| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-19页 |
| 1.1 苯乳酸简介 | 第10-12页 |
| 1.1.1 苯乳酸结构 | 第10页 |
| 1.1.2 苯乳酸的理化性质 | 第10页 |
| 1.1.3 苯乳酸的抑菌性质 | 第10-11页 |
| 1.1.4 苯乳酸的应用 | 第11-12页 |
| 1.2 苯乳酸的合成方法 | 第12-13页 |
| 1.2.1 化学合成方法 | 第12页 |
| 1.2.2 生物合成方法 | 第12-13页 |
| 1.3 苯乳酸合成涉及的酶类 | 第13-18页 |
| 1.3.1 还原酶 | 第13页 |
| 1.3.2 乳酸脱氢酶 | 第13-14页 |
| 1.3.3 转氨酶简介 | 第14-15页 |
| 1.3.4 天冬氨酸转氨酶研究现状 | 第15页 |
| 1.3.5 芳香族氨基酸转氨酶简介 | 第15-16页 |
| 1.3.6 芳香族氨基酸转氨酶研究现状 | 第16-18页 |
| 1.4 本课题研究背景及意义 | 第18页 |
| 1.5 研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 副干酪乳杆菌芳香族氨基酸转氨酶基因克隆与序列分析 | 第19-32页 |
| 2.1 前言 | 第19页 |
| 2.2 材料 | 第19-21页 |
| 2.2.1 菌种与质粒 | 第19页 |
| 2.2.2 酶及试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.3 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.2.4 培养基 | 第20-21页 |
| 2.2.5 主要溶液配制 | 第21页 |
| 2.3 方法 | 第21-25页 |
| 2.3.1 芳香族氨基酸转氨酶基因引物的设计 | 第21-22页 |
| 2.3.2 L. paracasei W2 基因组 DNA 的提取 | 第22页 |
| 2.3.3 芳香族氨基酸转氨酶基因的克隆 | 第22-25页 |
| 2.3.4 转氨酶序列分析 | 第25页 |
| 2.4 结果 | 第25-31页 |
| 2.4.1 芳香族氨基酸转氨酶基因的 PCR 扩增 | 第25-26页 |
| 2.4.2 重组克隆载体（pMD19 T-araT）的构建 | 第26-27页 |
| 2.4.3 生物信息学分析 | 第27-31页 |
| 2.5 小结及讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 副干酪乳杆菌芳香族氨基酸转氨酶在大肠杆菌中的表达 | 第32-46页 |
| 3.1 前言 | 第32页 |
| 3.2 材料 | 第32-34页 |
| 3.2.1 菌种与质粒 | 第32页 |
| 3.2.2 工具酶及试剂 | 第32-33页 |
| 3.2.3 主要仪器与设备 | 第33页 |
| 3.2.4 培养基 | 第33页 |
| 3.2.5 主要试剂配制 | 第33-34页 |
| 3.3 方法 | 第34-40页 |
| 3.3.1 原核表达载体的构建 | 第34-37页 |
| 3.3.2 表达产物的 SDS-PAGE 分析 | 第37-38页 |
| 3.3.3 酶活力的测定 | 第38-40页 |
| 3.4 结果 | 第40-45页 |
| 3.4.1 表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.4.2 重组转氨酶的诱导表达 | 第41页 |
| 3.4.3 转氨酶酶活测定 | 第41-42页 |
| 3.4.4 苯丙酮酸转化率的测定 | 第42-45页 |
| 3.5 小结及讨论 | 第45-46页 |
| 第四章 芳香族氨基酸转氨酶酶学性质研究 | 第46-56页 |
| 4.1 前言 | 第46页 |
| 4.2 材料 | 第46-47页 |
| 4.2.1 试剂 | 第46页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第46-47页 |
| 4.2.3 主要试剂配制 | 第47页 |
| 4.3 方法 | 第47-49页 |
| 4.3.1 转氨酶粗酶液的提取 | 第47页 |
| 4.3.2 转氨酶酶活测定方法 | 第47-48页 |
| 4.3.3 转氨酶的最适温度测定 | 第48页 |
| 4.3.4 转氨酶的最佳 pH 测定 | 第48页 |
| 4.3.5 转氨酶的热稳定性测定 | 第48页 |
| 4.3.6 转氨酶的 pH 稳定性测定 | 第48页 |
| 4.3.7 金属离子对转氨酶活性的影响 | 第48页 |
| 4.3.8 转氨酶的 Km 和 Vmax | 第48-49页 |
| 4.4 结果 | 第49-54页 |
| 4.4.1 温度对转氨酶酶活的影响 | 第49页 |
| 4.4.2 pH 对转氨酶的影响 | 第49-50页 |
| 4.4.3 转氨酶的热稳定性测定 | 第50-51页 |
| 4.4.4 转氨酶的 pH 稳定性测定 | 第51-52页 |
| 4.4.5 金属离子对转氨酶活力的影响 | 第52页 |
| 4.4.6 谷氨酸为底物的米氏常数 | 第52-53页 |
| 4.4.7 天冬氨酸为底物的米氏常数 | 第53-54页 |
| 4.5 小结及讨论 | 第54-56页 |
| 结论与展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
