目录 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
·植物钾营养吸收转运机制 | 第10-13页 |
·钾离子通道 | 第10-12页 |
·钾离子转运体 | 第12-13页 |
·CBL/CIPK研究现状 | 第13-18页 |
·CBLs/CIPKs蛋白复合体的结构特点 | 第14页 |
·CBLs和CIPKs组织表达特异性和亚细胞定位 | 第14-15页 |
·CBL/CIPK信号系统在植物应答胁迫逆境中的功能 | 第15-18页 |
·马铃薯基因工程研究进展 | 第18-20页 |
·抗病基因工程的研究 | 第19页 |
·抗非生物逆境基因工程的研究 | 第19-20页 |
·改良马铃薯品质的研究 | 第20页 |
·作为生物反应器的研究 | 第20页 |
·研究目的与意义 | 第20-22页 |
第二章 利用农杆菌介导法将AtCIPK23基因导入马铃薯中 | 第22-41页 |
·试验材料 | 第22页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株和质粒 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·培养基与培养条件 | 第22-25页 |
·MS基本培养基 | 第22-23页 |
·细菌培养基 | 第23页 |
·菌株及培养条件 | 第23-24页 |
·马铃薯组织培养用培养基 | 第24-25页 |
·试验方法 | 第25-27页 |
·农杆菌质粒的小量提取 | 第25-26页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第26页 |
·植物表达载体pBI121-AtCIPK23转化大肠杆菌 | 第26页 |
·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第26-27页 |
·植物材料的准备 | 第27页 |
·农杆菌介导法将AtCIPK23全长基因导入马铃薯 | 第27页 |
·农杆菌的培养 | 第27页 |
·侵染转化 | 第27页 |
·分化培养 | 第27页 |
·抗性芽生根 | 第27页 |
·抗性植株的鉴定 | 第27-29页 |
·植株基因组DNA的小量提取 | 第28页 |
·引物设计 | 第28页 |
·PCR检测 | 第28-29页 |
·阳性植株的Southern杂交分析 | 第29-34页 |
·阳性植株基因组DNA的大量提取 | 第29-30页 |
·目的片段的回收 | 第30页 |
·探针的标记 | 第30页 |
·探针标记效率检测 | 第30-31页 |
·酶切、电泳 | 第31-32页 |
·转膜 | 第32-33页 |
·杂交 | 第33页 |
·洗膜 | 第33页 |
·信号检测 | 第33-34页 |
·RT-PCR | 第34-35页 |
·RNA小量抽提 | 第34-35页 |
·DNA的去除 | 第35页 |
·反转录 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-41页 |
·表达载体导入农杆菌PCR检测结果 | 第35-36页 |
·AtCIPK23基因表达载体的鉴定 | 第36-37页 |
·转基因马铃薯的获得 | 第37页 |
·转基因植株的PCR鉴定 | 第37-38页 |
·Southern杂交 | 第38-39页 |
·转基因马铃薯中AtCIPK23基因表达分析 | 第39-41页 |
第三章 AtCIPK23基因在马铃薯中的表达 | 第41-46页 |
·实验材料 | 第41页 |
·主要仪器和药品 | 第41页 |
·实验方法 | 第41-42页 |
·植物材料的培养与处理 | 第41页 |
·植株生物量的测定 | 第41页 |
·植株钾含量的测定 | 第41-42页 |
·K~+吸收动力学参数测定 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-46页 |
·转基因马铃薯的表型比较 | 第42-43页 |
·转基因与非转基因马铃薯生物量的比较 | 第43-44页 |
·转基因与非转基因马铃薯含钾量的比较 | 第44页 |
·转基因与非转基因植株K~+吸收动力学参数的比较 | 第44-46页 |
第四章 结论与讨论 | 第46-50页 |
·马铃薯的遗传转化体系 | 第46页 |
·基因表达情况 | 第46-47页 |
·转基因马铃薯的性状鉴定 | 第47-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第58页 |