摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1.1 噬菌体展示抗体技术研究进展 | 第11-18页 |
1.1.1 噬菌体展示基本形式 | 第12-13页 |
1.1.2 噬菌体展示抗体库技术的改进 | 第13-16页 |
1.1.3 噬菌体展示技术的最新应用 | 第16-18页 |
1.2 鸡 IgY 抗体简介 | 第18-19页 |
1.3 CD46 研究进展 | 第19-21页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 噬菌体展示抗体库的构建和特异性抗体的筛选 | 第22-44页 |
2.1 试验材料 | 第22-24页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第22页 |
2.1.2 试验动物 | 第22页 |
2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第22页 |
2.1.5 主要培养基的配置 | 第22-24页 |
2.2 方法 | 第24-34页 |
2.2.1 CD46-His 融合蛋白的诱导表达 | 第24-25页 |
2.2.2 融合蛋白的 Western blot 分析 | 第25页 |
2.2.3 pET-30a-CD46/BL21 菌体的处理 | 第25页 |
2.2.4 CD46-His 融合蛋白的纯化 | 第25-26页 |
2.2.5 包涵体蛋白复性 | 第26页 |
2.2.6 pMal-c2x-CD46 载体的构建 | 第26-28页 |
2.2.7 CD46-MBP 融合蛋白的表达纯化 | 第28-29页 |
2.2.8 Western Blot 分析 | 第29页 |
2.2.9 SPF 鸡的免疫 | 第29页 |
2.2.10 scFv 抗体库的构建 | 第29-31页 |
2.2.11 抗体库的多样性鉴定 | 第31页 |
2.2.12 特异性抗体的淘选 | 第31-33页 |
2.2.13 Phage ELISA 筛选高特异性 scFv | 第33-34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-41页 |
2.3.1 免疫原的特性 | 第34-37页 |
2.3.2 免疫后血清的特异性 | 第37-38页 |
2.3.3 抗体可变区基因的扩增 | 第38页 |
2.3.4 抗体库的构建 | 第38-39页 |
2.3.5 噬菌体抗体库的多样性 | 第39-40页 |
2.3.6 抗体库的淘选 | 第40-41页 |
2.4 讨论 | 第41-44页 |
2.4.1 抗原的原核表达 | 第42页 |
2.4.2 抗体库的构建 | 第42-43页 |
2.4.3 抗体库的淘选效率 | 第43页 |
2.4.4 特异性 phage-scFv 的筛选 | 第43-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |