| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-28页 |
| 1 骨髓间充质干细胞的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.1 骨髓间充质干细胞的分离、培养和鉴定 | 第13-14页 |
| 1.2 骨髓间充质干细胞的多向分化潜能 | 第14-15页 |
| 1.3 骨髓间充质干细胞的临床应用前景和挑战 | 第15-16页 |
| 2 影响干细胞分化为肝样细胞的因素 | 第16-23页 |
| 2.1 通过细胞因子作用获得肝样细胞 | 第17-18页 |
| 2.2 通过化合物诱导获得肝样细胞 | 第18页 |
| 2.3 通过基因修饰诱导获得肝样细胞 | 第18-19页 |
| 2.4 通过细胞共培养诱导获得肝样细胞 | 第19-20页 |
| 2.5 其它诱导获得肝样细胞方法 | 第20-22页 |
| 2.6 诱导后细胞的鉴定及检测 | 第22页 |
| 2.7 从成体干细胞、胚胎干细胞和诱导性多能干细胞获得的肝样细胞性质比较 | 第22-23页 |
| 2.8 问题和展望 | 第23页 |
| 3 HNF1A和FOXA2功能及其作用 | 第23-27页 |
| 3.1 HNF1A的结构和功能 | 第23-25页 |
| 3.2 FOXA2的结构和功能 | 第25-27页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 4.1 研究目的 | 第27页 |
| 4.2 研究意义 | 第27-28页 |
| 第二部分 材料和方法 | 第28-49页 |
| 1 实验材料 | 第28-32页 |
| 1.1 实验动物、细胞及质粒 | 第28页 |
| 1.2 主要试剂及溶液配制 | 第28-31页 |
| 1.3 实验室仪器设备 | 第31页 |
| 1.4 主要耗材 | 第31-32页 |
| 2 试验方法 | 第32-49页 |
| 2.1 构建两种重组慢病毒载体 | 第32-33页 |
| 2.2 骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定和冻存 | 第33-34页 |
| 2.3 鼠尾胶原的制备及使用 | 第34-35页 |
| 2.4 细胞的复苏与培养 | 第35-36页 |
| 2.5 目的基因慢病毒的包装及检测 | 第36-39页 |
| 2.6 骨髓间充质干细胞的侵染和诱导 | 第39-41页 |
| 2.7 诱导后细胞的检测 | 第41-49页 |
| 第三部分 结果和讨论 | 第49-66页 |
| 1 两种重组慢病毒载体构建结果 | 第49-50页 |
| 2 骨髓间充质干细胞分离培养及鉴定结果 | 第50-52页 |
| 2.1 骨髓间充质干细胞的分离与培养结果 | 第50-51页 |
| 2.2 骨髓间充质干细胞的鉴定结果 | 第51-52页 |
| 3 两种重组慢病毒的制备结果 | 第52-53页 |
| 4 制备的重组慢病毒滴度检测结果 | 第53-54页 |
| 5 慢病毒侵染BMSCS及其形态变化 | 第54-57页 |
| 6 诱导细胞基因和蛋白表达变化 | 第57-60页 |
| 6.1 诱导细胞的基因表达变化 | 第57-58页 |
| 6.2 诱导细胞的蛋白表达变化 | 第58-60页 |
| 7 诱导细胞功能检测结果 | 第60-62页 |
| 7.1 糖原PAS染色结果 | 第60页 |
| 7.2 ICG摄入检测结果 | 第60-61页 |
| 7.3 油红O脂肪染色结果 | 第61-62页 |
| 8 小结 | 第62页 |
| 9 讨论 | 第62-66页 |
| 结论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表的论文 | 第80-81页 |