| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 姜黄的主要化学成分及其药理作用 | 第11-13页 |
| 1.2 姜黄素生物合成途径研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3 4CL基因研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3.1 4CL基因家族的研究 | 第15页 |
| 1.3.2 4CL基因组织表达特异性研究 | 第15-16页 |
| 1.3.3 4CL基因胁迫条件下的表达模式研究 | 第16-17页 |
| 1.4 CURS基因的研究 | 第17-18页 |
| 1.5 主要技术原理 | 第18-20页 |
| 1.5.1 cDNA末端快速扩增法 | 第18-19页 |
| 1.5.2 实时荧光定量RT-PCR技术 | 第19-20页 |
| 1.6 本实验的研究目的和技术路线 | 第20-23页 |
| 第2章 姜黄 4CL基因的克隆与功能分析 | 第23-61页 |
| 2.1 实验材料与设计 | 第23-25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23-24页 |
| 2.1.2 实验设计 | 第24页 |
| 2.1.3 实验药品和仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-38页 |
| 2.2.1 RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.2 姜黄RNA的纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第27页 |
| 2.2.4 4CL基因保守区片段的扩增和检测 | 第27-28页 |
| 2.2.5 4CL保守区目的基因片段回收 | 第28-29页 |
| 2.2.6 4CL基因保守区片段重组入质粒载体 | 第29-30页 |
| 2.2.7 阳性克隆的筛选 | 第30-31页 |
| 2.2.8 基因序列测定及结果分析 | 第31页 |
| 2.2.9 4CL基因 3’端获得 | 第31-33页 |
| 2.2.10 4CL基因 5’端获得 | 第33-37页 |
| 2.2.11 4CL基因的生物信息学分析 | 第37页 |
| 2.2.12 4CL基因不同组织部位表达模式分析 | 第37-38页 |
| 2.2.13 4CL基因在NaCl胁迫、SNP作用下表达模式分析 | 第38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-58页 |
| 2.3.1 姜黄 4CL基因的克隆 | 第38-44页 |
| 2.3.1.1 姜黄 4CL基因保守区的克隆 | 第38-41页 |
| 2.3.1.2 姜黄 4CL基因 3’端的克隆 | 第41-42页 |
| 2.3.1.3 姜黄 4CL基因 5’端的克隆 | 第42-44页 |
| 2.3.2 姜黄 4CL基因的生物信息学分析 | 第44-52页 |
| 2.3.2.1 4CL蛋白的结构特征 | 第44页 |
| 2.3.2.2 4CL蛋白的理化性质 | 第44-47页 |
| 2.3.2.3 4CL蛋白的空间结构预测 | 第47-49页 |
| 2.3.2.4 4CL蛋白的多重序列比对与进化树分析 | 第49-52页 |
| 2.3.3 姜黄 4CL基因表达模式分析 | 第52-58页 |
| 2.3.3.1 不同组织部位 4CL基因表达模式 | 第52-55页 |
| 2.3.3.2 姜黄 4CL基因在NaCl胁迫下的表达模式分析 | 第55-57页 |
| 2.3.3.3 姜黄 4CL基因在SNP作用下的表达模式分析 | 第57-58页 |
| 2.4 讨论 | 第58-61页 |
| 第3章 姜黄CURS基因的克隆与功能分析 | 第61-85页 |
| 3.1 实验材料与设计 | 第61-62页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第61页 |
| 3.1.2 实验设计 | 第61页 |
| 3.1.3 实验药品和仪器 | 第61-62页 |
| 3.2 方法 | 第62-68页 |
| 3.2.1 RNA的提取 | 第62页 |
| 3.2.2 姜黄RNA的纯化 | 第62页 |
| 3.2.3 cDNA第一链的合成 | 第62页 |
| 3.2.4 CURS基因CDS区的克隆 | 第62-63页 |
| 3.2.5 CURS基因CDS区片序列的获得 | 第63-64页 |
| 3.2.6 CURS基因CDS区的生物信息学分析 | 第64页 |
| 3.2.7 CURS基因不同组织部位表达模式分析 | 第64页 |
| 3.2.8 CURS基因在NaCl胁迫、SNP作用下的表达模式分析 | 第64页 |
| 3.2.9 CURS基因转烟草 | 第64-68页 |
| 3.2.9.1 CURS基因的CDS区的获得 | 第64-65页 |
| 3.2.9.2 PCR产物和PRI101-AN双酶切及连接 | 第65-66页 |
| 3.2.9.3 菌落PCR | 第66-67页 |
| 3.2.9.4 酶切鉴定 | 第67页 |
| 3.2.9.5 农杆菌转化 | 第67页 |
| 3.2.9.6 农杆菌侵染烟草 | 第67-68页 |
| 3.3 结果与分析 | 第68-84页 |
| 3.3.1 CURS基因的CDS区的获得 | 第68-70页 |
| 3.3.2 姜黄CURS基因CDS区的生物信息学分析 | 第70-75页 |
| 3.3.2.1 CURS蛋白的结构特征 | 第70页 |
| 3.3.2.2 CURS蛋白的理化性质 | 第70-74页 |
| 3.3.2.3 CURS蛋白的空间结构预测 | 第74-75页 |
| 3.3.3 姜黄CURS基因表达模式分析 | 第75-79页 |
| 3.3.3.1 姜黄CURS基因不同组织部位表达模式 | 第75-77页 |
| 3.3.3.2 NaCl胁迫下CURS基因表达模式分析 | 第77-78页 |
| 3.3.3.3 SNP作用下CURS基因表达模式分析 | 第78-79页 |
| 3.3.4 CURS基因转烟草 | 第79-84页 |
| 3.3.4.1 CURS基因CDS区的克隆 | 第79-80页 |
| 3.3.4.2 目的片段的双酶切及载体连接 | 第80-82页 |
| 3.3.4.3 植物表达载体转化GV3101农杆菌 | 第82-84页 |
| 3.3.4.4 农杆菌侵染烟草叶盘 | 第84页 |
| 3.4 讨论 | 第84-85页 |
| 第4章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 4.1 主要的研究结论 | 第85-86页 |
| 4.2 展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 个人简历、在校期间发表的学术论文和研究成果 | 第94-95页 |
