摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 基因组中的重复序列 | 第12-13页 |
1.1.1 重复序列的定义和分类 | 第12页 |
1.1.2 短链重复序列 | 第12-13页 |
1.2 短链重复序列的应用 | 第13-14页 |
1.2.1 短链重复序列用于基因标记和定位与遗传图谱的构建 | 第13-14页 |
1.2.2 短链重复序列用于遗传性疾病的预测诊断及器官移植 | 第14页 |
1.2.3 短链重复序列用于遗传亲权分析和品种鉴定 | 第14页 |
1.3 短链重复序列的变异 | 第14-18页 |
1.3.1 短链重复序列的动态突变与遗传性疾病 | 第15-16页 |
1.3.2 短链重复序列的变异与生物学功能 | 第16-17页 |
1.3.3 短链重复序列非正常扩展与生物起源和进化 | 第17页 |
1.3.4 短链重复序列非特异性扩展与生物检测 | 第17-18页 |
1.4 短链重复序列的结构与扩展机制 | 第18-20页 |
1.4.1 短链重复序列形成的结构 | 第18-20页 |
1.4.2 研究机理探讨 | 第20页 |
1.5 本研究的意义、主要内容和技术路线 | 第20-23页 |
1.5.1 研究意义 | 第20-21页 |
1.5.2 研究内容与技术路线 | 第21-23页 |
2 单链简单重复序列的恒温扩增特性和机理研究 | 第23-58页 |
2.1 引言 | 第23-24页 |
2.2 试剂及仪器 | 第24-26页 |
2.2.1 试剂 | 第24-25页 |
2.2.2 仪器 | 第25-26页 |
2.3 实验方法 | 第26-32页 |
2.3.1 单链简单重复序列的恒温扩增 | 第26页 |
2.3.2 单链简单重复序列扩增产物的电泳分析 | 第26-27页 |
2.3.2.1 非变性琼脂糖凝胶电泳检测扩展产物 | 第26-27页 |
2.3.2.2 碱性琼脂糖凝胶电泳检测扩展产物 | 第27页 |
2.3.3 恒温扩增产物的荧光定量 | 第27页 |
2.3.4 扩展产物酶切分析 | 第27-29页 |
2.3.5 扩展产物测序分析 | 第29-32页 |
2.4 结果与讨论 | 第32-56页 |
2.4.1 单链重复序列的电泳分析 | 第32-45页 |
2.4.1.1 短链在不同温度和时间下的产物电泳分析 | 第32-44页 |
2.4.1.2 碱性琼脂糖凝胶电泳检测扩展产物 | 第44-45页 |
2.4.2 短链重复序列在其他条件下的反应 | 第45-47页 |
2.4.2.1 短链在不同聚合酶下的恒温扩展 | 第45-46页 |
2.4.2.2 短链在不同浓度下的恒温扩增 | 第46页 |
2.4.2.3 短链在不同聚合酶浓度下的恒温扩增 | 第46-47页 |
2.4.3 荧光定量检测扩展产物 | 第47-50页 |
2.4.3.1 标准曲线的绘制 | 第47-48页 |
2.4.3.2 扩展产物荧光定量分析 | 第48-50页 |
2.4.4 扩展产物酶切分析 | 第50-51页 |
2.4.5 扩展产物的序列测定 | 第51-54页 |
2.4.6 讨论 | 第54-56页 |
2.5 本章小结 | 第56-58页 |
3 双链简单重复序列扩展特性 | 第58-75页 |
3.1 引言 | 第58页 |
3.2 试剂及仪器 | 第58-59页 |
3.2.1 试剂 | 第58页 |
3.2.2 仪器 | 第58-59页 |
3.3 实验方法 | 第59-61页 |
3.3.1 单链简单重复序列的恒温扩增 | 第59-60页 |
3.3.2 单链简单重复序列扩增产物的电泳分析 | 第60页 |
3.3.3 SYBR GreenⅠ荧光定量法分析反应产物 | 第60页 |
3.3.4 双链熔点测定 | 第60页 |
3.3.5 扩展产物酶切分析 | 第60-61页 |
3.4 实验结果及讨论 | 第61-74页 |
3.4.1 短链三核苷酸重复序列扩展反应的序列依存性 | 第61-64页 |
3.4.2 短链三核苷酸重复序列扩展反应的温度依存性 | 第64-68页 |
3.4.3 短链三核苷酸重复序列扩展反应的系统研究 | 第68-70页 |
3.4.4 限制性内切酶酶切分析扩展产物序列 | 第70-71页 |
3.4.5 讨论 | 第71-74页 |
3.5 本章小结 | 第74-75页 |
4 外源非重复序列对重复序列的抑制作用 | 第75-84页 |
4.1 引言 | 第75-76页 |
4.2 仪器及试剂 | 第76-77页 |
4.2.1 试剂 | 第76页 |
4.2.2 仪器 | 第76-77页 |
4.3 实验方法 | 第77-79页 |
4.3.1 重复序列对普通 PCR 扩增的影响 | 第77页 |
4.3.2 外源非重复序列片段的获得 | 第77-78页 |
4.3.2.1 酶切平末端和粘性末端 DNA 片段的获得 | 第77-78页 |
4.4.2.2 PCR 扩增获得 DNA 片段 | 第78页 |
4.3.3 外源 DNA 片段对重复序列非正常扩增的作用 | 第78-79页 |
4.4 实验结果 | 第79-83页 |
4.4.1 重复序列对普通 PCR 扩增的影响 | 第79页 |
4.4.2 PCR 单片断对重复序列扩增的影响 | 第79-80页 |
4.4.3 验证 PCR 扩增后纯化产物是否含抑制扩增因子 | 第80-81页 |
4.4.4 酶切断片的加入对重复序列扩增的影响 | 第81-82页 |
4.4.5 增大酶量对抑制的缓解作用 | 第82-83页 |
4.5 本章小结 | 第83-84页 |
5 论文结论 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-90页 |
附录 | 第90-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
个人简历 | 第96页 |
在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第96-97页 |