| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 文献综述 | 第15-38页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 第一章 脂肪细胞形成及调节因子 | 第16-31页 |
| ·肥胖与脂肪组织 | 第16-17页 |
| ·肥胖 | 第16页 |
| ·脂肪组织 | 第16-17页 |
| ·脂肪细胞形成的离体模型 | 第17-18页 |
| ·脂肪细胞的形成过程 | 第18-21页 |
| ·MSCs 定向 | 第18-20页 |
| ·前体脂肪细胞增殖、启动分化程序及终末分化 | 第20-21页 |
| ·脂肪细胞形成的转录调控 | 第21-25页 |
| ·PPARγ | 第21-22页 |
| ·C/EBP 家族 | 第22-23页 |
| ·其他转录因子 | 第23-24页 |
| ·分化的转录级联调控 | 第24-25页 |
| ·影响脂肪细胞形成的细胞因子 | 第25-31页 |
| ·Wnts（Wingless-type MMTV integration site family members）蛋白 | 第25-27页 |
| ·TGF-β超家族成员 | 第27-29页 |
| ·FGFs | 第29-31页 |
| 第二章 FGF-1 在脂肪细胞形成的作用 | 第31-34页 |
| ·FGF-1 在人前体脂肪细胞培养中的作用 | 第31-32页 |
| ·DNA 基因芯片 | 第32页 |
| ·基因芯片数据分析 | 第32-34页 |
| 第三章 候选基因BAMBI | 第34-38页 |
| ·BAMBI 基因概述 | 第34页 |
| ·BAMBI 蛋白结构 | 第34-35页 |
| ·BAMBI 的生物学功能 | 第35-36页 |
| ·BAMBI 在肿瘤细胞中的作用研究 | 第35页 |
| ·BAMBI 在胚胎发育中及牙形成中的作用研究 | 第35-36页 |
| ·BAMBI 调节的信号通路及在脂肪细胞形成中预测的作用 | 第36-38页 |
| 实验研究 | 第38-117页 |
| 第四章 实验假设与实验目标 | 第38-40页 |
| ·基于文献综述的科学问题 | 第38页 |
| ·实验假设 | 第38-39页 |
| ·实验目标 | 第39-40页 |
| 第五章 材料与方法 | 第40-55页 |
| ·实验材料 | 第40-44页 |
| ·主要试剂及配方 | 第40-43页 |
| ·重组蛋白 | 第43页 |
| ·抑制剂 | 第43页 |
| ·细胞培养消耗品 | 第43-44页 |
| ·抗体 | 第44页 |
| ·实验对象 | 第44-45页 |
| ·人脂肪组织 | 第44页 |
| ·小鼠脂肪组织 | 第44-45页 |
| ·细胞培养 | 第45页 |
| ·phPAs 的分离与培养 | 第45页 |
| ·SGBS 前体脂肪细胞株的培养 | 第45页 |
| ·基因芯片 | 第45页 |
| ·抑制剂实验 | 第45-46页 |
| ·Small interfering RNAs（siRNAs）转染 | 第46-47页 |
| ·初步确定NanoJuice 用量的预实验 | 第46-47页 |
| ·人前体脂肪细胞转染操作流程 | 第47页 |
| ·质粒DNA 转染 | 第47-49页 |
| ·pCMV5-BAMBI 质粒载体的准备 | 第47-48页 |
| ·瞬时转染BAMBI 质粒DNA | 第48-49页 |
| ·细胞分化检测 | 第49页 |
| ·细胞形态学检测 | 第49页 |
| ·油红O 染色分析 | 第49页 |
| ·RNA 提取 | 第49-50页 |
| ·细胞中总RNA 的提取方法 | 第49-50页 |
| ·组织中总RNA 的提取方法 | 第50页 |
| ·反转录实时定量PCR | 第50-52页 |
| ·cDNA 的合成 | 第50-51页 |
| ·实时定量PCR (real time PCR) | 第51-52页 |
| ·总蛋白提取 | 第52页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第52页 |
| ·Western blot 分析 | 第52-53页 |
| ·蛋白样本的准备 | 第52页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第52页 |
| ·半干转膜(Semi Dry Transfer) | 第52-53页 |
| ·封闭(Blocking) | 第53页 |
| ·一抗孵育(Primary antibody incubation) | 第53页 |
| ·二抗孵育(Secondary antibody incubation) | 第53页 |
| ·Odyssey 成像分析 | 第53页 |
| ·adiponectin 分泌检测 | 第53-54页 |
