摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 前言 | 第8-14页 |
1 神经干细胞 | 第8-9页 |
1.1 神经干细胞简介 | 第8页 |
1.2 神经干细胞在多发性硬化症方面的作用 | 第8-9页 |
2 长链非编码RNA简介 | 第9-12页 |
2.1 长链非编码RNA的功能介绍 | 第10-11页 |
2.1.1 LncRNAs在基因转录水平的调控作用 | 第10-11页 |
2.1.2 LncRNAs在基因转录后水平的调控作用 | 第11页 |
2.2 长链非编码RNA与人类疾病 | 第11-12页 |
2.2.1 LncRNAs与肿瘤 | 第11页 |
2.2.2 LncRNAs与神经退行性疾病和精神疾病 | 第11-12页 |
2.2.3 LncRNAs与代谢性疾病 | 第12页 |
3 RNA sequencing(RNA-Seq) | 第12-13页 |
4 本论文研究意义 | 第13-14页 |
第二章 实验设备与试剂耗材 | 第14-17页 |
1 实验设备 | 第14-15页 |
2 试剂耗材 | 第15-16页 |
3 实验抗体信息 | 第16页 |
4 引物信息 | 第16-17页 |
第三章 实验方法 | 第17-32页 |
1 Lnc784引物设计 | 第17-19页 |
1.1 Lnc784片段序列信息 | 第17页 |
1.2 Lnc784引物设计 | 第17-19页 |
1.2.1 引物序列信息 | 第17-18页 |
1.2.2 PCR验证引物设计是否合理 | 第18-19页 |
2 神经前体细胞(neural progenitor cells,NPC)原代培养 | 第19-21页 |
2.1 小鼠全脑NPC原代培养 | 第20页 |
2.2 悬浮培养NPC传代 | 第20-21页 |
2.3 贴壁培养NPC传代 | 第21页 |
3 免疫荧光染色 | 第21-22页 |
3.1 免疫染色方法 | 第21-22页 |
4 SiRNA瞬转 293FT细胞 | 第22-25页 |
4.1 SiRNA信息 | 第22-23页 |
4.2 293FT细胞培养 | 第23-24页 |
4.2.1 细胞复苏 | 第24页 |
4.2.2 细胞传代 | 第24页 |
4.3 质粒瞬转 293FT细胞 | 第24-25页 |
5 病毒转染神经前体细胞 | 第25-26页 |
5.1 感染方法 | 第25-26页 |
6 qPCR检测基因表达差异性 | 第26-28页 |
6.1 细胞RNA的提取 | 第26-27页 |
6.2 1st-Strand cDNA合成 | 第27页 |
6.3 RNA快速逆转合成cDNA | 第27-28页 |
7 Western Blot鉴定蛋白表达量的变化 | 第28-32页 |
7.1 蛋白质的裂解 | 第29页 |
7.2 BCA蛋白定量 | 第29-30页 |
7.3 Western Blot实验方法 | 第30-32页 |
第四章 实验结果 | 第32-54页 |
1 Lnc784和TCF7l2在小鼠与人之间同源性比较 | 第32-33页 |
1.1 Lnc784扩增结果 | 第32-33页 |
2 Lnc784与TCF7l2在小鼠脑部各组织中表达差异性检测 | 第33-36页 |
3 NPC鉴定结果 | 第36-38页 |
3.1 NPC正常生长状态 | 第37页 |
3.2 Nestin和SOX1免疫染色结果 | 第37-38页 |
3.3 神经前体细胞自发分化免疫染色结果 | 第38页 |
3.3.1 神经元细胞免疫染色结果 | 第38页 |
3.3.2 星形胶质细胞免疫染色结果 | 第38页 |
3.3.3 少突胶质细胞免疫染色结果 | 第38页 |
4 SiRNA瞬转 293FT细胞 | 第38-41页 |
4.1 SiRNA转染 293FT细胞效率 | 第39页 |
4.2 瞬时转染后qPCR检测Lnc784敲低效率 | 第39-41页 |
5 病毒转染NPC结果 | 第41-46页 |
5.1 病毒转染预实验结果 | 第41-43页 |
5.2 正式感染实验结果 | 第43页 |
5.3 qPCR检测Lnc784表达量的变化对TCF7l2表达的影响 | 第43-45页 |
5.4 Western Blot检测Lnc784对TCF7l2蛋白表达调控作用 | 第45-46页 |
6 RNA-Seq结果 | 第46-54页 |
第五章 讨论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |