| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 脂肪细胞的起源与分布 | 第12页 |
| 1.2 脂肪细胞的类型 | 第12-15页 |
| 1.3 脂肪细胞分化模型 | 第15页 |
| 1.4 脂肪细胞的分化过程 | 第15-16页 |
| 1.5 表观遗传学与脂肪细胞分化 | 第16-18页 |
| 1.5.1 组蛋白修饰 | 第16-17页 |
| 1.5.2 miRNA 与脂肪细胞分化 | 第17-18页 |
| 1.6 miRNA 起源与调节 | 第18-19页 |
| 1.7 miR‐125a 的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.8 雌激素受体相关受体α | 第20-22页 |
| 第二章 MIR‐125a 在猪原代脂肪细胞分化过程中的作用研究 | 第22-34页 |
| 2.1 前言 | 第22页 |
| 2.2 材料与方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.2.2 猪前体脂肪细胞的分离获得与培养 | 第23页 |
| 2.2.3 猪前体脂肪细胞的诱导分化及油红 O 染色 | 第23页 |
| 2.2.4 TRIzol 法提取总 RNA | 第23页 |
| 2.2.5 反转录及 Real time‐qPCR | 第23页 |
| 2.2.6 细胞中总蛋白的提取 | 第23页 |
| 2.2.7 Western Blot 分析 | 第23页 |
| 2.2.8 猪 ERRα 3′UTR 的克隆 | 第23-24页 |
| 2.2.9 psiCHECK‐ERRα‐UTR 载体的构建 | 第24-25页 |
| 2.2.10 psiCHECK‐ERRα‐UTR‐muta 突变载体构建(Ho et al. 1989) | 第25页 |
| 2.2.11 双荧光素酶报告基因检测分析 | 第25-26页 |
| 2.3 数据统计分析 | 第26页 |
| 2.4 结果 | 第26-32页 |
| 2.4.1 MiR‐125a 靶基因预测及荧光素酶报告基因验证 | 第26页 |
| 2.4.2 MiR‐125a 组织表达谱 | 第26-27页 |
| 2.4.3 猪前体脂肪细胞分化模型的建立及 miR‐125a 脂肪细胞分化时序表达 | 第27-29页 |
| 2.4.4 使用 agomir 过表达 miR‐125a 抑制猪前体脂肪细胞分化 | 第29-30页 |
| 2.4.5 使用 antagomir 抑制 miR‐125a 促进猪前体脂肪细胞分化 | 第30-32页 |
| 2.4.6 在猪前体脂肪细胞分化过程中 miR‐125a 靶向 ERRα | 第32页 |
| 2.5 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 MIR‐125a‐5p 在 3T3‐L1 前体脂肪细胞分化中发挥负调控作用 | 第34-43页 |
| 3.1 前言 | 第34页 |
| 3.2 材料与方法 | 第34-35页 |
| 3.2.1 材料 | 第34页 |
| 3.2.2 组织中ＲNA 的提取 | 第34页 |
| 3.2.3 3T3‐L1 细胞培养及诱导分化 | 第34-35页 |
| 3.2.4 细胞转染 | 第35页 |
| 3.2.5 RNA 提取及 Real‐time qPCR | 第35页 |
| 3.2.6 Western blot 分析 | 第35页 |
| 3.2.7 油红 O 染色及定量 | 第35页 |
| 3.3 数据统计分析 | 第35页 |
| 3.4 研究结果 | 第35-41页 |
| 3.4.1 MiR‐125a‐5p 在小鼠各组织中的表达谱 | 第35-36页 |
| 3.4.2 MiR‐125a‐5p 在 3T3‐L1 分化过程中的时序表达 | 第36-38页 |
| 3.4.3 过表达 miR‐125a‐5p 抑制 3T3‐L1 前体脂肪细胞分化 | 第38-39页 |
| 3.4.4 抑制 miR‐125a‐5p 促进 3T3‐L1 前体脂肪细胞分化 | 第39-41页 |
| 3.5 讨论 | 第41-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 一、MIR‐125A通过靶向 ERRΑ抑制猪前体脂肪细胞分化 | 第43页 |
| 二、MIR‐125A‐5P在 3T3‐L1 前体脂肪细胞分化中发挥负调控作用 | 第43-44页 |
| 创新点 | 第44-45页 |
| 进一步研究内容 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录 | 第52-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 个人简介 | 第67页 |
