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三核苷酸短链重复序列扩展合成特性及其机理研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
1 前言第12-23页
    1.1 基因组中的重复序列第12-13页
        1.1.1 重复序列的定义和分类第12页
        1.1.2 短链重复序列第12-13页
    1.2 短链重复序列的应用第13-14页
        1.2.1 短链重复序列用于基因标记和定位与遗传图谱的构建第13-14页
        1.2.2 短链重复序列用于遗传性疾病的预测诊断及器官移植第14页
        1.2.3 短链重复序列用于遗传亲权分析和品种鉴定第14页
    1.3 短链重复序列的变异第14-18页
        1.3.1 短链重复序列的动态突变与遗传性疾病第15-16页
        1.3.2 短链重复序列的变异与生物学功能第16-17页
        1.3.3 短链重复序列非正常扩展与生物起源和进化第17页
        1.3.4 短链重复序列非特异性扩展与生物检测第17-18页
    1.4 短链重复序列的结构与扩展机制第18-20页
        1.4.1 短链重复序列形成的结构第18-20页
        1.4.2 研究机理探讨第20页
    1.5 本研究的意义、主要内容和技术路线第20-23页
        1.5.1 研究意义第20-21页
        1.5.2 研究内容与技术路线第21-23页
2 单链简单重复序列的恒温扩增特性和机理研究第23-58页
    2.1 引言第23-24页
    2.2 试剂及仪器第24-26页
        2.2.1 试剂第24-25页
        2.2.2 仪器第25-26页
    2.3 实验方法第26-32页
        2.3.1 单链简单重复序列的恒温扩增第26页
        2.3.2 单链简单重复序列扩增产物的电泳分析第26-27页
            2.3.2.1 非变性琼脂糖凝胶电泳检测扩展产物第26-27页
            2.3.2.2 碱性琼脂糖凝胶电泳检测扩展产物第27页
        2.3.3 恒温扩增产物的荧光定量第27页
        2.3.4 扩展产物酶切分析第27-29页
        2.3.5 扩展产物测序分析第29-32页
    2.4 结果与讨论第32-56页
        2.4.1 单链重复序列的电泳分析第32-45页
            2.4.1.1 短链在不同温度和时间下的产物电泳分析第32-44页
            2.4.1.2 碱性琼脂糖凝胶电泳检测扩展产物第44-45页
        2.4.2 短链重复序列在其他条件下的反应第45-47页
            2.4.2.1 短链在不同聚合酶下的恒温扩展第45-46页
            2.4.2.2 短链在不同浓度下的恒温扩增第46页
            2.4.2.3 短链在不同聚合酶浓度下的恒温扩增第46-47页
        2.4.3 荧光定量检测扩展产物第47-50页
            2.4.3.1 标准曲线的绘制第47-48页
            2.4.3.2 扩展产物荧光定量分析第48-50页
        2.4.4 扩展产物酶切分析第50-51页
        2.4.5 扩展产物的序列测定第51-54页
        2.4.6 讨论第54-56页
    2.5 本章小结第56-58页
3 双链简单重复序列扩展特性第58-75页
    3.1 引言第58页
    3.2 试剂及仪器第58-59页
        3.2.1 试剂第58页
        3.2.2 仪器第58-59页
    3.3 实验方法第59-61页
        3.3.1 单链简单重复序列的恒温扩增第59-60页
        3.3.2 单链简单重复序列扩增产物的电泳分析第60页
        3.3.3 SYBR GreenⅠ荧光定量法分析反应产物第60页
        3.3.4 双链熔点测定第60页
        3.3.5 扩展产物酶切分析第60-61页
    3.4 实验结果及讨论第61-74页
        3.4.1 短链三核苷酸重复序列扩展反应的序列依存性第61-64页
        3.4.2 短链三核苷酸重复序列扩展反应的温度依存性第64-68页
        3.4.3 短链三核苷酸重复序列扩展反应的系统研究第68-70页
        3.4.4 限制性内切酶酶切分析扩展产物序列第70-71页
        3.4.5 讨论第71-74页
    3.5 本章小结第74-75页
4 外源非重复序列对重复序列的抑制作用第75-84页
    4.1 引言第75-76页
    4.2 仪器及试剂第76-77页
        4.2.1 试剂第76页
        4.2.2 仪器第76-77页
    4.3 实验方法第77-79页
        4.3.1 重复序列对普通 PCR 扩增的影响第77页
        4.3.2 外源非重复序列片段的获得第77-78页
            4.3.2.1 酶切平末端和粘性末端 DNA 片段的获得第77-78页
            4.4.2.2 PCR 扩增获得 DNA 片段第78页
        4.3.3 外源 DNA 片段对重复序列非正常扩增的作用第78-79页
    4.4 实验结果第79-83页
        4.4.1 重复序列对普通 PCR 扩增的影响第79页
        4.4.2 PCR 单片断对重复序列扩增的影响第79-80页
        4.4.3 验证 PCR 扩增后纯化产物是否含抑制扩增因子第80-81页
        4.4.4 酶切断片的加入对重复序列扩增的影响第81-82页
        4.4.5 增大酶量对抑制的缓解作用第82-83页
    4.5 本章小结第83-84页
5 论文结论第84-85页
参考文献第85-90页
附录第90-95页
致谢第95-96页
个人简历第96页
在学期间发表的学术论文与研究成果第96-97页

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