| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1. 引言 | 第11-25页 |
| 1.1 玉米雄性不育研究和应用现状 | 第11-16页 |
| 1.1.1 玉米生产中雄性不育的利用 | 第11-12页 |
| 1.1.2 玉米核雄性不育种质资源的丰富性 | 第12页 |
| 1.1.3 玉米隐性核不育基因的定位与克隆 | 第12-13页 |
| 1.1.4 玉米雄性不育的细胞学 | 第13-16页 |
| 1.1.5 药壁组织与雄性不育的关系 | 第16页 |
| 1.2 玉米隐性核不育基因利用途径 | 第16-18页 |
| 1.2.1 黄白粒系统 | 第16页 |
| 1.2.2 双杂合体系统 | 第16-17页 |
| 1.2.3 多花丝标记系统 | 第17页 |
| 1.2.4 黄绿苗标记系统 | 第17-18页 |
| 1.2.5 光温敏不育系统 | 第18页 |
| 1.3 玉米隐性核不育系有效保持、繁殖和育种应用的生物技术途径探索 | 第18-20页 |
| 1.3.1 利用转基因技术解决玉米隐性核不育系的有效保持问题 | 第18-19页 |
| 1.3.2 利用荧光蛋白技术解决转基因技术的标记性状问题 | 第19页 |
| 1.3.3 利用花粉失活策略解决转基因技术的基因漂移问题 | 第19页 |
| 1.3.4 新一代杂交种生产技术—SPT | 第19-20页 |
| 1.4 基因定位 | 第20-22页 |
| 1.4.1 两点测验 | 第20-21页 |
| 1.4.2 三点测验 | 第21页 |
| 1.4.3 染色体步移 | 第21-22页 |
| 1.4.4 图位克隆 | 第22页 |
| 1.5 遗传转化载体的构建 | 第22-24页 |
| 1.5.1 传统的载体构建方法 | 第22-23页 |
| 1.5.2 Gateway技术 | 第23页 |
| 1.5.3 含三段T-DNA载体 | 第23-24页 |
| 1.5.4 一种通用高效的复杂载体构建新方法 | 第24页 |
| 1.6 切片的方法 | 第24页 |
| 1.7 研究目的意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 玉米材料 | 第25页 |
| 2.1.2 细菌材料 | 第25页 |
| 2.1.3 酶及生化试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第25页 |
| 2.1.5 测序 | 第25页 |
| 2.1.6 实验仪器 | 第25页 |
| 2.1.7 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-36页 |
| 2.2.1 构建BC_1F_1分离群体 | 第26页 |
| 2.2.2 玉米叶片总DNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.3 BC_1F_1分离群体基因型鉴定 | 第27-30页 |
| 2.2.4 预测基因分析 | 第30页 |
| 2.2.5 基因的生物信息学分析 | 第30页 |
| 2.2.6 目的基因的克隆 | 第30-32页 |
| 2.2.7 目的基因与pUC-T克隆载体连接 | 第32-34页 |
| 2.2.8 表达载体构建 | 第34-35页 |
| 2.2.9 半薄切片制片过程 | 第35-36页 |
| 2.3 相关试剂的配制 | 第36-38页 |
| 2.4 实验地点 | 第38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-59页 |
| 3.1 ms6044败育过程细胞形态学观察 | 第38-40页 |
| 3.1.1 ms6044田间观察及取样 | 第38-39页 |
| 3.1.2 ms6044败育过程细胞形态学观察 | 第39-40页 |
| 3.2 定位群体构建 | 第40页 |
| 3.3 遗传学分析 | 第40-41页 |
| 3.4 ms6044基因的遗传定位 | 第41-42页 |
| 3.5 ms6044基因的精细遗传定位 | 第42-44页 |
| 3.6 候选基因预测 | 第44-45页 |
| 3.7 转录本分析 | 第45-46页 |
| 3.8 表达分析 | 第46-47页 |
| 3.9 编码蛋白的理化性质和保守结构域分析 | 第47-50页 |
| 3.10 蛋白的亚细胞定位预测 | 第50-51页 |
| 3.11 同源蛋白的生物信息学分析 | 第51-52页 |
| 3.12 正义表达载体的构建 | 第52-55页 |
| 3.13 RNAi载体构建 | 第55-57页 |
| 3.14 等位测验 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| 4.1 隐性核不育基因ms6044图位克隆 | 第59-60页 |
| 4.1.1 隐性核不育基因ms6044定位 | 第59页 |
| 4.1.2 候选基因的生物信息学分析 | 第59-60页 |
| 4.1.4 ms6044的细胞学观察和候选基因表达分析 | 第60页 |
| 4.1.5 候选基因的证明 | 第60页 |
| 4.2 隐性核不育基因在生产中的应用 | 第60-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第69页 |
