| 致谢 | 第7-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 缩略词 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-25页 |
| 1 DNA修复途径概述 | 第15-20页 |
| 1.1 DNA双链断裂 | 第15页 |
| 1.2 两类DSBs修复途径 | 第15-16页 |
| 1.3 Ku蛋白与NHEJ途径 | 第16页 |
| 1.4 Ku对真菌基因打靶的意义 | 第16-20页 |
| 1.5 PdKu80研究的目的意义和主要研究内容 | 第20页 |
| 2 C-5甾醇去饱和酶概述 | 第20-25页 |
| 2.1 三种唑类药剂抗性机制 | 第20-21页 |
| 2.2 C-5甾醇去饱和酶研究进展 | 第21-24页 |
| 2.3 PdErg3研究的目的、意义和主要研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-43页 |
| 1 实验材料 | 第25-30页 |
| 1.1 供试材料 | 第25-28页 |
| 1.2 培养基 | 第28-29页 |
| 1.3 试剂 | 第29-30页 |
| 2 试验方法 | 第30-43页 |
| 2.1 菌种的保存与培养 | 第30页 |
| 2.2 质粒酶切与连接 | 第30-31页 |
| 2.3大肠杆菌感受态制备 | 第31-32页 |
| 2.4 大肠杆菌转化 | 第32页 |
| 2.5 质粒提取 | 第32-33页 |
| 2.6 农杆菌感受态制备 | 第33页 |
| 2.7 农杆菌电击转化 | 第33-34页 |
| 2.8 农杆菌介导T-DNA转化 | 第34-35页 |
| 2.9 小量基因组DNA提取 | 第35页 |
| 2.10 高浓度基因组DNA提取(试剂盒法) | 第35-36页 |
| 2.11 基因组Southern杂交分析 | 第36-40页 |
| 2.12 菌丝生长速率测定 | 第40页 |
| 2.13 产孢量测定 | 第40-41页 |
| 2.14 柑橘绿霉病菌致病性试验 | 第41页 |
| 2.15 麦角甾醇的提取 | 第41页 |
| 2.16 酵母回补 | 第41-43页 |
| 第三章 柑橘绿霉病菌高效基因敲除体系构建 | 第43-67页 |
| 1 引言 | 第43-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-66页 |
| 2.1 PdKu80基因的克隆与序列分析 | 第44-45页 |
| 2.2 PdKu80基因的敲除及验证 | 第45-48页 |
| 2.3 APdKu80与PdKH8的菌丝生长、产孢和致病性比较 | 第48-51页 |
| 2.4 PdBrlA、PdMpk、PdCna基因的克隆与序列分析 | 第51-56页 |
| 2.5 质粒pNEO1300载体的构建 | 第56页 |
| 2.6 PdBrlA、PdMpkA、PdCnaB基因的敲除与同源重组效率分析 | 第56-64页 |
| 2.7 ΔPdBrlA表型的简单分析 | 第64-66页 |
| 3 本章小结 | 第66-67页 |
| 第四章 柑橘绿霉病菌C-5甾醇去饱和酶基因功能研究 | 第67-83页 |
| 1 引言 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-82页 |
| 2.1 柑橘绿霉病菌麦角甾醇合成途径的预测 | 第67-70页 |
| 2.2 PdErg3基因的克隆与序列分析 | 第70-72页 |
| 2.3 PdErg3B酵母回补分析 | 第72-73页 |
| 2.4 PdErg3B基因敲除、回补及验证 | 第73-77页 |
| 2.5 ΔPdErg3B、ΔPdErg3B-CP与PdKH8菌丝生长、产孢比较 | 第77-78页 |
| 2.6 ΔPdErg3B甾醇含量分析 | 第78-79页 |
| 2.7 ΔPdErg3B、ΔPdErg3B-CP与PdKH8药剂敏感性测定 | 第79-82页 |
| 3 本章小结 | 第82-83页 |
| 第五章 全文总结及后续研究展望 | 第83-86页 |
| 1 全文总结 | 第83-84页 |
| 2 后续研究展望 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-91页 |
| 附录 | 第91-94页 |
| 个人简历及攻读硕士期间发表的学术论文 | 第94页 |
