| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 丙型肝炎病毒概述 | 第9-12页 |
| 1.1.1 丙型肝炎病毒 | 第9-10页 |
| 1.1.2 丙型肝炎流行现状 | 第10页 |
| 1.1.3 针对病毒生活周期的抗HCV新药物研发进展 | 第10-12页 |
| 1.2 新城疫病毒概述 | 第12-13页 |
| 1.3 高迁移率族蛋白 1 概述 | 第13-15页 |
| 1.3.1 高迁移率族蛋白 1 的结构和基本功能 | 第13-14页 |
| 1.3.2 高迁移率族蛋白 1 与病毒感染 | 第14-15页 |
| 1.4 课题研究目的及方案 | 第15-17页 |
| 第2章 沉默HMGB1 降低病毒在肝细胞中的复制 | 第17-30页 |
| 2.1 前言 | 第17页 |
| 2.2 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-25页 |
| 2.3.1 特异性HMGB1-siRNA的制备 | 第18-20页 |
| 2.3.2 特异性HMGB1-shRNA的制备 | 第20-22页 |
| 2.3.3 转染siRNA、shRNA及其它质粒（Lipofectamine 2000） | 第22页 |
| 2.3.4 HMGB1 沉默细胞系的建立 | 第22-23页 |
| 2.3.5 体外转录HCV RNA（Ambion试剂盒） | 第23-24页 |
| 2.3.6 电击转化HCV RNA | 第24页 |
| 2.3.7 细胞总RNA的提取（TRIzol法） | 第24页 |
| 2.3.8 逆转录PCR（Invitrogen试剂盒） | 第24-25页 |
| 2.3.9 荧光定量PCR （SYBR Green法） | 第25页 |
| 2.4 实验结果 | 第25-29页 |
| 2.4.1 特异性HMGB1-siRNA沉默效果鉴定 | 第25-26页 |
| 2.4.2 基于shRNA的HMGB1 沉默细胞系的建立 | 第26-27页 |
| 2.4.3 病毒在HMGB1 沉默细胞系中的复制水平降低 | 第27-29页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第29-30页 |
| 第3章 HLCZ01 细胞中HMGB1 对HCV的影响 | 第30-39页 |
| 3.1 前言 | 第30页 |
| 3.2 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31-33页 |
| 3.3.1 HCV绝对定量PCR | 第31页 |
| 3.3.2 免疫荧光检测HMGB1 和HCV | 第31-32页 |
| 3.3.3 HMGB1 过表达载体质粒的制备 | 第32-33页 |
| 3.4 实验结果 | 第33-38页 |
| 3.4.1 HCV在HLCZ01 沉默细胞系中的复制水平降低 | 第33-35页 |
| 3.4.2 瞬时沉默HMGB1 抑制HCV在HLCZ01 中的复制 | 第35-36页 |
| 3.4.3 过表达HMGB1 促进HCV在HLCZ01 中的复制 | 第36-38页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第38-39页 |
| 第4章 肝细胞中HMGB1 促进HCV复制的作用机制 | 第39-47页 |
| 4.1 前言 | 第39页 |
| 4.2 实验材料 | 第39-40页 |
| 4.3 实验方法 | 第40-44页 |
| 4.3.1 免疫共沉淀 | 第40-41页 |
| 4.3.2 蛋白免疫印迹（Western Blotting） | 第41-42页 |
| 4.3.3 RNA结合蛋白免疫共沉淀（RIP） | 第42-44页 |
| 4.4 实验结果 | 第44-46页 |
| 4.4.1 HCV诱导HMGB1 从胞核转移至胞质 | 第44页 |
| 4.4.2 HMGB1 不结合HCV的core、NS2 和NS5A蛋白 | 第44页 |
| 4.4.3 HMGB1 结合HCV负链RNA | 第44-46页 |
| 4.5 小与结讨论 | 第46-47页 |
| 结论与展望 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录 攻读硕士学位期间参与发表论文和专利 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
