| 中文摘要 | 第11-13页 |
| 英文摘要 | 第13-15页 |
| 1.引言 | 第16-27页 |
| 1.1 水貂阿留申病毒 | 第17-20页 |
| 1.1.1 ADV病原学 | 第17-18页 |
| 1.1.2 ADV的结构形态 | 第18页 |
| 1.1.3 ADV培养特性和毒株分类 | 第18页 |
| 1.1.4 ADV的复制过程 | 第18页 |
| 1.1.5 ADV基因组编码蛋白及功能 | 第18-19页 |
| 1.1.6 AD临诊症状及病理学变化 | 第19-20页 |
| 1.2 水貂肠炎细小病毒 | 第20-23页 |
| 1.2.1 MEV的病原学及理化特性 | 第20-21页 |
| 1.2.2 MEV的基因组组成及其特性 | 第21页 |
| 1.2.3 MEV的致病机制 | 第21-22页 |
| 1.2.4 MEV流行病学 | 第22页 |
| 1.2.5 MEV的临床症状 | 第22页 |
| 1.2.6 MEV的诊断方和防治 | 第22-23页 |
| 1.3 犬瘟热病毒 | 第23-26页 |
| 1.3.1 CDV病原学 | 第23页 |
| 1.3.2 CDV基因组分析 | 第23-24页 |
| 1.3.3 CDV的致病机理 | 第24页 |
| 1.3.4 CDV的流行病学 | 第24-25页 |
| 1.3.5 CDV的临床症状 | 第25页 |
| 1.3.6 CDV的诊断与防治 | 第25-26页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 2.材料与方法 | 第27-37页 |
| 2.1 材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 病毒和样品 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第27页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.4 细胞和实验动物 | 第28页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第28-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-37页 |
| 2.2.1 检测水貂胴体ADV、MEV、和CDV的三重PCR检测方法的建立 | 第29-32页 |
| 2.2.1.1 引物的设计 | 第29页 |
| 2.2.1.2 ADV和MEV的DNA模板及CDV的cDNA模板的获取 | 第29-31页 |
| 2.2.1.3 ADV、MEV和CDV的PCR扩增 | 第31页 |
| 2.2.1.4 单一PCR的特异性试验 | 第31页 |
| 2.2.1.5 三重PCR的灵敏度试验 | 第31-32页 |
| 2.2.1.6 山东省6个水貂主要养殖区胴体样品的检测 | 第32页 |
| 2.2.2 ADV和CDV的分离鉴定 | 第32-37页 |
| 2.2.2.1 细胞培养与ADV分离鉴定 | 第32页 |
| 2.2.2.2 引物设计 | 第32-33页 |
| 2.2.2.3 病毒组织半数感染量(TCID50)的测定 | 第33页 |
| 2.2.2.4 PCR检测ADV分离株 | 第33页 |
| 2.2.2.5 ADV-VP2全基因的扩增 | 第33页 |
| 2.2.2.6 目的基因的回收纯化 | 第33-34页 |
| 2.2.2.7 目的片段克隆载体的连接与转化 | 第34-35页 |
| 2.2.2.8 基因序列测序及分析 | 第35页 |
| 2.2.2.9 细胞培养与CDV分离鉴定 | 第35页 |
| 2.2.2.10 引物设计 | 第35-36页 |
| 2.2.2.11 PCR检测分离株 | 第36页 |
| 2.2.2.12 CDV-H蛋白基因的扩增 | 第36页 |
| 2.2.2.13 目的基因的回收纯化 | 第36页 |
| 2.2.2.14 目的片段克隆载体的连接与转化 | 第36页 |
| 2.2.2.15 基因序列测序及分析 | 第36-37页 |
| 2.2.3 ADV分离株感染小鼠安全性分析 | 第37页 |
| 2.3 数据处理 | 第37页 |
| 3.结果与分析 | 第37-52页 |
| 3.1 三重PCR检测方法的建立及各地区样品的检测 | 第37-40页 |
| 3.1.1 单一PCR特异性扩增 | 第37-38页 |
| 3.1.2 三重PCR扩增 | 第38-39页 |
| 3.1.3 三重PCR灵敏度试验 | 第39-40页 |
| 3.1.4 山东省6个水貂主要养殖区胴体样品的检测 | 第40页 |
| 3.2 ADV的分离鉴定及感染小鼠安全性分析 | 第40-47页 |
| 3.2.1 现地ADV感染水貂的临诊主要表现 | 第40页 |
| 3.2.2 ADV分离培养 | 第40-41页 |
| 3.2.3 ADV-SD分离株的PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2.4 ADV-SD分离株TCID50测定 | 第42页 |
| 3.2.5 病毒VP2基因组PCR扩增 | 第42页 |
| 3.2.6 基因测序及其拼接 | 第42-43页 |
| 3.2.7 ADV-SD-VP2基因与已报道毒株之间的同源性分析 | 第43页 |
| 3.2.8 ADV-SD-VP2基因进化分析 | 第43-44页 |
| 3.2.9 CDV的分离培养 | 第44页 |
| 3.2.10 CDV-SD分离株的PCR鉴定 | 第44-45页 |
| 3.2.11 CDV-SD株H蛋白基因的扩增 | 第45-46页 |
| 3.2.12 CDV-SD-H基因测序及其拼接 | 第46页 |
| 3.2.13 CDV-SD-H基因与已报道毒株的同源性分析 | 第46页 |
| 3.2.14 CDV-SD-H基因的进化分析 | 第46-47页 |
| 3.3 ADV感染小鼠的安全性分析 | 第47-52页 |
| 3.3.1 ADV感染小鼠体重变化 | 第47页 |
| 3.3.2 ADV感染小鼠后各脏器发育指数 | 第47-48页 |
| 3.3.3 PCR检测小鼠感染ADV | 第48页 |
| 3.3.4 感染ADV小鼠的血常规分析 | 第48-50页 |
| 3.3.5 H9流感株的抗体效价的检测 | 第50页 |
| 3.3.6 小鼠体内ADV的分离鉴定 | 第50页 |
| 3.3.7 ADV-mouse与参考株的同源性分析 | 第50-51页 |
| 3.3.8 ADV-mouseVP2分离株的基因进化分析 | 第51-52页 |
| 4.讨论 | 第52-55页 |
| 4.1 三重PCR检测方法的建立 | 第52页 |
| 4.2 ADV和CDV的分离鉴定 | 第52-54页 |
| 4.3 ADV感染小鼠的安全性分析 | 第54-55页 |
| 5.结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 硕士期间取得的主要学术成果 | 第64页 |
