摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
前言 | 第15-17页 |
研究内容与法 | 第17-34页 |
1 研究内容 | 第17页 |
2 材料与方法 | 第17-33页 |
2.1 实验材料 | 第17-20页 |
2.1.1 标本采集 | 第17-18页 |
2.1.2 实验所需主要试剂 | 第18-19页 |
2.1.3 实验耗材及仪器设备 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-33页 |
2.2.1 实验相关试剂配制及器械的处理 | 第20-22页 |
2.2.2 组织的消化和细胞培养 | 第22-25页 |
2.2.2.1 细胞的原代培养 | 第22-23页 |
2.2.2.2 细胞计数 | 第23页 |
2.2.2.3 细胞传代培养 | 第23-24页 |
2.2.2.4 细胞的冻存与复苏 | 第24-25页 |
2.2.3 免疫细胞化学 | 第25-26页 |
2.2.4 siRNA设计、片段的筛选及条件优化 | 第26-28页 |
2.2.4.1 siRNA片段设计 | 第26-27页 |
2.2.4.2 siRNA转染条件优化 | 第27页 |
2.2.4.2.1 阴性荧光对照转染 | 第27页 |
2.2.4.2.2 GAPDH阳性对照转染条件优化 | 第27页 |
2.2.4.3 siRNA片段的选择 | 第27-28页 |
2.2.5 雌激素刺激下的nm23-H1、MMP-9和MMP-2的表达 | 第28页 |
2.2.6 siRNA转染抑制nm23-H1表达 | 第28页 |
2.2.7 qRT-PCR实验 | 第28-33页 |
2.2.7.1 细胞中总RNA的提取 | 第28-30页 |
2.2.7.2 RNA浓度与纯度的检测 | 第30-31页 |
2.2.7.3 qRT-PCR对目的基因的检测 | 第31-33页 |
3.统计方法 | 第33-34页 |
结果 | 第34-45页 |
讨论 | 第45-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
综述 | 第58-75页 |
参考文献 | 第68-75页 |
作者简介及读研期间主要科研成果 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |