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Lnc784对TCF712表达调控作用的研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
第一章 前言第8-14页
    1 神经干细胞第8-9页
        1.1 神经干细胞简介第8页
        1.2 神经干细胞在多发性硬化症方面的作用第8-9页
    2 长链非编码RNA简介第9-12页
        2.1 长链非编码RNA的功能介绍第10-11页
            2.1.1 LncRNAs在基因转录水平的调控作用第10-11页
            2.1.2 LncRNAs在基因转录后水平的调控作用第11页
        2.2 长链非编码RNA与人类疾病第11-12页
            2.2.1 LncRNAs与肿瘤第11页
            2.2.2 LncRNAs与神经退行性疾病和精神疾病第11-12页
            2.2.3 LncRNAs与代谢性疾病第12页
    3 RNA sequencing(RNA-Seq)第12-13页
    4 本论文研究意义第13-14页
第二章 实验设备与试剂耗材第14-17页
    1 实验设备第14-15页
    2 试剂耗材第15-16页
    3 实验抗体信息第16页
    4 引物信息第16-17页
第三章 实验方法第17-32页
    1 Lnc784引物设计第17-19页
        1.1 Lnc784片段序列信息第17页
        1.2 Lnc784引物设计第17-19页
            1.2.1 引物序列信息第17-18页
            1.2.2 PCR验证引物设计是否合理第18-19页
    2 神经前体细胞(neural progenitor cells,NPC)原代培养第19-21页
        2.1 小鼠全脑NPC原代培养第20页
        2.2 悬浮培养NPC传代第20-21页
        2.3 贴壁培养NPC传代第21页
    3 免疫荧光染色第21-22页
        3.1 免疫染色方法第21-22页
    4 SiRNA瞬转 293FT细胞第22-25页
        4.1 SiRNA信息第22-23页
        4.2 293FT细胞培养第23-24页
            4.2.1 细胞复苏第24页
            4.2.2 细胞传代第24页
        4.3 质粒瞬转 293FT细胞第24-25页
    5 病毒转染神经前体细胞第25-26页
        5.1 感染方法第25-26页
    6 qPCR检测基因表达差异性第26-28页
        6.1 细胞RNA的提取第26-27页
        6.2 1st-Strand cDNA合成第27页
        6.3 RNA快速逆转合成cDNA第27-28页
    7 Western Blot鉴定蛋白表达量的变化第28-32页
        7.1 蛋白质的裂解第29页
        7.2 BCA蛋白定量第29-30页
        7.3 Western Blot实验方法第30-32页
第四章 实验结果第32-54页
    1 Lnc784和TCF7l2在小鼠与人之间同源性比较第32-33页
        1.1 Lnc784扩增结果第32-33页
    2 Lnc784与TCF7l2在小鼠脑部各组织中表达差异性检测第33-36页
    3 NPC鉴定结果第36-38页
        3.1 NPC正常生长状态第37页
        3.2 Nestin和SOX1免疫染色结果第37-38页
        3.3 神经前体细胞自发分化免疫染色结果第38页
            3.3.1 神经元细胞免疫染色结果第38页
            3.3.2 星形胶质细胞免疫染色结果第38页
            3.3.3 少突胶质细胞免疫染色结果第38页
    4 SiRNA瞬转 293FT细胞第38-41页
        4.1 SiRNA转染 293FT细胞效率第39页
        4.2 瞬时转染后qPCR检测Lnc784敲低效率第39-41页
    5 病毒转染NPC结果第41-46页
        5.1 病毒转染预实验结果第41-43页
        5.2 正式感染实验结果第43页
        5.3 qPCR检测Lnc784表达量的变化对TCF7l2表达的影响第43-45页
        5.4 Western Blot检测Lnc784对TCF7l2蛋白表达调控作用第45-46页
    6 RNA-Seq结果第46-54页
第五章 讨论第54-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-62页

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