摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
文献综述 | 第11-26页 |
1 病原学 | 第11-15页 |
·Hps的特性 | 第11-13页 |
·Hps的分型 | 第13-15页 |
2 流行病学 | 第15-16页 |
3 HPS的致病机理及病理变化 | 第16-18页 |
4 致病因子 | 第18-23页 |
·毒力因子 | 第18-22页 |
·毒力基因 | 第22-23页 |
·生物被膜的形成 | 第23页 |
5 诊断与防治 | 第23-25页 |
6 研究目的及意义 | 第25-26页 |
第一章 副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的纯化及理化特性研究 | 第26-40页 |
1 试验材料 | 第26页 |
·试验菌株 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26页 |
2 试验方法 | 第26-30页 |
·Hps的提取与纯化 | 第26-29页 |
·Hps的复苏及培养 | 第26页 |
·Hps神经氨酸酶的制备 | 第26-27页 |
·Hps神经氨酸酶的纯化 | 第27-28页 |
·Hps神经氨酸酶纯度鉴定 | 第28-29页 |
·Hps神经氨酸酶的酶活力和蛋白质浓度测定 | 第29页 |
·副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的理化特性研究 | 第29-30页 |
·温度对神经氨酸酶的影响 | 第29-30页 |
·pH值对神经氨酸酶的影响 | 第30页 |
·酶抑制剂对神经氨酸酶的影响 | 第30页 |
3 试验结果 | 第30-35页 |
·Hps的提取与纯化 | 第30-34页 |
·Hps神经氨酸酶的制备 | 第30页 |
·Hps神经氨酸酶硫酸铵盐析 | 第30-31页 |
·Hps神经氨酸酶Q Sepharose FF阴离子交换层析 | 第31-32页 |
·神经氨酸酶的纯度及分子量大小 | 第32-33页 |
·Hps神经氨酸酶的酶活力和蛋白质浓度 | 第33-34页 |
·Hps神经氨酸酶理化特性 | 第34-35页 |
·温度对神经氨酸酶的影响 | 第34页 |
·pH值对神经氨酸酶的影响 | 第34-35页 |
·酶抑制剂对神经氨酸酶的影响 | 第35页 |
4 讨论 | 第35-39页 |
·副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的分离纯化 | 第35-37页 |
·副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的生物学特性 | 第37-38页 |
·副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的酶学特性 | 第38-39页 |
5 小结 | 第39-40页 |
第二章 副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的免疫原性研究 | 第40-53页 |
1 试验材料 | 第40页 |
·试验动物与菌株 | 第40页 |
·试验试剂 | 第40页 |
·主要仪器 | 第40页 |
2 试验方法 | 第40-44页 |
·western-blotting对神经氨酸酶的免疫原性分析 | 第40-41页 |
·疫苗制备及小鼠免疫 | 第41-42页 |
·疫苗制备 | 第41页 |
·免疫小鼠 | 第41-42页 |
·ELISA检测小鼠体内的抗体 | 第42-43页 |
·最适抗原和血清浓度的确定 | 第42页 |
·小鼠血清抗体的检测 | 第42-43页 |
·MTT法检测小鼠脾淋巴细胞的增殖能力 | 第43-44页 |
·小鼠脾淋巴细胞悬液的制备 | 第43页 |
·淋巴细胞增殖反应 | 第43-44页 |
·小鼠攻毒 | 第44页 |
·半数致死量的确定 | 第44页 |
·Hps对小鼠攻毒 | 第44页 |
3 试验结果 | 第44-50页 |
·神经氨酸酶的western blotting | 第44-45页 |
·ELISA方法检测小鼠体的抗体水平 | 第45-47页 |
·最适抗原包被浓度和最佳血清稀释倍数的确定 | 第45-46页 |
·小鼠体内血清抗体水平的检测 | 第46-47页 |
·MTT法测定小鼠脾淋巴细胞的增殖能力 | 第47-48页 |
·交叉保护性 | 第48-50页 |
·Hps半数致死量 | 第48-49页 |
·保护性实验 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-51页 |
·神经氨酸的作用 | 第50页 |
·ELISA测定抗体水平 | 第50-51页 |
·MTT比色法测定淋巴细胞转化率 | 第51页 |
·免疫保护性研究 | 第51页 |
5 小结 | 第51-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
附录 | 第61-62页 |