摘要 | 第5-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第12-23页 |
1.1 精子发生及与其相关的核碱性蛋白 | 第12-17页 |
1.1.1 精子发生 | 第12-13页 |
1.1.2 十足目甲壳动物的精子发生 | 第13页 |
1.1.3 精子核碱性蛋白及其在精子发生中的替代 | 第13-17页 |
1.1.4 精子核碱性蛋白的修饰在精子核形成中的作用 | 第17页 |
1.2 十足目非浓缩核的精子核及其碱性蛋白 | 第17-19页 |
1.3 中华绒螯蟹的雄性生殖系统 | 第19-22页 |
1.4 研究目的及意义 | 第22-23页 |
第2章 实验材料和方法 | 第23-36页 |
2.1 实验材料 | 第23页 |
2.2 主要实验仪器 | 第23-24页 |
2.3 主要实验药品及配方 | 第24-27页 |
2.4 试验技术 | 第27-36页 |
2.4.1 RNA提取及反转录反应 | 第27-28页 |
2.4.2 基因组DNA的提取 | 第28页 |
2.4.3 RNA的反转录 | 第28-29页 |
2.4.4 常规PCR反应 | 第29页 |
2.4.5 目的片段的回收 | 第29-30页 |
2.4.6 TA克隆及测序 | 第30页 |
2.4.7菌种的保存 | 第30页 |
2.4.8 质粒的提取 | 第30-31页 |
2.4.9 目的基因与表达载体p ET-30a的连接 | 第31页 |
2.4.10目的基因的表达 | 第31页 |
2.4.11镍柱纯化融合蛋白 | 第31-32页 |
2.4.12多克隆抗体的制备 | 第32页 |
2.4.13 Western blot检测抗体 | 第32-33页 |
2.4.14石蜡切片 | 第33页 |
2.4.15免疫荧光 | 第33-34页 |
2.4.16免疫电镜 | 第34-36页 |
第3章 中华绒螯蟹组蛋白H2B、H2A、H3和H4的基因克隆、原核表达及抗体制备25 | 第36-73页 |
3.1 组蛋白H2B的基因克隆,原核表达及抗体制备 | 第36-45页 |
3.1.1 方法与步骤 | 第36-37页 |
3.1.2 实验结果 | 第37-45页 |
3.2 组蛋白H2A的基因克隆,原核表达及抗体制备 | 第45-53页 |
3.2.1 方法与步骤 | 第45-46页 |
3.2.2 实验结果 | 第46-53页 |
3.3 组蛋白H3的基因克隆及原核表达 | 第53-60页 |
3.3.1 方法与步骤 | 第53-54页 |
3.3.2 实验结果 | 第54-60页 |
3.4 组蛋白H4的基因的克隆及原核表达 | 第60-67页 |
3.4.1 方法与步骤 | 第60-61页 |
3.4.2 实验结果 | 第61-67页 |
3.5 讨论 | 第67-73页 |
3.5.1 组蛋白基因的克隆 | 第67-68页 |
3.5.2 原核表达载体的构建 | 第68-70页 |
3.5.3 重组蛋白的表达 | 第70页 |
3.5.4 重组蛋白的纯化 | 第70-71页 |
3.5.5 多克隆抗体的制备 | 第71页 |
3.5.6 Western blot分析 | 第71-73页 |
第4章 中华绒螯蟹四种组蛋白H2B、H2A、H3和H4在精子发生中的变化 | 第73-96页 |
4.1 精巢的组织切片 | 第73-77页 |
4.1.1 方法与步骤 | 第73页 |
4.1.2 实验结果 | 第73-77页 |
4.2 组蛋白H3和H4在精子发生中的变化特征 | 第77-88页 |
4.2.1 方法与步骤 | 第77页 |
4.2.2 实验结果 | 第77-88页 |
4.3 组蛋白H2B在精子发生中的变化特征 | 第88-90页 |
4.3.1 方法与步骤 | 第88页 |
4.3.2 实验结果 | 第88-90页 |
4.4 组蛋白H2A在精子发生中的变化特征 | 第90-92页 |
4.4.1 方法与步骤 | 第90页 |
4.4.2 实验结果 | 第90-92页 |
4.5 讨论 | 第92-96页 |
4.5.1 碱性蛋白在十足目动物精子发生中的变化特征 | 第92-93页 |
4.5.2 中华绒螯蟹精子非浓缩核的初步分析 | 第93-95页 |
4.5.3 存在问题和展望 | 第95-96页 |
结论 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
攻读博士期间取得的科研成果 | 第110页 |