中文摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-22页 |
·核糖体蛋白概述 | 第15-16页 |
·核糖体的结构与生物发生 | 第15页 |
·核糖体蛋白的分类与功能 | 第15-16页 |
·核糖体蛋白L11的研究进展 | 第16-20页 |
·核糖体蛋白L11概述 | 第16页 |
·RPL11参与HDM2-p53反馈调节 | 第16-18页 |
·RPL11对c-Myc的负反馈调节 | 第18页 |
·RPL11与肿瘤抑制 | 第18-20页 |
·实验材料及本课题的意义 | 第20-22页 |
·八肋游仆虫 | 第20页 |
·本研究的目的与意义 | 第20-22页 |
第二章 八肋游仆虫核糖体蛋白L11的定位分析 | 第22-28页 |
·材料 | 第22页 |
·细胞与质粒 | 第22页 |
·工具酶及试剂 | 第22页 |
·方法 | 第22-24页 |
·重组表达质粒pEGFP-N1-EoRPL11的构建 | 第22-23页 |
·转染级质粒的制备 | 第23页 |
·细胞培养 | 第23页 |
·质粒转染 | 第23页 |
·RT-PCR分析 | 第23页 |
·Western blot分析 | 第23-24页 |
·观察EoRPL11的定位 | 第24页 |
·结果 | 第24-27页 |
·重组质粒pEGFP-N1-EoRPL11的构建 | 第24页 |
·EoRPL11的表达鉴定 | 第24-26页 |
·EoRPL11的定位 | 第26-27页 |
·讨论 | 第27-28页 |
第三章 EORPL11的过表达对HEK293T细胞蛋白质翻译的影响 | 第28-34页 |
·材料 | 第28页 |
·细胞与质粒 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28页 |
·寡聚核苷酸 | 第28页 |
·方法 | 第28-29页 |
·重组表达质粒pCMV-Myc-EoRPL11和pCMV-Myc-GST的构建 | 第28-29页 |
·转染级质粒的制备 | 第29页 |
·RT-PCR和Western blot检测蛋白的表达 | 第29页 |
·报告基因活性的测定 | 第29页 |
·实时定量PCR分析 | 第29页 |
·结果 | 第29-33页 |
·重组质粒pCMV-Myc-EoRPL11和pCMV-Myc-GST的构建 | 第29-30页 |
·重组蛋白在HEK293T细胞中的表达鉴定 | 第30-31页 |
·过表达EoRPL11对荧光素酶合成的影响 | 第31-32页 |
·荧光素酶mRNA的定量分析 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
第四章 EoRPL11的过表达对细胞增殖及周期的影响 | 第34-37页 |
·材料 | 第34页 |
·方法 | 第34页 |
·MTT法检测HEK293T细胞增殖 | 第34页 |
·流式细胞术检测HEK293T细胞周期 | 第34页 |
·结果 | 第34-36页 |
·EoRPL11的过表达对HEK293T细胞增殖的影响 | 第34-36页 |
·EoRPL11的过表达对HEK293T细胞周期的影响 | 第36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
第五章 HDM2的克隆与序列分析 | 第37-42页 |
·材料 | 第37页 |
·方法 | 第37-38页 |
·细胞总RNA提取及cDNA合成 | 第37页 |
·HDM2基因的克隆与序列测定 | 第37页 |
·HDM2基因序列分析 | 第37-38页 |
·结果 | 第38-40页 |
·HDM2基因的PCR扩增 | 第38页 |
·HDM2基因的克隆及测序分析 | 第38-39页 |
·HDM2变异体基因序列分析 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
小结与展望 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
附录1 略语表 | 第48-49页 |
附录2 主要试剂配制 | 第49-51页 |
附录3 主要仪器设备 | 第51-52页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
个人简介及联系方式 | 第54-56页 |