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拟南芥AT-hook基因TEK调控阿拉伯半乳糖蛋白AGPs控制花粉外壁内层发育

中文摘要第4-5页
Abstract第5页
1 前言第9-35页
    1.1 花粉壁的结构和发育及重要意义第9-15页
        1.1.1 花粉壁的结构第9-10页
        1.1.2 花粉壁的成分第10-11页
        1.1.3 花粉壁的发育过程第11-12页
        1.1.4 花粉壁发育相关基因第12-14页
            1.1.4.1 初生外壁发育相关基因第12-13页
            1.1.4.2 花粉外壁发育相关基因第13-14页
        1.1.5 小结和展望第14-15页
    1.2 AT-hook 蛋白及其功能研究第15-25页
        1.2.1 AT-hook 蛋白基序的发现及特征第15-17页
        1.2.2 AT-hook 蛋白基序的类型第17-18页
        1.2.3 AT-hook 蛋白基序与 DNA 的结合能力第18页
        1.2.4 AT-hook 蛋白与 DNA 的特异结合第18-19页
        1.2.5 AT-hook 蛋白质在动植物中的应用第19-20页
        1.2.6 拟南芥 AHL 家族第20-23页
        1.2.7 拟南芥 TEK 基因特异调控花粉外壁内层发育第23-25页
        1.2.8 小结和展望第25页
    1.3 阿拉伯半乳糖蛋白及其功能第25-35页
        1.3.1 AGPs 的结构第25-28页
        1.3.2 AGPs 及其 GPI 锚定结构第28-29页
        1.3.3 AGPs 在植物器官和组织中的表达第29页
        1.3.4 AGPs 在植物细胞中的表达第29-30页
        1.3.5 AGPs 在植物生长发育中的功能第30-31页
        1.3.6 拟南芥相关 AGPs 突变体研究第31-33页
        1.3.7 小结与展望第33-35页
2 材料与方法第35-56页
    2.1 材料第35-38页
        2.1.1 植物材料第35页
        2.1.2 菌株和质粒第35页
            2.1.2.1 菌株第35页
            2.1.2.2 质粒载体第35页
        2.1.3 抗生素第35-36页
        2.1.4 试剂第36页
        2.1.5 培养基配方第36-37页
        2.1.6 仪器第37-38页
    2.2 实验方法第38-56页
        2.2.1 拟南芥的种植第38页
        2.2.2 tek 突变体的鉴定第38页
        2.2.3 半薄切片观察拟南芥花药发育第38-40页
            2.2.3.1 试剂第38-39页
            2.2.3.2 半薄切片实验步骤第39-40页
        2.2.4 透射电镜观察第40-41页
        2.2.5 扫描电镜观察第41页
        2.2.6 亚历山大染色第41-42页
        2.2.7 大肠杆菌 TOP10 感受态细胞的制备第42-43页
        2.2.8 大肠杆菌的转化第43页
        2.2.9 农杆菌感受态细胞的制备第43页
        2.2.10 农杆菌的转化第43-44页
        2.2.11 拟南芥的转化第44页
        2.2.12 质粒的小量抽提第44-45页
        2.2.13 拟南芥基因组 DNA 的抽提第45页
        2.2.14 拟南芥 RNA 的抽提和反转录第45-46页
        2.2.15 RNA 反转录合成 cDNA 第一链第46页
        2.2.16 定量 RT-PCR第46-47页
        2.2.17 芯片分析第47页
        2.2.18 原位杂交第47-51页
        2.2.19 染色质免疫共沉淀(ChIP)第51-53页
        2.2.20 原核表达第53-54页
            2.2.20.1 制备原核表达感受态细胞第53页
            2.2.20.2 TEK-His 融合蛋白的表达和纯化第53-54页
        2.2.21 凝胶电泳迁移率实验(EMSA)第54页
        2.2.22 实验引物及用途第54-56页
3 实验结果第56-73页
    3.1 TEK在拟南芥 Col 生态型中是一个转录激活型的调控因子第56-58页
    3.2 TEK 通过 AT-hook 基序体外结合 MAR 序列第58-60页
    3.3 芯片分析揭示 TEK 调控的细胞壁相关基因第60-62页
    3.4 染色质免疫共沉淀实验说明 TEK 直接调控 AGP 基因的表达第62-66页
    3.5 AGP6 的 EMS 诱变突变体表现为育性降低和外壁内层发育缺陷第66-69页
    3.6 AGP6 在小孢子母细胞,绒毡层和花粉粒中表达第69-70页
    3.7 在 tek 突变体中表达 AGP6 能够部分恢复花粉外壁内层的发育第70-71页
    3.8 TEK 与 AHL1 的蛋白相互作用第71-73页
4 讨论第73-78页
    4.1 AGP 蛋白可能是花粉外壁内层的主要组成成分第73-75页
    4.2 花粉外壁内层保护小孢子避免破裂第75-76页
    4.3 TEK 直接调控 AGPs 的表达控制花粉外壁内层的发育第76-78页
参考文献第78-90页
发表文章目录第90-91页
致谢第91页

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