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副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的理化特性及其免疫原性研究

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
文献综述第11-26页
 1 病原学第11-15页
   ·Hps的特性第11-13页
   ·Hps的分型第13-15页
 2 流行病学第15-16页
 3 HPS的致病机理及病理变化第16-18页
 4 致病因子第18-23页
   ·毒力因子第18-22页
   ·毒力基因第22-23页
   ·生物被膜的形成第23页
 5 诊断与防治第23-25页
 6 研究目的及意义第25-26页
第一章 副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的纯化及理化特性研究第26-40页
 1 试验材料第26页
   ·试验菌株第26页
   ·主要试剂第26页
   ·主要仪器第26页
 2 试验方法第26-30页
   ·Hps的提取与纯化第26-29页
     ·Hps的复苏及培养第26页
     ·Hps神经氨酸酶的制备第26-27页
     ·Hps神经氨酸酶的纯化第27-28页
     ·Hps神经氨酸酶纯度鉴定第28-29页
     ·Hps神经氨酸酶的酶活力和蛋白质浓度测定第29页
   ·副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的理化特性研究第29-30页
     ·温度对神经氨酸酶的影响第29-30页
     ·pH值对神经氨酸酶的影响第30页
     ·酶抑制剂对神经氨酸酶的影响第30页
 3 试验结果第30-35页
   ·Hps的提取与纯化第30-34页
     ·Hps神经氨酸酶的制备第30页
     ·Hps神经氨酸酶硫酸铵盐析第30-31页
     ·Hps神经氨酸酶Q Sepharose FF阴离子交换层析第31-32页
     ·神经氨酸酶的纯度及分子量大小第32-33页
     ·Hps神经氨酸酶的酶活力和蛋白质浓度第33-34页
   ·Hps神经氨酸酶理化特性第34-35页
     ·温度对神经氨酸酶的影响第34页
     ·pH值对神经氨酸酶的影响第34-35页
     ·酶抑制剂对神经氨酸酶的影响第35页
 4 讨论第35-39页
   ·副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的分离纯化第35-37页
   ·副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的生物学特性第37-38页
   ·副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的酶学特性第38-39页
 5 小结第39-40页
第二章 副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的免疫原性研究第40-53页
 1 试验材料第40页
   ·试验动物与菌株第40页
   ·试验试剂第40页
   ·主要仪器第40页
 2 试验方法第40-44页
   ·western-blotting对神经氨酸酶的免疫原性分析第40-41页
   ·疫苗制备及小鼠免疫第41-42页
     ·疫苗制备第41页
     ·免疫小鼠第41-42页
   ·ELISA检测小鼠体内的抗体第42-43页
     ·最适抗原和血清浓度的确定第42页
     ·小鼠血清抗体的检测第42-43页
   ·MTT法检测小鼠脾淋巴细胞的增殖能力第43-44页
     ·小鼠脾淋巴细胞悬液的制备第43页
     ·淋巴细胞增殖反应第43-44页
   ·小鼠攻毒第44页
     ·半数致死量的确定第44页
     ·Hps对小鼠攻毒第44页
 3 试验结果第44-50页
   ·神经氨酸酶的western blotting第44-45页
   ·ELISA方法检测小鼠体的抗体水平第45-47页
     ·最适抗原包被浓度和最佳血清稀释倍数的确定第45-46页
     ·小鼠体内血清抗体水平的检测第46-47页
   ·MTT法测定小鼠脾淋巴细胞的增殖能力第47-48页
   ·交叉保护性第48-50页
     ·Hps半数致死量第48-49页
     ·保护性实验第49-50页
 4 讨论第50-51页
   ·神经氨酸的作用第50页
   ·ELISA测定抗体水平第50-51页
   ·MTT比色法测定淋巴细胞转化率第51页
   ·免疫保护性研究第51页
 5 小结第51-53页
结论第53-54页
参考文献第54-60页
致谢第60-61页
附录第61-62页

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