| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 中英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-15页 |
| 1.1 Notch 信号通路简单概述以及在心脏中的作用 | 第11-12页 |
| 1.2 PI3K/AKT 信号通路与心肌保护作用 | 第12-13页 |
| 1.3 Notch-1 信号系统与 PI3K/AKT 通路相互整合参与心肌保护 | 第13页 |
| 1.4 Notch-1 信号系统在心肌细胞纤维化中的作用 | 第13-14页 |
| 1.5 以 PI3K/AKT 为切入点研究 Notch-1 信号系统对心肌损伤的保护作用及机制 | 第14-15页 |
| 第2章 材料与方法 | 第15-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 细胞 | 第15页 |
| 2.1.2 主要试剂及耗材 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-26页 |
| 2.2.1 器材的灭菌、去 RNA 酶处理 | 第16-17页 |
| 2.2.2 相关液体的配制 | 第17-18页 |
| 2.2.3 大鼠胚胎心肌细胞株 H9c2 细胞的体外培养 | 第18-19页 |
| 2.2.4 γ分泌肽酶抑制剂(DAPT)使用浓度的测定 | 第19-20页 |
| 2.2.5 Notch-1 慢病毒感染 H9c2 细胞确定 MOI 值 | 第20页 |
| 2.2.6 正式慢病毒感染实验 | 第20-21页 |
| 2.2.7 CCK-8 检测各组 H9c2 细胞增殖的变化 | 第21页 |
| 2.2.8 应用 Annexin V /PI 双染色后流式细胞仪测各组心肌细胞凋亡率并比较 | 第21-22页 |
| 2.2.9 qRT-PCR 检测 DAPT 干预和 Notch-1 过表达慢病毒感染后各组H9c2 细胞 PI3K/AKT mRNA 的表达 | 第22-24页 |
| 2.2.10 Western blot 检测 DAPT 干预和 Notch-1 过表达慢病毒感染后各组H9c2 细胞 Notch-1、P-PI3K/P-AKT、Bax、Bcl-2、α-sma、collagen I 蛋白的表达 | 第24-26页 |
| 2.3 统计学分析 | 第26-27页 |
| 第3章 结果 | 第27-37页 |
| 3.1 H9c2 细胞的生长特点 | 第27页 |
| 3.2 不同浓度 DAPT 对 H9c2 心肌细胞增殖的影响 | 第27-28页 |
| 3.3 空载体慢病毒感染 H9c2 细胞测 MOI 值结果 | 第28-30页 |
| 3.4 Western blot 法测定各组细胞 Notch-1 蛋白的表达 | 第30页 |
| 3.5 Notch-1对心肌细胞增殖的影响:CCK-8试剂盒检测各组H9c2细胞的增殖抑制率 | 第30-31页 |
| 3.6 Notch-1 对心肌细胞凋亡的影响： | 第31-34页 |
| 3.6.1 Western blot 法测定各组细胞 Bax、Bcl-2 的表达 | 第31-32页 |
| 3.6.2 应用 Annexin V-FITC/PI 双染色后流式细胞仪测各组 H9c2 心肌细胞凋亡率 | 第32-34页 |
| 3.7 Notch-1 对心肌细胞纤维化反应的影响：Western blot 法测定各组H9c2 细胞中α-sma、collagen I 蛋白表达 | 第34页 |
| 3.8 定量 RT-PCR 法测定各组细胞中 PI3K/AKT mRNA 含量并比较 | 第34-36页 |
| 3.9 Western blot 法测定各组细胞 p-PI3K/p-AKT 蛋白的表达 | 第36-37页 |
| 第4章 讨论 | 第37-41页 |
| 第5章 结论与展望 | 第41-42页 |
| 5.1 结论 | 第41页 |
| 5.2 展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 综述 | 第47-52页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