| ·样本的收集 | 第53页 |
| ·adiponectin ELISA 检测 | 第53-54页 |
| ·细胞葡萄糖吸收检测 | 第54页 |
| ·细胞样本的准备 | 第54页 |
| ·葡萄糖吸收测定 | 第54页 |
| ·数据分析 | 第54-55页 |
| 第六章 BAMBI 在脂肪细胞形成中的作用研究 | 第55-73页 |
| ·引言 | 第55-56页 |
| ·结果 | 第56-70页 |
| ·FGF-1 及成脂分化下调BAMBI 的表达 | 第56-58页 |
| ·干扰BAMBI 促进SGBS 前体脂肪细胞启动分化程序 | 第58-61页 |
| ·超表达BAMBI 抑制SGBS 前体脂肪细胞启动分化程序 | 第61-64页 |
| ·干扰BAMBI 促进SGBS 前体脂肪细胞的分化 | 第64-67页 |
| ·干扰BAMBI 促进SGBS 成熟脂肪细胞的功能 | 第67页 |
| ·干扰BAMBI 促进人原代前体脂肪细胞的分化 | 第67-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| ·DNA 微阵列的应用 | 第70页 |
| ·FGF-1 下调BAMBI 基因的信号通路 | 第70-71页 |
| ·改变BAMBI 基因表达影响脂肪细胞形成 | 第71-72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 第七章 BAMBI 在人脂肪细胞形成中促进Wnt/β-catenin 信号通路 | 第73-85页 |
| ·前言 | 第73-74页 |
| ·结果 | 第74-83页 |
| ·Wnt/β-catenin 信号通路相关基因在SGBS 中的表达模式 | 第74-76页 |
| ·干扰BAMBI 基因对Wnt/β-catenin 信号通路相关基因表达的影响 | 第76页 |
| ·Wnt3a 浓度的筛选 | 第76-77页 |
| ·干扰BAMBI 对Wnt3a 抑制成脂作用的影响 | 第77页 |
| ·BAMBI 的表达不受Wnt3a 的调节 | 第77-83页 |
| ·讨论 | 第83-84页 |
| ·小结 | 第84-85页 |
| 第八章 BAMBI 在人脂肪细胞形成中促进TGF-β1 的抑制成脂作用 | 第85-97页 |
| ·前言 | 第85页 |
| ·结果 | 第85-95页 |
| ·TGF-β1 浓度的筛选 | 第85-87页 |
| ·干扰BAMBI 对Smad2/3 磷酸化的影响 | 第87-91页 |
| ·干扰BAMBI 对TGF-β1 抑制成脂作用的影响 | 第91-95页 |
| ·讨论 | 第95-96页 |
| ·小结 | 第96-97页 |
| 第九章 BAMBI 在人脂肪细胞形成中促进BMP-4 的成脂作用 | 第97-110页 |
| ·前言 | 第97-98页 |
| ·结果 | 第98-108页 |
| ·BMP-4 浓度的筛选 | 第98-99页 |
| ·干扰BAMBI 对Smad1/5/8 磷酸化的影响 | 第99-100页 |
| ·干扰BAMBI 对BMP-4 促进成脂作用的影响 | 第100-101页 |
| ·BMP-4 不能调节BAMBI 的表达 | 第101页 |
| ·BAMBI 在高脂饮食诱导的肥胖小鼠及ob/ob 小鼠中的表达量下调 | 第101-108页 |
| ·讨论 | 第108-109页 |
| ·小结 | 第109-110页 |
| 第十章 结论、创新点与进一步研究内容 | 第110-117页 |
| ·结论及创新点概述 | 第110-111页 |
| ·结论 | 第110-111页 |
| ·创新点 | 第111页 |
| ·FGF-1 处理的脂肪细胞模型 | 第111-113页 |
| ·FGF-1 下调BAMBI 的信号转导机制 | 第111-112页 |
| ·缺失BAMBI 的前体脂肪细胞在脂肪细胞形成中的特性 | 第112页 |
| ·超表达BAMBI 抑制前体脂肪细胞定向 | 第112页 |
| ·小结 | 第112-113页 |
| ·BAMBI 在自分泌/旁分泌脂肪细胞调节因子中的作用 | 第113-116页 |
| ·BAMBI 增强Wnt3a 抗脂肪细胞分化的作用 | 第113-114页 |
| ·BAMBI 增强TGF-β1 抗脂肪细胞分化的作用 | 第114页 |
| ·BAMBI 协助BMP-4 促进脂肪细胞分化 | 第114-115页 |
| ·小结 | 第115-116页 |
| ·脂肪细胞形成的在体模型 | 第116页 |
| ·总结 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-134页 |
| 附录 | 第134-136页 |
| 缩略词表 | 第136-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
| 作者简介 | 第140-141页 |
