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农杆菌介导AtCIPK23基因转化马铃薯及其钾效率响应研究

目录第1-7页
中文摘要第7-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第9-10页
第一章 文献综述第10-22页
   ·植物钾营养吸收转运机制第10-13页
     ·钾离子通道第10-12页
     ·钾离子转运体第12-13页
   ·CBL/CIPK研究现状第13-18页
     ·CBLs/CIPKs蛋白复合体的结构特点第14页
     ·CBLs和CIPKs组织表达特异性和亚细胞定位第14-15页
     ·CBL/CIPK信号系统在植物应答胁迫逆境中的功能第15-18页
   ·马铃薯基因工程研究进展第18-20页
     ·抗病基因工程的研究第19页
     ·抗非生物逆境基因工程的研究第19-20页
     ·改良马铃薯品质的研究第20页
     ·作为生物反应器的研究第20页
   ·研究目的与意义第20-22页
第二章 利用农杆菌介导法将AtCIPK23基因导入马铃薯中第22-41页
   ·试验材料第22页
     ·植物材料第22页
     ·菌株和质粒第22页
     ·主要试剂第22页
   ·培养基与培养条件第22-25页
     ·MS基本培养基第22-23页
     ·细菌培养基第23页
     ·菌株及培养条件第23-24页
     ·马铃薯组织培养用培养基第24-25页
   ·试验方法第25-27页
     ·农杆菌质粒的小量提取第25-26页
     ·大肠杆菌感受态的制备第26页
     ·植物表达载体pBI121-AtCIPK23转化大肠杆菌第26页
     ·阳性克隆的筛选与鉴定第26-27页
   ·植物材料的准备第27页
   ·农杆菌介导法将AtCIPK23全长基因导入马铃薯第27页
     ·农杆菌的培养第27页
     ·侵染转化第27页
     ·分化培养第27页
     ·抗性芽生根第27页
   ·抗性植株的鉴定第27-29页
     ·植株基因组DNA的小量提取第28页
     ·引物设计第28页
     ·PCR检测第28-29页
   ·阳性植株的Southern杂交分析第29-34页
     ·阳性植株基因组DNA的大量提取第29-30页
     ·目的片段的回收第30页
     ·探针的标记第30页
     ·探针标记效率检测第30-31页
     ·酶切、电泳第31-32页
     ·转膜第32-33页
     ·杂交第33页
     ·洗膜第33页
     ·信号检测第33-34页
   ·RT-PCR第34-35页
     ·RNA小量抽提第34-35页
     ·DNA的去除第35页
     ·反转录第35页
   ·结果与分析第35-41页
     ·表达载体导入农杆菌PCR检测结果第35-36页
     ·AtCIPK23基因表达载体的鉴定第36-37页
     ·转基因马铃薯的获得第37页
     ·转基因植株的PCR鉴定第37-38页
     ·Southern杂交第38-39页
     ·转基因马铃薯中AtCIPK23基因表达分析第39-41页
第三章 AtCIPK23基因在马铃薯中的表达第41-46页
   ·实验材料第41页
     ·主要仪器和药品第41页
   ·实验方法第41-42页
     ·植物材料的培养与处理第41页
     ·植株生物量的测定第41页
     ·植株钾含量的测定第41-42页
     ·K~+吸收动力学参数测定第42页
   ·结果与分析第42-46页
     ·转基因马铃薯的表型比较第42-43页
     ·转基因与非转基因马铃薯生物量的比较第43-44页
     ·转基因与非转基因马铃薯含钾量的比较第44页
     ·转基因与非转基因植株K~+吸收动力学参数的比较第44-46页
第四章 结论与讨论第46-50页
   ·马铃薯的遗传转化体系第46页
   ·基因表达情况第46-47页
   ·转基因马铃薯的性状鉴定第47-50页
参考文献第50-57页
致谢第57-58页
攻读硕士期间发表的学术论文第58页

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