中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 前言 | 第9-35页 |
1.1 花粉壁的结构和发育及重要意义 | 第9-15页 |
1.1.1 花粉壁的结构 | 第9-10页 |
1.1.2 花粉壁的成分 | 第10-11页 |
1.1.3 花粉壁的发育过程 | 第11-12页 |
1.1.4 花粉壁发育相关基因 | 第12-14页 |
1.1.4.1 初生外壁发育相关基因 | 第12-13页 |
1.1.4.2 花粉外壁发育相关基因 | 第13-14页 |
1.1.5 小结和展望 | 第14-15页 |
1.2 AT-hook 蛋白及其功能研究 | 第15-25页 |
1.2.1 AT-hook 蛋白基序的发现及特征 | 第15-17页 |
1.2.2 AT-hook 蛋白基序的类型 | 第17-18页 |
1.2.3 AT-hook 蛋白基序与 DNA 的结合能力 | 第18页 |
1.2.4 AT-hook 蛋白与 DNA 的特异结合 | 第18-19页 |
1.2.5 AT-hook 蛋白质在动植物中的应用 | 第19-20页 |
1.2.6 拟南芥 AHL 家族 | 第20-23页 |
1.2.7 拟南芥 TEK 基因特异调控花粉外壁内层发育 | 第23-25页 |
1.2.8 小结和展望 | 第25页 |
1.3 阿拉伯半乳糖蛋白及其功能 | 第25-35页 |
1.3.1 AGPs 的结构 | 第25-28页 |
1.3.2 AGPs 及其 GPI 锚定结构 | 第28-29页 |
1.3.3 AGPs 在植物器官和组织中的表达 | 第29页 |
1.3.4 AGPs 在植物细胞中的表达 | 第29-30页 |
1.3.5 AGPs 在植物生长发育中的功能 | 第30-31页 |
1.3.6 拟南芥相关 AGPs 突变体研究 | 第31-33页 |
1.3.7 小结与展望 | 第33-35页 |
2 材料与方法 | 第35-56页 |
2.1 材料 | 第35-38页 |
2.1.1 植物材料 | 第35页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第35页 |
2.1.2.1 菌株 | 第35页 |
2.1.2.2 质粒载体 | 第35页 |
2.1.3 抗生素 | 第35-36页 |
2.1.4 试剂 | 第36页 |
2.1.5 培养基配方 | 第36-37页 |
2.1.6 仪器 | 第37-38页 |
2.2 实验方法 | 第38-56页 |
2.2.1 拟南芥的种植 | 第38页 |
2.2.2 tek 突变体的鉴定 | 第38页 |
2.2.3 半薄切片观察拟南芥花药发育 | 第38-40页 |
2.2.3.1 试剂 | 第38-39页 |
2.2.3.2 半薄切片实验步骤 | 第39-40页 |
2.2.4 透射电镜观察 | 第40-41页 |
2.2.5 扫描电镜观察 | 第41页 |
2.2.6 亚历山大染色 | 第41-42页 |
2.2.7 大肠杆菌 TOP10 感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
2.2.8 大肠杆菌的转化 | 第43页 |
2.2.9 农杆菌感受态细胞的制备 | 第43页 |
2.2.10 农杆菌的转化 | 第43-44页 |
2.2.11 拟南芥的转化 | 第44页 |
2.2.12 质粒的小量抽提 | 第44-45页 |
2.2.13 拟南芥基因组 DNA 的抽提 | 第45页 |
2.2.14 拟南芥 RNA 的抽提和反转录 | 第45-46页 |
2.2.15 RNA 反转录合成 cDNA 第一链 | 第46页 |
2.2.16 定量 RT-PCR | 第46-47页 |
2.2.17 芯片分析 | 第47页 |
2.2.18 原位杂交 | 第47-51页 |
2.2.19 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第51-53页 |
2.2.20 原核表达 | 第53-54页 |
2.2.20.1 制备原核表达感受态细胞 | 第53页 |
2.2.20.2 TEK-His 融合蛋白的表达和纯化 | 第53-54页 |
2.2.21 凝胶电泳迁移率实验(EMSA) | 第54页 |
2.2.22 实验引物及用途 | 第54-56页 |
3 实验结果 | 第56-73页 |
3.1 TEK在拟南芥 Col 生态型中是一个转录激活型的调控因子 | 第56-58页 |
3.2 TEK 通过 AT-hook 基序体外结合 MAR 序列 | 第58-60页 |
3.3 芯片分析揭示 TEK 调控的细胞壁相关基因 | 第60-62页 |
3.4 染色质免疫共沉淀实验说明 TEK 直接调控 AGP 基因的表达 | 第62-66页 |
3.5 AGP6 的 EMS 诱变突变体表现为育性降低和外壁内层发育缺陷 | 第66-69页 |
3.6 AGP6 在小孢子母细胞,绒毡层和花粉粒中表达 | 第69-70页 |
3.7 在 tek 突变体中表达 AGP6 能够部分恢复花粉外壁内层的发育 | 第70-71页 |
3.8 TEK 与 AHL1 的蛋白相互作用 | 第71-73页 |
4 讨论 | 第73-78页 |
4.1 AGP 蛋白可能是花粉外壁内层的主要组成成分 | 第73-75页 |
4.2 花粉外壁内层保护小孢子避免破裂 | 第75-76页 |
4.3 TEK 直接调控 AGPs 的表达控制花粉外壁内层的发育 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-90页 |
发表文章目录 | 第90-91页 |
致谢 | 第91页 |