率结果 | 第61-63页 |
| 3.3.2 不同浓度顺铂对TGF-β_1未诱导组、TGF-β_1诱导组以及TGF-β_1诱导组联合50ug/ml黄芩总黄酮提取物肺癌A549细胞作用48h的细胞增殖抑制率结果 | 第63-66页 |
| 3.4 细胞划痕实验结果 | 第66-68页 |
| 3.4.1 不同浓度黄芩总黄酮提取物对TGF-β_1诱导组、未诱导组A549细胞作用48h的细胞迁移抑制率结果 | 第66-68页 |
| 3.5 Transwell小室实验结果 | 第68-70页 |
| 3.5.1 不同浓度黄芩总黄酮提取物对TGF-β_1诱导组、未诱导组A549细胞作用48h的细胞侵袭抑制率结果 | 第68-70页 |
| 3.6 RT-PCR实验结果 | 第70-75页 |
| 3.6.1 总RNA电泳检测结果 | 第70页 |
| 3.6.2 总RNA浓度检测结果 | 第70-71页 |
| 3.6.3 不同浓度黄芩总黄酮提取物对TGF-β_1诱导组、未诱导组A549细胞作用48h的上皮细胞标记蛋白E-cadherin、间质细胞标记蛋白Vimentin的mRNA表达结果 | 第71-75页 |
| 第四章 讨论与总结 | 第75-77页 |
| 4.1 讨论 | 第75-76页 |
| 4.2 总结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-91页 |
| Meta分析Vimentin表达对NSCLC患者预后的影响 | 第91-114页 |
| 第一章 绪论 | 第92-93页 |
| 1.1 Meta分析背景与目的 | 第92-93页 |
| 第二章 材料与方法 | 第93-101页 |
| 2.1 文献检索 | 第93-98页 |
| 2.1.1 CNKI检索策略 | 第93页 |
| 2.1.2 Wang Fang检索策略 | 第93页 |
| 2.1.3 VIP检索策略 | 第93-94页 |
| 2.1.4 CMB检索策略 | 第94页 |
| 2.1.5 EMBASE和MEDLINE检索策略 | 第94-95页 |
| 2.1.6 PUBMED检索策略 | 第95-97页 |
| 2.1.7 Elsevier SD外文期刊数据库检索策略 | 第97页 |
| 2.1.8 SCI科学引文索引数据库检索策略 | 第97页 |
| 2.1.9 The Cochrane library检索策略 | 第97页 |
| 2.1.10 The clinical trail检索策略 | 第97-98页 |
| 2.2 文献纳入排除标准 | 第98页 |
| 2.2.1 纳入标准 | 第98页 |
| 2.2.2 排除标准 | 第98页 |
| 2.3 资料提取与文献质量评价 | 第98-100页 |
| 2.4 统计学方法 | 第100-101页 |
| 第三章 结果 | 第101-109页 |
| 3.1 文献纳入 | 第101页 |
| 3.2 纳入文献基本特征 | 第101-103页 |
| 3.3 文献质量评价 | 第103页 |
| 3.4 Vimentin表达对NSCLC患者预后影响的meta分析结果 | 第103-106页 |
| 3.4.1 对NSCLC患者OS的影响 | 第103-105页 |
| 3.4.2 对NSCLC患者DFS的影响 | 第105-106页 |
| 3.5 发表偏倚 | 第106-108页 |
| 3.6 敏感性分析 | 第108-109页 |
| 第四章 讨论与总结 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第115-116页 |
| 附录B 其他需要说明的内容 | 第116页 |
