摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-27页 |
1.1 周期蛋白依赖性激酶(CDKs)概述 | 第11-15页 |
1.1.1 CDKs的定义 | 第11-12页 |
1.1.2 CDKs的分子结构 | 第12-13页 |
1.1.3 CDKs的作用机制 | 第13-15页 |
1.2 周期蛋白依赖性激酶的生理功能 | 第15-21页 |
1.2.1 CDKs对细胞周期的调控作用 | 第15-16页 |
1.2.2 CDKs对细胞增殖与分化的调控作用 | 第16-18页 |
1.2.3 CDKs对细胞癌变的调节作用 | 第18-20页 |
1.2.4 CDKs对免疫系统的调节作用 | 第20-21页 |
1.2.5 CDKs对造血作用的调节 | 第21页 |
1.3 甲壳动物造血作用的研究进展 | 第21-25页 |
1.3.1 甲壳动物血淋巴细胞的种类及功能 | 第21-23页 |
1.3.2 甲壳动物血淋巴细胞的生成、分化与释放的调控机制 | 第23-24页 |
1.3.3 造血过程在甲壳动物免疫应答中的响应 | 第24-25页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第25-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-39页 |
2.1 实验材料 | 第27-31页 |
2.1.1 实验动物和菌株 | 第27页 |
2.1.2 主要试剂 | 第27-30页 |
2.1.3 引物信息 | 第30-31页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第31页 |
2.2 实验方法 | 第31-39页 |
2.2.1 中华绒螯蟹病原刺激实验 | 第31-32页 |
2.2.2 中华绒螯蟹抽血刺激实验 | 第32页 |
2.2.3 总RNA提取及CDNA合成 | 第32-33页 |
2.2.4 基因克隆与序列分析 | 第33页 |
2.2.5 表达载体的构建 | 第33页 |
2.2.6 重组蛋白的表达与纯化 | 第33-34页 |
2.2.7 多克隆抗体的制备 | 第34页 |
2.2.8 中华绒螯蟹蛋白提取及WESTERNBLOT实验 | 第34-35页 |
2.2.9 中华绒螯蟹造血组织免疫荧光分析 | 第35-36页 |
2.2.10 实时荧光定量PCR检测基因表达 | 第36页 |
2.2.11 中华绒螯蟹基因干扰实验 | 第36-37页 |
2.2.12 中华绒螯蟹血淋巴细胞总数计数分析 | 第37页 |
2.2.13 中华绒螯蟹新生血细胞数量计数分析 | 第37页 |
2.2.14 中华绒螯蟹造血组织细胞的细胞周期分析 | 第37-38页 |
2.2.15 数据分析 | 第38-39页 |
第三章 实验结果 | 第39-54页 |
3.1 EsCDK2的鉴定与组织分布特征 | 第39-45页 |
3.1.1 EsCDK2的序列特征分析 | 第39-43页 |
3.1.2 REsCDK2的原核表达及WESTERNBLOT分析 | 第43-44页 |
3.1.3 EsCDK2的组织分布特征 | 第44-45页 |
3.2 免疫刺激后造血组织中EsCDK2的表达特征 | 第45-47页 |
3.2.1 脂多糖和嗜水汽单胞菌刺激后EsCDK2的表达模式 | 第45-46页 |
3.2.2 抽血刺激后血细胞总数(THC)的变化规律 | 第46-47页 |
3.2.3 抽血刺激后EsCDK2的表达特征 | 第47页 |
3.3 EsCDK2对造血组织细胞增殖的调节作用 | 第47-51页 |
3.3.1 造血组织中EsCDK2的干扰效率 | 第47-49页 |
3.3.2 抑制EsCDK2表达后血淋巴细胞总数(THC)的变化分析 | 第49页 |
3.3.3 抑制EsCDK2表达后新生血细胞数的变化分析 | 第49-51页 |
3.3.4 抑制EsCDK2表达后血细胞总数对于抽血刺激响应模式的变化 | 第51页 |
3.4 EsCDK2对造血组织细胞周期的影响 | 第51-54页 |
3.4.1 抑制EsCDK2表达后造血组织细胞的细胞周期变化 | 第51-53页 |
3.4.2 抑制EsCDK2表达后造血组织细胞不同时相比例的分析 | 第53-54页 |
第四章 分析与讨论 | 第54-60页 |
4.1 EsCDK2的基本分子特征 | 第54-55页 |
4.1.1 EsCDK2基因序列的特征 | 第54-55页 |
4.1.2 EsCDK2的进化意义 | 第55页 |
4.2 EsCDK2的表达特征 | 第55-58页 |
4.2.1 EsCDK2的组织表达特征 | 第55-56页 |
4.2.2 免疫刺激后造血组织中EsCDK2的表达变化 | 第56-57页 |
4.2.3 抽血刺激后造血组织中EsCDK2的表达变化 | 第57-58页 |
4.3 EsCDK2对造血组织细胞增殖的调控 | 第58-59页 |
4.4 EsCDK2对造血组织细胞周期的调控 | 第59-60页 |
第五章 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第74页 |