| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 文献综述 | 第12-18页 |
| 第一章 维甲酸和micro RNA在胚胎干细胞作用中的研究 | 第12-18页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 胚胎干细胞的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3 胚胎干细胞体外诱导定向分化的机制研究 | 第13页 |
| 1.4 维甲酸的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.4.1 维甲酸的信号传递 | 第13-14页 |
| 1.4.2 维甲酸的功能研究 | 第14页 |
| 1.5 mi RNA的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.5.1 mi RNA的作用机制 | 第15页 |
| 1.5.2 mi RNA的研究进展。 | 第15-18页 |
| 第二章 Foxj3和Zbtb18调节ES细胞向神经分化 | 第18-28页 |
| 2.1 前言 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.2.1 细胞系 | 第18页 |
| 2.2.2 仪器与耗材 | 第18页 |
| 2.2.3 试剂 | 第18-19页 |
| 2.3 试验方法 | 第19-23页 |
| 2.3.1 培养小鼠JI ES细胞 | 第19页 |
| 2.3.2 RA 对 ES 细胞的诱导 | 第19页 |
| 2.3.3 脂质体法转染ES细胞 | 第19页 |
| 2.3.4 提取ES细胞m RNA | 第19-20页 |
| 2.3.5 定量PCR引物 | 第20-21页 |
| 2.3.6 定量PCR反应 | 第21页 |
| 2.3.7 蛋白免疫印迹实验（Western Blot） | 第21-22页 |
| 2.3.8 免疫荧光实验 | 第22页 |
| 2.3.9 裸鼠皮下成瘤实验 | 第22-23页 |
| 2.4 实验结果 | 第23-26页 |
| 2.4.1 过表达Foxj3和Zbtb18基因的Western Blot结果 | 第23页 |
| 2.4.2 敲降 Foxj3 和 Zbtb18 基因后 Nestin 蛋白表达量的改变 | 第23-24页 |
| 2.4.3 Foxj3 和 Zbtb18 对 ES 细胞向神经分化起抑制作用 | 第24-25页 |
| 2.4.4 Foxj3 与 Zbtb18 在畸胎瘤中抑制 ES 细胞向神经细胞的分化 | 第25-26页 |
| 2.5 讨论 | 第26-27页 |
| 2.6 小结 | 第27-28页 |
| 第三章 miR219 Foxj3/Zbtb18差异表达基因 | 第28-42页 |
| 3.1 引言 | 第28页 |
| 3.2 实验仪器与材料 | 第28-29页 |
| 3.2.1 细胞 | 第28页 |
| 3.2.2 仪器与耗材 | 第28页 |
| 3.2.3 试剂 | 第28-29页 |
| 3.3 试验方法 | 第29-33页 |
| 3.3.1 培养小鼠 JI ES 细胞 | 第29页 |
| 3.3.2 RA 对 ES 细胞的诱导 | 第29页 |
| 3.3.3 脂质体法转染 ES 细胞 | 第29-30页 |
| 3.3.4 提取细胞的总 RNA | 第30页 |
| 3.3.5 高通量测序分析 | 第30页 |
| 3.3.6 统计分析软件 | 第30-31页 |
| 3.3.7 GEO 数据集 | 第31页 |
| 3.3.8 目标 mi RNA 靶基因 GO 分析与构建基因共表达网络的建立 | 第31页 |
| 3.3.9 定量 PCR 反应 | 第31-32页 |
| 3.3.10 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第32-33页 |
| 3.4 实验结果 | 第33-40页 |
| 3.4.1 GO功能富集分析 | 第33-35页 |
| 3.4.2 差异表达基因的共表达网络分析 | 第35-36页 |
| 3.4.3 Olig1、Zic5、Erbb2和Olig2定量PCR结果 | 第36-38页 |
| 3.4.5 ES细胞Oct4、Nestin、Map2和Tuj1基因的表达情况 | 第38-40页 |
| 3.5 讨论 | 第40-41页 |
| 3.6 小结 | 第41-42页 |
| 第四章 Olig1和Olig2功能的鉴定 | 第42-52页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 实验仪器与材料 | 第42-43页 |
| 4.2.1 细胞 | 第42页 |
| 4.2.2 仪器与耗材 | 第42页 |
| 4.2.3 试剂 | 第42-43页 |
| 4.3 试验方法 | 第43-51页 |
| 4.3.1 定量PCR反应 | 第43页 |
| 4.3.2 RA 对 ES 细胞的诱导 | 第43页 |
| 4.3.3 脂质体法转染 ES 细胞 | 第43-44页 |
| 4.3.4 定量 PCR 反应 | 第44页 |
| 4.3.5 蛋白免疫印迹实验（Western Blot） | 第44-45页 |
| 4.3.6 过表达 Olig1 和 Olig2 对 RA 的诱导 ES 细胞分化起促进作用 | 第45-47页 |
| 4.3.7 敲降 Olig1 和 Olig2 对 RA 的诱导 ES 细胞分化起抑制作用 | 第47-49页 |
| 4.3.8 OCT4、NESTIN、MAP2 三种基因的免疫荧光结果 | 第49-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51页 |
| 4.5 小结 | 第51-52页 |
| 全文总结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
