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中华绒螯蟹组蛋白基因的克隆及其在精子发生中的变化特征

摘要第5-7页
英文摘要第7-8页
第1章 绪论第12-23页
    1.1 精子发生及与其相关的核碱性蛋白第12-17页
        1.1.1 精子发生第12-13页
        1.1.2 十足目甲壳动物的精子发生第13页
        1.1.3 精子核碱性蛋白及其在精子发生中的替代第13-17页
        1.1.4 精子核碱性蛋白的修饰在精子核形成中的作用第17页
    1.2 十足目非浓缩核的精子核及其碱性蛋白第17-19页
    1.3 中华绒螯蟹的雄性生殖系统第19-22页
    1.4 研究目的及意义第22-23页
第2章 实验材料和方法第23-36页
    2.1 实验材料第23页
    2.2 主要实验仪器第23-24页
    2.3 主要实验药品及配方第24-27页
    2.4 试验技术第27-36页
        2.4.1 RNA提取及反转录反应第27-28页
        2.4.2 基因组DNA的提取第28页
        2.4.3 RNA的反转录第28-29页
        2.4.4 常规PCR反应第29页
        2.4.5 目的片段的回收第29-30页
        2.4.6 TA克隆及测序第30页
        2.4.7菌种的保存第30页
        2.4.8 质粒的提取第30-31页
        2.4.9 目的基因与表达载体p ET-30a的连接第31页
        2.4.10目的基因的表达第31页
        2.4.11镍柱纯化融合蛋白第31-32页
        2.4.12多克隆抗体的制备第32页
        2.4.13 Western blot检测抗体第32-33页
        2.4.14石蜡切片第33页
        2.4.15免疫荧光第33-34页
        2.4.16免疫电镜第34-36页
第3章 中华绒螯蟹组蛋白H2B、H2A、H3和H4的基因克隆、原核表达及抗体制备25第36-73页
    3.1 组蛋白H2B的基因克隆,原核表达及抗体制备第36-45页
        3.1.1 方法与步骤第36-37页
        3.1.2 实验结果第37-45页
    3.2 组蛋白H2A的基因克隆,原核表达及抗体制备第45-53页
        3.2.1 方法与步骤第45-46页
        3.2.2 实验结果第46-53页
    3.3 组蛋白H3的基因克隆及原核表达第53-60页
        3.3.1 方法与步骤第53-54页
        3.3.2 实验结果第54-60页
    3.4 组蛋白H4的基因的克隆及原核表达第60-67页
        3.4.1 方法与步骤第60-61页
        3.4.2 实验结果第61-67页
    3.5 讨论第67-73页
        3.5.1 组蛋白基因的克隆第67-68页
        3.5.2 原核表达载体的构建第68-70页
        3.5.3 重组蛋白的表达第70页
        3.5.4 重组蛋白的纯化第70-71页
        3.5.5 多克隆抗体的制备第71页
        3.5.6 Western blot分析第71-73页
第4章 中华绒螯蟹四种组蛋白H2B、H2A、H3和H4在精子发生中的变化第73-96页
    4.1 精巢的组织切片第73-77页
        4.1.1 方法与步骤第73页
        4.1.2 实验结果第73-77页
    4.2 组蛋白H3和H4在精子发生中的变化特征第77-88页
        4.2.1 方法与步骤第77页
        4.2.2 实验结果第77-88页
    4.3 组蛋白H2B在精子发生中的变化特征第88-90页
        4.3.1 方法与步骤第88页
        4.3.2 实验结果第88-90页
    4.4 组蛋白H2A在精子发生中的变化特征第90-92页
        4.4.1 方法与步骤第90页
        4.4.2 实验结果第90-92页
    4.5 讨论第92-96页
        4.5.1 碱性蛋白在十足目动物精子发生中的变化特征第92-93页
        4.5.2 中华绒螯蟹精子非浓缩核的初步分析第93-95页
        4.5.3 存在问题和展望第95-96页
结论第96-97页
参考文献第97-109页
致谢第109-110页
攻读博士期间取得的科研成果第110页

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