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重组腺病毒介导的人乳铁蛋白抗宫颈癌作用及其机理研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一部分 文献综述第12-33页
 前言第12-13页
 第一章 乳铁蛋白的研究现状第13-18页
   ·乳铁蛋白的基本结构与分布第13-15页
     ·乳铁蛋白的结构第13-14页
     ·乳铁蛋白的分布第14-15页
   ·乳铁蛋白的生物学功能第15-18页
     ·促进铁的吸收第15-16页
     ·抗菌活性第16页
     ·免疫调节活性第16页
     ·抗病毒活性第16-17页
     ·抗氧化活性第17页
     ·抗肿瘤活性第17-18页
 第二章 基因治疗的研究进展第18-23页
   ·病毒载体第18-21页
     ·腺病毒载体(adenovirus, AV)第18-19页
     ·逆转录病毒载体(retrovirus vectors, RV)第19-20页
     ·腺相关病毒载体(adeno-associated virus,AVV)第20页
     ·慢病毒载体(lentivirus)第20-21页
   ·非病毒载体第21-23页
     ·裸DNA第21页
     ·脂质体或脂质复合物第21-23页
 第三章 宫颈癌发生的分子机制第23-33页
   ·细胞周期调控与宫颈癌第23-28页
     ·细胞周期蛋白(Cyclin)第24-25页
     ·细胞周期蛋白依赖性激酶(Cyclin-dependent kinases, CDKs)第25-26页
     ·细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(Cyclin dependent kinase inhibitors, CKIs)第26-28页
   ·宫颈癌与细胞凋亡第28-33页
     ·内源性途径(线粒体凋亡途径)第29页
     ·外源性途径(死亡受体途径)第29-30页
     ·内质网通路第30-31页
     ·细胞凋亡基因第31-33页
第二部分 试验研究第33-91页
 第四章 重组腺病毒的扩增、纯化、鉴定和滴度测定第33-42页
   ·材料和方法第33-38页
     ·试验材料第33-35页
     ·试验方法第35-38页
   ·结果与分析第38-39页
     ·重组腺病毒的扩增第38页
     ·重组腺病毒Ad-hLF 的鉴定第38-39页
     ·重组腺病毒滴度测定第39页
   ·讨论第39-41页
     ·腺病毒的转染第39-40页
     ·重组腺病毒在HEK923 细胞中的扩增第40-41页
   ·本章小结第41-42页
 第五章 腺病毒介导的人乳铁蛋白对HeLa 细胞增殖及机理研究第42-60页
   ·材料与方法第42-50页
     ·试验材料第42-44页
     ·试验方法第44-50页
   ·结果与分析第50-56页
     ·重组腺病毒感染效率的确定第50页
     ·hLF 感染对宫颈癌HeLa 细胞蛋白表达的影响第50-51页
     ·MTT 法检测细胞体外增殖活性影响第51页
     ·细胞划痕试验第51-52页
     ·转染细胞凋亡核细胞周期的检测第52页
     ·Hoechst 33342 荧光染色观察细胞凋亡第52-53页
     ·Annexin V-FITC/PI 凋亡检测第53-54页
     ·单细胞凝胶电泳(Single cell gel electrophoresis, SCGE)实验第54-55页
     ·Ad-hLF 对HeLa 细胞Bcl-2 和Bax 基因mRNA 表达水平的影响第55-56页
   ·讨论第56-58页
     ·Ad-hLF 感染 HeLa 细胞后的表达第56页
     ·Ad-hLF 对HeLa 细胞增殖的影响第56-57页
     ·Ad-hLF 对HeLa 细胞周期的影响第57页
     ·Ad-hLF 诱导 HeLa 细胞凋亡的评价第57-58页
     ·Ad-hLF 诱导 HeLa 细胞凋亡分子机制第58页
   ·本章小结第58-60页
 第六章 腺病毒介导的人乳铁蛋白体内抗宫颈癌作用及其机理的研究第60-78页
   ·材料和方法第60-65页
     ·试验材料第60-62页
     ·试验方法第62-65页
   ·结果与分析第65-72页
     ·小鼠U14 宫颈癌模型的建立第65页
     ·Ad-hLF 对U14 宫颈癌生长的影响第65页
     ·hLF 在小鼠肿瘤组织中的表达第65-66页
     ·Ad-hLF 处理对小鼠肿瘤组织细胞周期的影响第66-67页
     ·Ad-hLF 处理对小鼠肿瘤组织显微结构的影响第67页
     ·TUNEL 染色检测Ad-hLF 对肿瘤凋亡细胞数量的影响第67-68页
     ·肿瘤组织胞浆内Ca2+的测定第68-69页
     ·Ad-hLF 处理对肿瘤组织细胞周期相关蛋白的影响第69-71页
     ·Ad-hLF 处理对肿瘤组织细胞凋亡相关蛋白表达的影响第71-72页
   ·讨论第72-76页
     ·Ad-hLF 对荷瘤小鼠肿瘤组织细胞周期的影响第72-73页
     ·Ad-hLF 诱导小鼠肿瘤细胞的凋亡形态学改变及评价第73页
     ·Ad-hLF 处理对肿瘤组织细胞周期相关蛋白表达的影响第73-75页
     ·Ad-hLF 处理对肿瘤组织细胞凋亡相关蛋白表达的影响第75-76页
   ·本章小结第76-78页
 第七章 腺病毒介导的人乳铁蛋白对荷瘤小鼠机体免疫调节作用的研究第78-91页
   ·材料和方法第78-81页
     ·试验材料第78-79页
     ·试验方法第79-81页
   ·结果与分析第81-86页
     ·Ad-hLF 处理对荷瘤小鼠瘤体重和生命延长率的影响第81-82页
     ·Ad-hLF 对荷瘤小鼠胸腺、脾脏重量的影响第82-83页
     ·小鼠NK 细胞活性测定第83页
     ·Ad-hLF 对荷瘤小鼠外周血单核淋巴细胞亚群的影响第83-84页
     ·Ad-hLF 处理对荷瘤小鼠血清IL-2, IL-4, IFN-γ,TNF-α第84-85页
     ·Ad-hLF 对荷瘤小鼠肿瘤组织中VEGF 表达的影响第85-86页
   ·讨论第86-90页
     ·Ad-hLF 对免疫器官及 NK 细胞活性的影响第86-87页
     ·Ad-hLF 对荷瘤小鼠外周血单核淋巴细胞亚群的影响第87-88页
     ·Ad-hLF 对荷瘤小鼠血清细胞因子的影响第88-89页
     ·Ad-hLF 对荷瘤小鼠肿瘤组织VEGF 表达的影响第89-90页
   ·小结第90-91页
结论第91页
创新点第91-92页
参考文献第92-101页
缩略词语表第101-102页
致谢第102-103页
作者简介第103页

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