| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第9-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-24页 |
| 1.1 SMV的简介 | 第13-15页 |
| 1.2 植物的抗病基因 | 第15-17页 |
| 1.3 大豆抗性基因座的定位 | 第17-19页 |
| 1.3.1 Rsv1基因座的介绍 | 第17页 |
| 1.3.2 Rsv3最可能是NBS-LRR类型抗性基因 | 第17-18页 |
| 1.3.3 Rsv4可能属于新型抗性基因 | 第18页 |
| 1.3.4 其他抗性基因 | 第18-19页 |
| 1.4 基因产物特异性识别不同SMV株系无毒因子 | 第19-23页 |
| 1.4.1 Rsv1的无毒因子 | 第19-20页 |
| 1.4.2 Rsv4的无毒因子 | 第20-21页 |
| 1.4.3 大豆抗SMV的策略 | 第21页 |
| 1.4.4 参与抵抗SMV的宿主因子 | 第21-23页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.1 实验材料及来源 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-38页 |
| 2.2.1 GmNH23和SMV分段基因过表达载体的构建 | 第24-27页 |
| 2.2.2 侵染实验 | 第27-28页 |
| 2.2.3 植物总RNA提取 | 第28页 |
| 2.2.4 cDNA的合成 | 第28-29页 |
| 2.2.5 利用qPCR检测TMV的滴度 | 第29-30页 |
| 2.2.6 Northernblot杂交法检测TMV | 第30-33页 |
| 2.2.6.1 探针的制备 | 第30-31页 |
| 2.2.6.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| 2.2.6.3 转膜 | 第31-32页 |
| 2.2.6.4 杂交 | 第32-33页 |
| 2.2.7 植物蛋白提取 | 第33页 |
| 2.2.8 WesternBlot实验 | 第33-35页 |
| 2.2.9 Gateway重组实验 | 第35-36页 |
| 2.2.10 改造入门载体pQBV | 第36页 |
| 2.2.11 基因枪介导的转化法 | 第36-38页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第38-56页 |
| 3.1 GmNH23分段基因的克隆 | 第38-39页 |
| 3.2 GmNH23截段基因过表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 3.3 tn对TMV具有抗性 | 第40-41页 |
| 3.4 tn基因对SMV具有抗性 | 第41-42页 |
| 3.5 WesternBlot验证tn和TMV的表达 | 第42-44页 |
| 3.6 利用RT-qPCR和NorthernBlot检测TMV的表达 | 第44-45页 |
| 3.7 SMV编码的10个基因的过表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 3.8 利用超敏反应初步筛选与tn基因互作的SMV的效应蛋白 | 第47-48页 |
| 3.9 构建BIFC系统的载体 | 第48-49页 |
| 3.10 基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第49-50页 |
| 3.11 HA标签的位置对tn抗性的影响 | 第50-51页 |
| 3.12 不同细胞器定位对tn抗性的影响 | 第51-56页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第56-60页 |
| 4.1 讨论 | 第56-58页 |
| 4.1.1 TN结构域在GmNH23的抗性反应中具有重要作用 | 第56-57页 |
| 4.1.2 NIa-Vpg和NIa-Pro是与TN互作的SMV效应蛋白 | 第57页 |
| 4.1.3 tn的核定位对GmNH23抗性是必需的 | 第57-58页 |
| 4.2 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 附录 | 第65-73页 |
| 附录Ⅰ常用培养基及试剂的配制 | 第65-69页 |
| 附录Ⅱ 本论文所用引物 | 第69-71页 |
| 附录Ⅲ 克隆的基因信息表 | 第71-72页 |
| 附录Ⅳ 载体图谱 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读硕士期间取得的成果 | 第74页 |
