| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略词 | 第8-10页 |
| 一、背景 | 第10-17页 |
| 1. Nrf2-ARE信号途径简介 | 第10-11页 |
| 2. Nrf2和Keap1的结构域 | 第11-12页 |
| 3. Keap1对Nrf2活性的调节 | 第12页 |
| 4. Nrf2活性的诱导剂 | 第12-13页 |
| 5. Nrf2-ARE信号通路的生理功能 | 第13-16页 |
| 6. WSSV病毒相关研究 | 第16-17页 |
| 7. 本论文研究的科学问题 | 第17页 |
| 二、材料方法 | 第17-27页 |
| 1. 材料 | 第17-18页 |
| 1.1实验动物 | 第17页 |
| 1.2 试剂 | 第17-18页 |
| 1.3 质粒和菌株 | 第18页 |
| 2. 实验方法 | 第18-27页 |
| 2.1 病毒刺激 | 第18页 |
| 2.2 RNA提取 | 第18-19页 |
| 2.3 cDNA的合成 | 第19页 |
| 2.4 组织蛋白提取 | 第19页 |
| 2.5 MjNrf2和VP41B基因的全长扩增与载体的构建 | 第19-20页 |
| 2.6 MjNrf2基因的序列分析和进化树分析 | 第20页 |
| 2.7 重组表达质粒构建 | 第20-21页 |
| 2.8 重组蛋白表达、纯化及抗体的制备 | 第21-22页 |
| 2.9 反转录PCR和实时定量PCR | 第22页 |
| 2.10 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第22-23页 |
| 2.11 RNA干扰 | 第23-24页 |
| 2.12 对虾存活率统计 | 第24页 |
| 2.13 核质蛋白分离及提取 | 第24页 |
| 2.14 染色质免疫共沉淀实验 | 第24-25页 |
| 2.15 体内H_2O_2检测 | 第25页 |
| 2.16 抗氧化剂NAC注射及外源H_2O_2注射 | 第25-26页 |
| 2.17 实验中所涉及的引物序列 | 第26-27页 |
| 三、实验结果 | 第27-37页 |
| 1. MjNrf2基因克隆,序列分析和进化树分析 | 第27-28页 |
| 2. MjNrf2的组织分布和表达模式 | 第28-29页 |
| 3. WSSV感染引起的活性氧的增加促进MjNrf2的表达 | 第29-30页 |
| 4. 干扰MjNrf2抑制对虾体内病毒复制 | 第30-31页 |
| 5. 干扰MjNrf2降低对虾体内病毒拷贝数,提高对虾存活率 | 第31-32页 |
| 6. SFN促进MjNrf2入核,促进对虾体内病毒复制 | 第32-33页 |
| 7. 具有ARE元件的WSSV病毒基因的筛选 | 第33-34页 |
| 8. WSSV感染后VP41B表达模式 | 第34-35页 |
| 9. MjNrf2通过与ARE元件结合调控病毒蛋白VP41B和IE1的表达 | 第35页 |
| 10. VP41B在病毒复制中发挥重要作用 | 第35-36页 |
| 总结 | 第36-37页 |
| 四、讨论 | 第37-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第47页 |
