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苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白Cry51Aal和Cry6Aa2的晶体学研究

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
缩略语表第9-10页
1 前言第10-29页
    1.1 苏云金芽胞杆菌概述第10-11页
    1.2 Cry蛋白第11-16页
        1.2.1 Three-domain家族的Cry蛋白第11-14页
        1.2.2 Bin-like家族的Cry蛋白第14-15页
        1.2.3 Mtx-like家族的Cry蛋白第15-16页
    1.3 Cry毒素如何杀死宿主第16-19页
    1.4 Cyt蛋白第19-20页
        1.4.1 Cyt蛋白的结构第19-20页
        1.4.2 Cyt蛋白的活性机理第20页
    1.5 Parasporin蛋白第20-24页
        1.5.1 Parasporin-1第21-22页
        1.5.2 Parasporin-2第22-23页
        1.5.3 Parasporin-3第23页
        1.5.4 Parasporin-4第23-24页
        1.5.5 Parasporin-6第24页
    1.6 蛋白质晶体学原理第24-27页
        1.6.1 蛋白质结晶的方法第25页
        1.6.2 晶体筛选及优化第25-26页
        1.6.3 晶体X射线衍射数据的收集及结构解析方法第26-27页
    1.7 本研究的目的与意义第27-29页
2 材料和方法第29-38页
    2.1 材料第29-33页
        2.1.1 菌株与质粒第29页
        2.1.2 主要试剂第29-30页
        2.1.3 主要培养基及溶液第30-32页
        2.1.4 主要仪器第32-33页
    2.2 方法第33-38页
        2.2.1 种子液的培养第33页
        2.2.2 发酵培养第33页
        2.2.3 伴胞蛋白制备和纯化第33-34页
        2.2.4 蛋白浓度测定第34页
        2.2.5 重组蛋白的超速离心分析第34-35页
        2.2.6 重组蛋白晶体的培养第35-37页
        2.2.7 晶体冻存第37页
        2.2.8 重组蛋白晶体和重原子衍生物晶体数据收集及处理第37-38页
3 结果与分析第38-51页
    3.1 Cry51Aa1和Cry6Aa2蛋白的生物信息学分析第38-40页
    3.2 Cry51Aa1蛋白的表达以及可溶性蛋白的纯化第40-42页
    3.3 Cry6Aa2蛋白的表达和酶解蛋白的纯化第42-45页
        3.3.1 Cry6Aa2酶解条件优化第42-44页
        3.3.2 Cry6Aa2酶解蛋白纯化第44-45页
    3.4 蛋白浓度的测定第45页
    3.5 Cry51Aa1蛋白的超速离心分析第45页
    3.6 蛋白的晶体培养第45-50页
        3.6.1 Cry51Aa1蛋白晶体初筛和优化第45-47页
        3.6.2 Cry6Aa2蛋白晶体初筛和优化第47-50页
        3.6.3 Cry51Aa1蛋白重原子化合物晶体生长第50页
    3.7 Cry51Aa1蛋白晶体X射线衍射数据收集及处理第50-51页
4 讨论第51-53页
参考文献第53-62页
附录第62-64页
致谢第64页

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