| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 符号与缩写 | 第11-12页 |
| 第一章 成熟精子 RNA 研究现状 | 第12-20页 |
| 1.1 睾丸、附睾和精子的结构 | 第12-14页 |
| 1.2 精子发生过程和受精过程 | 第14-17页 |
| 1.3 精子的 RNA 的种类与功能 | 第17-20页 |
| 第二章 DNA 测序技术的进展 | 第20-32页 |
| 2.1 第一代 DNA 测序技术 | 第20-22页 |
| 2.1.1 化学降解法 | 第20页 |
| 2.1.2 Sanger 测序法 | 第20-22页 |
| 2.2 第二代测序技术 | 第22-27页 |
| 2.2.1 454/ Roche 测序技术 | 第23-24页 |
| 2.2.2 Solexa/Illumina 测序技术 | 第24-26页 |
| 2.2.3 SOLiD 测序技术 | 第26-27页 |
| 2.3 第三代测序技术 | 第27-28页 |
| 2.4 RNA 测序技术 | 第28-29页 |
| 2.5 RNA 测序表达谱分析 | 第29-32页 |
| 第三章 小鼠成熟精子中表达谱的分析及早期胚胎发育中潜在功能的研究 | 第32-73页 |
| 3.1 实验方法和材料 | 第32-44页 |
| 3.1.1 小鼠精子样本来源 | 第32页 |
| 3.1.2 小鼠成熟精子，卵子和受精卵样本的收集和纯化 | 第32-33页 |
| 3.1.3 RNA 的提取和检测 | 第33-34页 |
| 3.1.4 cDNA 文库的建立和 RNA 测序 | 第34页 |
| 3.1.5 RNA 序列的组装和定位 | 第34-35页 |
| 3.1.6 RT- PCR 确定 RNA 测序结果 | 第35-36页 |
| 3.1.7 Real-time PCR 确定 RNA 测序结果 | 第36-37页 |
| 3.1.8 确定精子中普遍存在的 RNA 种类 | 第37-38页 |
| 3.1.9 RNA 测序数据的生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 3.1.10 RT-PCR 分析胚胎发育相关的基因 | 第39-42页 |
| 3.1.11 蛋白质提取和 SDS-PAGE 电泳 | 第42-43页 |
| 3.1.12 蛋白印迹分析 | 第43页 |
| 3.1.13 免疫荧光分析 | 第43-44页 |
| 3.2 实验结果 | 第44-66页 |
| 3.2.1 精子样品的质量 | 第44-45页 |
| 3.2.2 转录组测序产出、序列组装 | 第45-47页 |
| 3.2.3 RNA 测序结果的检测 | 第47-49页 |
| 3.2.4 精子中 RNA 种类的确定 | 第49页 |
| 3.2.5 RPKM≥6 的 mRNA 在染色体上的分布 | 第49-50页 |
| 3.2.6 RPKM≥6 的 mRNA 编码的蛋白在细胞内定位分析 | 第50-51页 |
| 3.2.7 RPKM≥6 的 mRNA 功能聚类分析 | 第51-52页 |
| 3.2.8 RPKM≥6 的 mRNA 细胞通路分析 | 第52-53页 |
| 3.2.9 RPKM≥6 的 mRNA 表型分析 | 第53-55页 |
| 3.2.10 RPKM≥6 的与精子发生相关 mRNA 的分析 | 第55页 |
| 3.2.11 RPKM≥6 的转录因子分析 | 第55-56页 |
| 3.2.12 精子中高丰度 mRNA 表达谱分析 | 第56-59页 |
| 3.2.13 RPKM≥6、60、600 的生物学过程和表型比较 | 第59-61页 |
| 3.2.14 与胚胎发育相关 mRNA 在卵子中检验 | 第61-62页 |
| 3.2.15 与胚胎发育相关 mRNA 在早期和晚期受精卵中检验 | 第62-63页 |
| 3.2.16 WNT4 和 FOXG1 蛋白在早期和晚期受精卵中检验 | 第63-66页 |
| 3.3 实验结果讨论 | 第66-73页 |
| 3.3.1 小鼠精子中广泛存在的 mRNA 的种类估算 | 第66-67页 |
| 3.3.2 小鼠精子中广泛存在的 mRNA 的表达谱分析 | 第67-69页 |
| 3.3.3 精子中高丰度的 mRNA 的功能分析 | 第69-70页 |
| 3.3.4 精子来源的 mRNA 被运送到受精卵子中并被翻译 | 第70-73页 |
| 第四章 总结与展望 | 第73-76页 |
| 4.1 总结 | 第73-74页 |
| 4.2 展望 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 附录 1：实验仪器 | 第84-85页 |
| 附录 2：实验试剂的配置方法 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第88-89页 |
| 附件 | 第89页 |
