摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-29页 |
1.1 苏云金芽胞杆菌概述 | 第10-11页 |
1.2 Cry蛋白 | 第11-16页 |
1.2.1 Three-domain家族的Cry蛋白 | 第11-14页 |
1.2.2 Bin-like家族的Cry蛋白 | 第14-15页 |
1.2.3 Mtx-like家族的Cry蛋白 | 第15-16页 |
1.3 Cry毒素如何杀死宿主 | 第16-19页 |
1.4 Cyt蛋白 | 第19-20页 |
1.4.1 Cyt蛋白的结构 | 第19-20页 |
1.4.2 Cyt蛋白的活性机理 | 第20页 |
1.5 Parasporin蛋白 | 第20-24页 |
1.5.1 Parasporin-1 | 第21-22页 |
1.5.2 Parasporin-2 | 第22-23页 |
1.5.3 Parasporin-3 | 第23页 |
1.5.4 Parasporin-4 | 第23-24页 |
1.5.5 Parasporin-6 | 第24页 |
1.6 蛋白质晶体学原理 | 第24-27页 |
1.6.1 蛋白质结晶的方法 | 第25页 |
1.6.2 晶体筛选及优化 | 第25-26页 |
1.6.3 晶体X射线衍射数据的收集及结构解析方法 | 第26-27页 |
1.7 本研究的目的与意义 | 第27-29页 |
2 材料和方法 | 第29-38页 |
2.1 材料 | 第29-33页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第29页 |
2.1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
2.1.3 主要培养基及溶液 | 第30-32页 |
2.1.4 主要仪器 | 第32-33页 |
2.2 方法 | 第33-38页 |
2.2.1 种子液的培养 | 第33页 |
2.2.2 发酵培养 | 第33页 |
2.2.3 伴胞蛋白制备和纯化 | 第33-34页 |
2.2.4 蛋白浓度测定 | 第34页 |
2.2.5 重组蛋白的超速离心分析 | 第34-35页 |
2.2.6 重组蛋白晶体的培养 | 第35-37页 |
2.2.7 晶体冻存 | 第37页 |
2.2.8 重组蛋白晶体和重原子衍生物晶体数据收集及处理 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-51页 |
3.1 Cry51Aa1和Cry6Aa2蛋白的生物信息学分析 | 第38-40页 |
3.2 Cry51Aa1蛋白的表达以及可溶性蛋白的纯化 | 第40-42页 |
3.3 Cry6Aa2蛋白的表达和酶解蛋白的纯化 | 第42-45页 |
3.3.1 Cry6Aa2酶解条件优化 | 第42-44页 |
3.3.2 Cry6Aa2酶解蛋白纯化 | 第44-45页 |
3.4 蛋白浓度的测定 | 第45页 |
3.5 Cry51Aa1蛋白的超速离心分析 | 第45页 |
3.6 蛋白的晶体培养 | 第45-50页 |
3.6.1 Cry51Aa1蛋白晶体初筛和优化 | 第45-47页 |
3.6.2 Cry6Aa2蛋白晶体初筛和优化 | 第47-50页 |
3.6.3 Cry51Aa1蛋白重原子化合物晶体生长 | 第50页 |
3.7 Cry51Aa1蛋白晶体X射线衍射数据收集及处理 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-62页 |
附录 | 第62-64页 |
致谢 | 第64页 |