| 提要 | 第4-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第17-57页 |
| 1.1 生物质 | 第17-25页 |
| 1.1.1 可再生资源与生物质概述 | 第17-18页 |
| 1.1.2 木质纤维素的构成 | 第18-22页 |
| 1.1.3 生物燃料 | 第22-25页 |
| 1.2 纤维素 | 第25-32页 |
| 1.2.1 纤维素的结构 | 第25-28页 |
| 1.2.2 植物细胞壁中的纤维素及其生成过程 | 第28-31页 |
| 1.2.3 纤维素的用途与转化 | 第31-32页 |
| 1.3 纤维素酶 | 第32-43页 |
| 1.3.1 纤维素酶概述 | 第32-34页 |
| 1.3.2 纤维素酶的分类 | 第34-38页 |
| 1.3.3 纤维素酶的分子结构与催化机制 | 第38-42页 |
| 1.3.4 协同降解作用及纤维素酶系统 | 第42-43页 |
| 1.4 嗜热纤维素酶 | 第43-48页 |
| 1.4.1 嗜热微生物与嗜热酶 | 第43-45页 |
| 1.4.2 嗜热纤维素酶概述 | 第45-47页 |
| 1.4.3 嗜热纤维素酶的应用 | 第47-48页 |
| 1.5 协同水解纤维素的作用及成分 | 第48-54页 |
| 1.5.1 松解纤维素结晶的活力 | 第48-49页 |
| 1.5.2 CBM 概述 | 第49-50页 |
| 1.5.3 CBM 结构与功能 | 第50-52页 |
| 1.5.4 扩张素和膨胀素 | 第52-54页 |
| 1.6 立题依据和实验设计 | 第54-57页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第57-77页 |
| 2.1 菌株与质粒 | 第57-58页 |
| 2.2 实验试剂 | 第58-60页 |
| 2.3 主要仪器 | 第60-61页 |
| 2.4 培养基 | 第61-63页 |
| 2.5 F. nodosum 内嗜热纤维素酶基因的克隆与重组 | 第63-65页 |
| 2.6 纤维素酶的表达与纯化 | 第65-66页 |
| 2.7 蛋白质浓度的测定 | 第66-67页 |
| 2.8 纤维素酶水解活力测定 | 第67-68页 |
| 2.9 纤维素酶性质实验 | 第68-69页 |
| 2.10 膨胀素TasSWO 的重组表达 | 第69-70页 |
| 2.11 活性重组膨胀素的制备 | 第70-71页 |
| 2.12 膨胀素与纤维素酶的协同反应 | 第71-72页 |
| 2.13 重组蛋白的质谱分析 | 第72页 |
| 2.14 纤维素水解产物的HPLC 分析 | 第72-73页 |
| 2.15 嵌合纤维素酶的制备与性质研究 | 第73-74页 |
| 2.16 系统发育关系分析 | 第74-75页 |
| 2.17 分子动力学模拟 | 第75-77页 |
| 第三章 嗜热纤维素酶FnCel5A 的性质研究 | 第77-95页 |
| 3.1 引言 | 第77-78页 |
| 3.2 嗜热纤维素酶FnCel5A 相关生物信息学分析 | 第78-82页 |
| 3.2.1 嗜热纤维素酶FnCel5A 序列信息分析 | 第78-79页 |
| 3.2.2 糖苷水解酶第5 家族的系统发育关系 | 第79-82页 |
| 3.3 嗜热纤维素酶FnCel5A 的表达与纯化 | 第82-87页 |
| 3.3.1 纤维素酶基因的克隆与表达 | 第82-85页 |
| 3.3.2 重组纤维素酶的纯化 | 第85-87页 |
| 3.4 嗜热纤维素酶FnCel5A 的酶学性质表征 | 第87-91页 |
| 3.4.1 嗜热纤维素酶FnCel5A 的底物专一性 | 第87-88页 |
| 3.4.2 温度和pH 对FnCel5A 酶活力的影响 | 第88-89页 |
| 3.4.3 阳离子、螯合剂、表面活性剂对FnCel5A 酶活力的影响 | 第89-90页 |
| 3.4.4 纤维素酶FnCel5A 的稳定性 | 第90-91页 |
| 3.5 嗜热纤维素酶FnCel5A 的分子结构分析 | 第91-94页 |
| 3.6 小结 | 第94-95页 |
| 第四章 膨胀素与纤维素酶协同水解纤维素的研究 | 第95-113页 |
| 4.1 引言 | 第95-96页 |
| 4.2 膨胀素TasSWO 的分子结构分析 | 第96-100页 |
| 4.3 膨胀素TasSWO 在大肠杆菌内的表达 | 第100-101页 |
| 4.4 膨胀素TasSWO 蛋白的复性 | 第101-104页 |
| 4.5 重组膨胀素TasSWO 蛋白的性质研究 | 第104-108页 |
| 4.6 膨胀素TasSWO 与纤维素酶FnCel5A 的协同反应 | 第108-112页 |
| 4.7 小结 | 第112-113页 |
| 第五章 CBM 与纤维素酶协同作用的研究 | 第113-135页 |
| 5.1 引言 | 第113-114页 |
| 5.2 生物信息学分析 | 第114-117页 |
| 5.3 嵌合纤维素酶的构建与表达 | 第117-120页 |
| 5.3.1 出发材料的选择 | 第117-118页 |
| 5.3.2 重组表达质粒的构建 | 第118页 |
| 5.3.3 重组纤维素酶的制备 | 第118-120页 |
| 5.4 嵌合纤维素酶的性质研究 | 第120-125页 |
| 5.4.1 嵌合纤维素酶活力分析 | 第120-121页 |
| 5.4.2 pH 和温度对嵌合纤维素酶活力的影响 | 第121-124页 |
| 5.4.3 嵌合纤维素酶的热稳定性 | 第124-125页 |
| 5.5 分子结构分析与分子动力学模拟 | 第125-133页 |
| 5.6 小结 | 第133-135页 |
| 参考文献 | 第135-144页 |
| 创新点 | 第144-145页 |
| 作者简历 | 第145页 |
| 博士期间已发表和待发表的文章 | 第145-146页 |
| 致谢 | 第146页 |
