| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-21页 |
| ·淀粉分解关键酶 | 第10-16页 |
| ·淀粉酶(amylase) | 第10-12页 |
| ·淀粉磷酸化酶(starch phosphorylase) | 第12-15页 |
| ·淀粉去分支酶(DBE) | 第15-16页 |
| ·酶活性动态变化对淀粉分解的作用 | 第16页 |
| ·基因定量研究方法 | 第16-18页 |
| ·DNA印迹技术 | 第16-17页 |
| ·转录水平上基因定量(mRNA丰度)分析的常规方法 | 第17-18页 |
| ·PCR扩增技术 | 第18页 |
| ·实时荧光定量PCR技术 | 第18-21页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的基本原理 | 第19页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的实验方法 | 第19-20页 |
| ·实时荧光定量PCR在植物研究中的应用 | 第20-21页 |
| ·酶活性的测定方法一DNS比色法 | 第21页 |
| 2 研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 3 实验方法 | 第22-33页 |
| ·材料与试剂 | 第22-23页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·材料处理 | 第23页 |
| ·酶活力测定方法 | 第23-27页 |
| ·淀粉酶粗酶液的制备 | 第23页 |
| ·总淀粉酶活性的测定方法 | 第23-24页 |
| ·麦芽糖标准曲线绘制 | 第24页 |
| ·酶蛋白标准曲线绘制 | 第24-25页 |
| ·淀粉酶酶活力的计算 | 第25页 |
| ·a-淀粉酶酶活力测定 | 第25页 |
| ·淀粉磷酸化酶粗酶液的制备 | 第25页 |
| ·淀粉磷酸化酶酶活力测定方法 | 第25-26页 |
| ·无机磷标准曲线绘制 | 第26页 |
| ·酶蛋白标准曲线的绘制 | 第26-27页 |
| ·淀粉磷酸化酶酶活力的计算 | 第27页 |
| ·去分支酶粗酶液的制备 | 第27页 |
| ·去分支酶活性测定方法 | 第27页 |
| ·去分支酶活力计算 | 第27页 |
| ·玉米籽粒中淀粉含量的测定方法 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR方法 | 第28-33页 |
| ·序列获取 | 第29页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·总RNA提取 | 第30页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第30页 |
| ·调试各引物的最佳退火温度 | 第30-31页 |
| ·Real-Time PCR检测淀粉分解酶基因在不同组织中的表达情况 | 第31-32页 |
| ·分析软件 | 第32-33页 |
| 4 结果 | 第33-46页 |
| ·四个骨干自交系种子萌发期淀粉酶活性变化 | 第33-34页 |
| ·四个骨干自交系种子萌发期中去分支酶的酶活性变化 | 第34页 |
| ·四个骨干自交系种子萌发期中淀粉磷酸化酶酶活性变化 | 第34-35页 |
| ·四种淀粉分解的酶在08-641萌发种子中的活性变化 | 第35-36页 |
| ·08-641授粉期后籽粒和叶片中的各个酶活性变化 | 第36-37页 |
| ·08-641授粉期后籽粒中淀粉合成量的时间变化 | 第37-38页 |
| ·RNA定量检测 | 第38页 |
| ·RNA完整性检测 | 第38-39页 |
| ·标准曲线的制作 | 第39-40页 |
| ·各淀粉分解酶基因的时空表达情况 | 第40-46页 |
| ·授粉后08-641籽粒中淀粉分解活性及其基因表达的相关分析 | 第46页 |
| 5 分析与讨论 | 第46-53页 |
| ·3,5-二硝基水杨酸法测定酶活性方法的特点 | 第46-47页 |
| ·RNA提取方法的改进 | 第47页 |
| ·玉米种子萌芽时期参与淀粉分解的酶的活力变化规律 | 第47-49页 |
| ·授粉后叶片和籽粒中参与淀粉分解的酶的活力变化规律 | 第49-50页 |
| ·淀粉分解酶基因的时空表达规律 | 第50-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
